GB/T 45211.3-2025 小麦抗病虫性评价技术规程 第3部分：秆锈病

ICS65.020.01
CCS B15
中华人民共和国国家标准
GB/T45211.3—2025
小麦抗病虫性评价技术规程
第3部分:秆锈病
Technicalcodeofpracticeforevaluationofresistancetodiseasesand
insectpestsinwheat—Part3:Stem (black)rust
2025-01-24发布2025-08-01实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发布

前 言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本 文件是GB/T45211《小麦抗病虫性评价技术规程》的第3部分。GB/T45211已经发布了以下
部分:
———第1部分:条锈病;
———第2部分:叶锈病;
———第3部分:秆锈病;
———第4部分:赤霉病;
———第5部分:纹枯病;
———第6部分:黄矮病;
———第7部分:蚜虫;
———第8部分:吸浆虫。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中华人民共和国农业农村部提出并归口。
本文件起草单位:中国农业科学院植物保护研究所。
本文件主要起草人:陈万权、刘太国、陈巨莲、徐世昌。
Ⅰ
GB/T45211.3—2025
引 言
GB/T45211《小麦抗病虫性评价技术规程》旨在规范小麦抗病虫性鉴定技术方法、操作程序和鉴定
评价原则,为育种材料筛选、杂交后代选择、抗病基因发掘和品种评价审定等提供规范的标准化技术方
法,对指导和推动我国小麦抗病育种、品种布局和植物检疫等具有重要作用。针对小麦生产中具有较大
危害的8种重要病虫害,GB/T45211拟分为以下8个部分:
———第1部分:条锈病;
———第2部分:叶锈病;
———第3部分:秆锈病;
———第4部分:赤霉病;
———第5部分:纹枯病;
———第6部分:黄矮病;
———第7部分:蚜虫;
———第8部分:吸浆虫。
Ⅱ
GB/T45211.3—2025
小麦抗病虫性评价技术规程
第3部分:秆锈病
1 范围
本文件界定了小麦抗秆锈病评价技术的术语和定义,确立了评价程序,规定了接种体制备、田间抗
病性鉴定和苗期抗病性鉴定等内容,描述了证实方法。
本文件适用于小麦属植物对秆锈病抗性的田间和室内鉴定和评价。
2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
小麦秆锈病 wheatstemrust;wheatblackrust
由小麦秆锈菌(Pucciniagraminisf.sp.tritici)引起的茎秆或叶片上产生铁锈状病斑症状的小麦
病害。
3.2
抗病性 diseaseresistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。
3.3
侵染型 infectiontype
依据病害侵染点坏死反应的强弱、病斑大小、形状与色泽、病斑上子实体发育程度等特征划分用以
表示小麦品种抗秆锈病程度。
注:按0、;、1、2、3和4等六个类型记载,各类型通过附加“+”或“-”号,以表示偏重或偏轻。
3.4
慢锈 slowrusting
在适于锈病发生环境条件下,侵染型为3型~4型,但田间病害发展速度相对较慢,终期病情指数
低于30的特性。
3.5
致病性 pathogenicity
病原物所具有的干扰寄主生长并引起病变的能力。
3.6
人工接种 artificialinoculation
通过人工操作将接种体放于植物体感病部位并使之发病的过程。
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3.7
病情级别 diseaseratingscale
植物个体或群体发病程度的数值化描述。
注:包括侵染型、普遍率、严重度和病情指数。
3.8
抗性评价 evaluationofresistance
采用技术标准判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的过程。
3.9
分离物 isolate
采用人工方法从植物发病部位获得的在特定环境条件下培养的病原物。
3.10
接种体 inoculum
人工繁殖或收集的能够侵染寄主并引起病害的病原体。
3.11
生理小种 physiologicalrace
各生理小种之间形态上无差异,但对具有不同抗病基因的鉴别寄主致病力存在差异。
注:病原菌种、变种或专化型内的分类单位。
3.12
鉴别寄主 differentialhost
用于鉴定和区分特定病原菌生理小种或菌系的、一套带有不同抗病基因的寄主品种或品系。
3.13
普遍率 incidence
发病率
发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率,用以表示发病的普遍程度。
注:在本文件中,植物体单元为叶片。
3.14
严重度 severity
发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或总体积的百分率。
3.15
病情指数 diseaseindex
全面衡量普遍程度与严重程度的综合指标。
3.16
潜育 latentperiod
从病原菌侵入寄主后建立寄生关系开始到出现明显症状为止的时期。
4 评价程序
小麦抗秆锈病评价程序包括接种体制备、接种方法、严重度记载、苗期或成株期抗秆锈病性评价。
小麦抗秆锈病评价程序见图1。
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图1 小麦抗秆锈病评价程序流程图
5 接种体制备
5.1 小麦秆锈菌分离
采集具有典型秆锈病病斑的小麦发病茎秆或叶片置于铺有滤纸的培养皿中,平展叶片或茎秆,浸泡
16h~24h,用刀片刮取发病病斑,将刮下的夏孢子涂抹于感病品种上,均匀喷雾,置于15 ℃~24 ℃的
保湿间内黑暗保湿18h~24h,取出后置于温室培养,15d~17d后观察是否发病,获得分离物。分离
物经形态学鉴定确认为Pucciniagraminisf.sp.tritici 后,进行单孢(堆)纯化,致病性测定后,扩繁保
存备用。
注:感病品种如铭贤169、McNair701、LittleClub等。
5.2 小麦秆锈菌分离菌株的生理小种鉴定
将用于抗性鉴定接种的分离物首先进行生理小种鉴定(见附录A 中A.1)。生理小种鉴别寄主采用
一套国际标准鉴别寄主、国内辅助鉴别寄主及含有Sr5、Sr6、Sr7b、Sr8a、Sr9b、Sr9e、Sr9g、Sr11、
Sr17、Sr21、Sr30 和Sr36 的12个单基因系,根据秆锈菌与鉴别寄主相互作用产生的抗病或感病模式,
划分出不同的生理小种或致病类型(见A.2)。
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5.3 小麦秆锈菌繁殖和保存
5.3.1 育苗
秆锈菌夏孢子在感病品种上繁殖。即选用直径为10cm、高度为10cm 的盆钵,内装富含有机质的
土壤,每盆播种20粒~25粒健康饱满感病品种种子,覆土1cm 盖种,将育苗钵置于盛水的育苗盘内,
使水从育苗钵底部缓慢吸收至土表完全湿润,移出,置于15℃~20℃温室内培养6d~8d,待用。
5.3.2 接种
接种在操作台(或接种间)内进行。首先用喷雾法净化空气,再用75%(体积分数)的乙醇对操作台
(接种间)、接种针和手进行消毒。将待接种幼苗放在操作台(接种间)上,在幼苗转移时应套袋或采取其
他措施防止空气中的孢子污染;写标签,记录接种日期及接种的菌种编号;用手蘸取小麦秆锈菌夏孢子
(或者从标样保湿后刮取少量夏孢子),接种到无菌苗的第1叶片上。
5.3.3 保湿
将接种后幼苗置于保湿桶中,用清水喷雾,使叶片表面附着一层水膜,密封,15 ℃~24 ℃黑暗条件
下保湿24h,取出后温室内培养潜育。
5.3.4 菌种繁殖
5.3.4.1 初繁
待感病品种无菌苗第1叶片完全展开后,从液氮中取出装有菌种的安瓿瓶,在40 ℃温水中活化
5min~7min,之后打开安瓿瓶,置于盛有湿润滤纸的培养皿中(相对湿度大于50%)于20 ℃±5 ℃黑
暗条件水化10h~12h。
5.3.4.2 初繁接种
从指形管中取出少许秆锈菌夏孢子放在洁净的毛玻璃上,用滴管加入少量水,用接种针将秆锈菌孢
子与水拌匀备用。另外用洁净的手指蘸清水或0.05%吐温-20(Tween-20)水溶液摩擦麦苗的叶片数
次,去掉叶片表面的蜡质和茸毛,以利于菌液吸附于叶面上。用消毒过的接种针蘸上调制好的孢子悬浮
液,涂抹于麦叶下表面,插标签,记录接种日期及所用菌种。接种后把麦苗随即放入保湿桶中,再用喷雾
器喷雾,使麦苗和保湿桶的内壁沾满雾滴,喷雾不能过量。喷雾后,立即用盖严塑料薄膜或玻璃进行密
封,保湿桶置于20℃±5℃黑暗条件下保湿18h~24h,取出后温室内培养潜育。
注:在接种不同生理小种时,接种用的一切用具都要先行消毒,防止可能发生的污染。
5.3.4.3 扩繁
可采用扫抹法、喷(撒)粉法或喷雾法接种。
a) 扫抹法:将一叶期的感病品种置于接种桶内,用0.05%吐温-20水溶液叶面喷洒,然后将发病
幼苗倒置,使发病叶片在接种桶内的无菌苗叶片上扫抹3次~5次,再用0.05%吐温-20水溶
液喷雾,使叶片表面附着一层均匀的雾滴,密封,置于20 ℃±5 ℃黑暗保湿18h~24h,取出
后温室内培养潜育。
b) 喷(撒)粉法:小喷粉器(或用双层纱布封口的玻璃试管)经消毒、干燥后,按20∶1~30∶1(质
量比)比例均匀混合干燥滑石粉与秆锈菌夏孢子。接种前,用手蘸清水将叶片拂擦数次,以去
掉叶片蜡质,用喷雾器在麦苗上均匀喷上雾滴,随即用喷粉器(或用双层纱布封口的玻璃试管)
将上述稀释的夏孢子粉均匀地喷洒(或抖落)到叶片上,再用喷雾器喷雾,随即放入保湿桶中,
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盖上塑料薄膜,置于20℃±5℃黑暗保湿18h~24h,取出后温室内培养潜育。
c) 喷雾法:取秆锈菌夏孢子置于小烧杯内,先用少量清水湿润后,搅成糊状,成株期按每2g夏孢
子加入1000mL水,转移至喷雾器内;或苗期按每10mg夏孢子加入1mL无毒轻量矿物油
稀释成夏孢子悬浮液。用小型喷雾器将新制备好的孢子悬浮液喷在已去除蜡质的麦苗上,自
然干燥15min~30min然后将麦苗放于保湿桶内,20℃±5℃黑暗保湿18h~24h,取出后
温室内培养潜育。
注:喷(撒)粉法及喷雾法适于对大量材料的接种鉴定。
5.3.5 潜育发病
取出保湿的幼苗,放置于可控制温度和光照的温室内潜育发病,保持昼温25℃~30℃,夜温18℃~
25℃;光照强度:6000lx~10000lx,光照时间:16h。待叶片现斑时(接种后约7d),剪去心叶,加玻璃
罩隔离保纯。接种后约12d~15d,夏孢子即可成熟,备用。
5.3.6 菌种收集
空气净化和器具消毒操作同5.3.2,轻取产孢麦苗,小心横放,用接种针轻轻抖动其叶片,使菌种散
落到玻璃罩内,移去麦苗,再轻敲玻璃罩,将菌种集中,收集装入指形管。
5.3.7 菌种保藏
5.3.7.1 短期保藏
当菌种在5d~6d内使用时可短期保藏。将装菌种的指形管放入盛有变色硅胶的干燥器内,置在
0℃~5℃冰箱中。
5.3.7.2 长期保藏
将菌种置于盛有变色硅胶的干燥器内,放在0 ℃~5 ℃冰箱中干燥5d~6d,移至安瓿管中,抽真
空30min,封管,置于液氮或-80℃超低温冰箱中。
6 田间抗病性鉴定
6.1 鉴定圃选址
鉴定圃应设置在小麦秆锈病适发区,选择具备良好的自然发病环境和灌溉条件、地势平坦,土壤肥
沃的地块。
6.2 鉴定感病对照品种和诱发行品种选择
鉴定感病对照品种和诱发行品种可采用本地高感小麦秆锈病品种。
注:冬性感病品种铭贤169、McNair701、LittleClub等。
6.3 鉴定圃田间设置及大田播种
6.3.1 田间设置
采用开畦条播、等行距设置方式(图2)。畦埂宽50cm,畦宽250cm,畦长视地形、地势而定;距畦
埂125cm 处顺畦种1行诱发行,在诱发行两侧20cm 横向种植鉴定材料,行长100cm,行距33cm,重
复1次~3次,顺序排列,编号,鉴定圃四周设100cm 宽的保护区。
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注: :表示畦埂;
:表示诱发行和对照品种;
:表示鉴定材料。
图2 鉴定圃田间设置示意图
6.3.2 播种
6.3.2.1 播种时间
播种时间与大田生产一致,或适当调整不同材料的播期以使植株接种期和发病期能够与适宜的气
候条件(湿度与温度)相遇。
6.3.2.2 播种方式及播种量
采用人工开沟的方式。每份材料播种1行,每隔20份鉴定材料播种1行感病对照品种铭贤169,
鉴定材料每行均匀播种100粒;诱发行按每100cm 行长均匀播种100粒。
6.4 接种
6.4.1 接种期
小麦秆锈病抗性鉴定接种期为小麦孕穗期,选择晴朗无风的傍晚进行。
6.4.2 人工接种方法
可采用以下方法人工接种。
a) 喷雾法:接种前3d~4d应先进行田间灌溉,或在雨后接种。将所选生理小种的夏孢子粉用数
滴0.05%吐温-20水溶液调成糊状,按每2g孢子加入1000mL水比例稀释成夏孢子悬浮液。
诱发行每隔500cm 设100cm 长的接种段,用手持式喷雾器将夏孢子悬浮液均匀喷洒在接种
段的小麦叶片上,之后速覆盖塑料薄膜,四周用土压严,次日清晨揭去薄膜。接种后若遇持续
干旱,应及时进行田间浇灌。
b) 注射法:接种前,应配制好孢子悬浮液,配制方法同前,一般在诱发行上每隔100cm 左右选取
10个~20个单茎分别注射接种。其方法是用注射器将孢子悬浮液从小麦心叶与其下的展开
叶叶鞘相接处以下约1cm 处注射,针头易向下倾斜刺入,但不要刺穿,挤压少量悬浮液,以见
到心叶处冒出水珠为度。孢子悬浮液需随用随搅拌或振荡。田间接种注射宜在阴天的傍晚进
行。如天气干旱,接种后在接种点上浇水1次~2次,也可在接种前后适当灌水,不施用任何
杀菌剂。
6.5 病情调查
6.5.1 调查时间
在小麦进入乳熟期至腊熟期进行调查。
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6.5.2 调查方法
调查时每份材料随机抽样20茎~50茎,逐茎进行调查记载严重度、侵染型,计算普遍率、平均严重
度和病情指数,调查2次,间隔10d。
6.5.3 病情级别记载
6.5.3.1 侵染型记载
小麦成株期茎秆上的病斑侵染型按0、;、1、2、3和4等6个类型记载,苗期叶片上的病斑侵染型按
0、;、1、2、X、Y、Z、3和4等9个类型记载(表1),用以表示小麦品种抗锈程度。侵染型类型及判别标准
见表1。根据各级侵染型的症状,逐茎(叶)调查记载侵染型。
表1 小麦秆锈病侵染型级别及其症状
侵染型症状
0 无夏孢子或者较大的侵染点
; 无夏孢子,但存在不同大小的过敏性坏死斑或者褪绿斑
1 夏孢子堆小,周围有枯死反应
2 夏孢子堆小到中等,周围有失绿或坏死反应
X 纯培养物接种时不同大小的夏孢子堆在单个叶片上随机分布
Y 不同大小的夏孢子堆规则排列,大夏孢子堆排列在叶尖
Z 不同大小的夏孢子堆规则排列,大夏孢子堆排列在叶基部
3 夏孢子堆中等大小,周围组织褪绿但很少枯死
4 夏孢子堆大而多,周围组织无褪绿或枯死反应
注:侵染型级别经常用如下符号进行精细划分,即“-”:夏孢子堆较正常侵染型夏孢子堆略小;“+”:夏孢子堆较
正常侵染型夏孢子堆略大;“C”:褪绿较正常侵染型多;“N”:坏死较正常侵染型多。在单个叶片(茎秆)上有
几种侵染型时可用“,”隔开,主要侵染型记录在前,如4,;或者2=,2+或者1,3C等。
6.5.3.2 严重度记载及平均严重度计算
严重度用分级法表示,设0、1%、5%、10%、20%、40%、60%、80%和100%九级。调查时每份材料
随机抽样调查20茎~50茎小麦,逐秆记载严重度,按照公式(1)计算平均严重度。
S =Σn
i=1 (Xi·Si)/Σn
i=1
Xi ×100 …………………………(1)
式中:
S ———平均严重度,%;
i ———病级数(1~n);
Xi ———病情为i 级的单元数;
Si ———病情为i 级的严重度值(如小麦秆锈病各级的百分数)。
6.5.3.3 普遍率记载及计算
每一鉴定材料随机调查20片~50片叶,计数发病叶片,按照公式(2)计算普遍率。
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P =(l/t)×100 …………………………(2)
式中:
P ———普遍率,%;
l ———发病叶片数;
t ———总叶片数。
6.5.3.4 病情指数计算
按照公式(3)计算病情指数。
DI=Σn
i=0 (Xi·Si)/Σn
i=0 (Xi·Smax)×100 …………………………(3)
式中:
DI ———病情指数;
i ———病级数(0~n);
Xi ———i 级的单元数;
Si ———i 级严重度的代表值;
Smax ———严重度最高级值。
6.6 抗性评价
6.6.1 鉴定有效性判别
当鉴定圃中的感病或高感对照品种发病严重度为60%以上时,则该批次抗秆锈病鉴定视为有效。
6.6.2 重复鉴定
初次鉴定中表现为高抗、中抗的材料,次年需用相同的病原菌进行重复鉴定。
6.6.3 抗性评价方法
依据鉴定材料发病程度(病情指数和侵染型)确定其对秆锈病的抗性水平,其评价见表2。如果
2年鉴定结果不一致,以抗性弱的发病程度为准。
表2 小麦成株期抗秆锈病评价
侵染型病情指数抗性评价
0 — 免疫Immune(IM)
; — 近免疫Nearlyimmune(NI)
1 — 高抗Highlyresistant(HR)
2 — 中抗Moderatelyresistant(MR)
X~Y >30 中间型Medium (M)
3~4 ≤30 慢锈Slowrusting(SR)
3 >30 中感Moderatelysusceptible(MS)
4 >30 高感Highlysusceptible(HS)
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6.7 鉴定记载表格
小麦抗秆锈病鉴定原始记录及结果记载表格按附录B中表B.1。
7 苗期抗病性鉴定
7.1 育苗
鉴定材料按一定顺序种植于鉴定苗钵或方形塑料盒内,待第1片叶充分展开后用于接种。
7.2 感病对照品种
鉴定所用感病对照采用当地高感品种。
注:冬性高感品系如铭贤169。
7.3 接种方法
见5.3.4.3c)中喷雾法。
7.4 病情调查及记载
7.4.1 调查时间
在幼苗接种后15d~17d进行病情调查。
7.4.2 调查方法及项目
逐叶调查记载侵染型。
7.4.3 侵染型记载
病斑侵染型按0、0;、1、2、3和4等6个类型记载,划分级别见表1、图3和图4。每一鉴定材料随机
调查20片~50片叶,逐叶调查记载侵染型,当发现同一叶片上出现不同侵染型时,主要侵染型记录
在前。
图3 小麦秆锈病成株期茎秆上的抗性分级图
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图4 小麦秆锈病苗期叶片上的侵染型分级图
7.5 抗性评价
7.5.1 鉴定有效性判别
当感病或高感对照品种侵染型为3型~4型时,则该批次抗秆锈病鉴定视为有效。
7.5.2 重复鉴定
初次鉴定中表现为高抗、中抗的材料,需用相同的病原菌进行重复鉴定1次。
7.5.3 抗性评价
依据鉴定材料发病程度(病情指数和侵染型)确定其对秆锈病的抗性水平,评价见表3。如果两次
鉴定结果不一致,可再重复鉴定1次同时以抗性弱的发病程度为准。
表3 小麦苗期抗秆锈病评价
侵染型抗性评价
0 免疫Immune(IM)
; 近免疫Nearlyimmune(NI)
1 高抗Highlyresistant(HR)
2 中抗Moderatelyresistant(MR)
X~Y 中间型Medium (M)
3~4 慢锈Slowrusting(SR)
3 中感Moderatelysusceptible(MS)
4 高感Highlysusceptible(HS)
7.5.4 鉴定记载表格
小麦抗秆锈病鉴定原始记录及结果记载表格按表B.2。
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附 录 A
(资料性)
小麦秆锈病病原菌和生理小种
A.1 学名和形态
小麦秆锈菌是禾柄锈锈菌小麦变种Pucciniagraminisf.sp.tritici,属真菌界(Fungi)、担子菌门
(Basidiomycota)、柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)、柄锈菌纲(Pucciniomycetes)、柄锈菌目
(Pucciniales)、柄锈菌科(Puccinaceae)、柄锈菌属(Puccinia)。菌丝丝状,有分隔,寄生在小麦细胞间
隙,产生夏孢子和冬孢子在小麦上。夏孢子单胞,椭圆形,暗橙黄色,大小(17μm~47μm)×(14μm~
22μm),表面生有棘状突起,中腰部有发芽孔4个。冬孢子双胞,棍棒形至纺锤形,大小(35μm~
65μm)×(11μm~22μm),顶端壁略厚,圆形或稍尖,柄长。该菌可产生5种不同类型的孢子。冬孢
子萌发产生小孢子,小孢子为害转主寄主小蘖,且在小蘖叶片正面形成性孢子器及性孢子,在叶背面产
生锈子器和锈孢子。小麦秆锈菌致病性有生理分化现象,目前我国已命名40多个生理小种,其中
21C3CKR、21C3CKH 和21C3CTR为优势致病类型。
A.2 生理小种鉴定方法
A.2.1 鉴别寄主
小麦秆锈菌生理小种鉴别寄主采用国际标准鉴别寄主、国内辅助鉴别寄主及含有Sr5、Sr6、Sr7b、
Sr8a、Sr9b、Sr9e、Sr9g、Sr11、Sr17、Sr21、Sr30 和Sr36 的12个单基因系。开放式鉴别寄主包括:爱
因亢(Einkorn)、免字52、明尼2761(Minnesota2761)、华东6号、如罗(Rulofen)、欧柔(Orofen)。根据
秆锈菌与鉴别寄主相互作用产生的抗病或感病模式,划分出不同的生理小种或致病类型。
A.2.2 命名系统
根据中国小麦秆锈菌生理小种类群在鉴别寄主幼苗上的侵染型生理小种进行命名,见表A.1。
表A.1 中国小麦秆锈菌生理小种类群在鉴别寄主幼苗上的侵染型
生理小种
及致病
类型
鉴别寄主及Sr 单基因系
Einkorn 兔子
52
明尼
2761
华东
6号Rulofen OrofenSr5 Sr21 Sr9eSr7bSr11 Sr6 Sr8aSr9gSr36Sr9bSr30Sr17
21C3CKH L H L H L L L L L H L H H H L H L H
21C3CKR L H L H L L L L L H L H H H H H L H
21C3CFH L H L H L L L L L H L L H H L H L H
21C3CFR L H L H L L L L L H L L H H H L L H
21C3CTH L H L H L L L L L H H H H H L H L H
21C3CTR L H L H L L L L L H H H H H H H L H
21C3CPH L H L H L L L L L H H L H H L H L H
21C3CPR L H L H L L L L L H H L H H H L L H
34MKH L L L L L L H L L H L H H H L H L H
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表A.1 中国小麦秆锈菌生理小种类群在鉴别寄主幼苗上的侵染型(续)
生理小种
及致病
类型