GB/T 45211.2-2025 小麦抗病虫性评价技术规程 第2部分：叶锈病

ICS65.020.01
CCS B15
中华人民共和国国家标准
GB/T45211.2—2025
小麦抗病虫性评价技术规程
第2部分:叶锈病
Technicalcodeofpracticeforevaluationofresistancetodiseasesand
insectpestsinwheat—Part2:Leaf(brown)rust
2025-01-24发布2025-08-01实施
国家市场监督管理总局
国家标准化管理委员会发布

前 言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本 文件是GB/T45211《小麦抗病虫性评价技术规程》的第2部分。GB/T45211已经发布了以下
部分:
———第1部分:条锈病;
———第2部分:叶锈病;
———第3部分:秆锈病;
———第4部分:赤霉病;
———第5部分:纹枯病;
———第6部分:黄矮病;
———第7部分:蚜虫;
———第8部分:吸浆虫。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中华人民共和国农业农村部提出并归口。
本文件起草单位:中国农业科学院植物保护研究所。
本文件主要起草人:陈万权、刘太国、陈巨莲、徐世昌。
Ⅰ
GB/T45211.2—2025
引 言
GB/T45211《小麦抗病虫性评价技术规程》旨在规范小麦抗病虫性鉴定技术方法、操作程序和鉴定
评价原则,为育种材料筛选、杂交后代选择、抗病基因发掘和品种评价审定等提供规范的标准化技术方
法,对指导和推动我国小麦抗病育种、品种布局和植物检疫等具有重要作用。针对小麦生产中具有较大
危害的8种重要病虫害,GB/T45211拟分为以下8个部分:
———第1部分:条锈病;
———第2部分:叶锈病;
———第3部分:秆锈病;
———第4部分:赤霉病;
———第5部分:纹枯病;
———第6部分:黄矮病;
———第7部分:蚜虫;
———第8部分:吸浆虫。
Ⅱ
GB/T45211.2—2025
小麦抗病虫性评价技术规程
第2部分:叶锈病
1 范围
本文件界定了小麦抗叶锈病评价技术的术语和定义,确立了评价程序,规定了接种体制备、田间抗
病性鉴定和苗期抗病性鉴定等内容,描述了证实方法。
本文件适用于小麦属植物对叶锈病抗性的田间和室内鉴定和评价。
2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
小麦叶锈病 wheatleafrust;wheatbrownrust
由小麦叶锈病菌(Pucciniatriticina)引起的在叶部产生铁锈状病症的小麦病害。
3.2
抗病性 diseaseresistance
植物体所具有的能够减轻或克服病原物致病作用的可遗传性状。
3.3
侵染型 infectiontype
依据病害侵染点坏死反应的强弱、病斑大小、形状与色泽、病斑上子实体发育程度等特征划分用以
表示小麦品种抗叶锈病程度。
注:按0、;、1、2、3和4等6个类型记载,各类型通过附加“+”或“-”号,以表示偏重或偏轻。
3.4
慢锈 slowrusting
在适于叶锈病发生环境条件下,侵染型为3型~4型,但田间病害发展速度相对较慢,终期病情指
数低于30的特性。
3.5
致病性 pathogenicity
病原物所具有的干扰寄主生长并引起病变的能力。
3.6
人工接种 artificialinoculation
通过人工操作将接种体放于植物体感病部位并使之发病的过程。
3.7
病情级别 diseaseratingscale
植物个体或群体发病程度的数值化描述。
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注:包括侵染型、普遍率、严重度和病情指数。
3.8
抗性评价 evaluationofresistance
采用技术分级判别寄主植物对特定病虫害反应程度和抵抗水平的过程。
3.9
分离物 isolate
采用人工方法从植物发病部位获得的在特定环境条件下培养的病原物。
3.10
接种体 inoculum
人工繁殖或收集的能够侵染寄主并引起病害的病原体。
3.11
生理小种 physiologicalrace
各生理小种之间形态上无差异,但对具有不同抗病基因的鉴别寄主致病力存在差异。
注:病原菌种、变种或专化型内的分类单位。
3.12
鉴别寄主 differentialhost
用于鉴定和区分特定病原菌生理小种或菌系的一套带有不同抗病基因的寄主品种或品系。
3.13
普遍率 incidence
发病率
发病植物体单元数占调查植物体单元总数的百分率,用以表示发病的普遍程度。
注:在本文件中,植物体单元为叶片。
3.14
严重度 severity
发病植物单元上发病面积或体积占该单元总面积或总体积的百分率。
3.15
病情指数 diseaseindex
全面衡量普遍程度与严重程度的综合指标。
3.16
潜育 latentperiod
从病原菌侵入寄主后建立寄生关系开始到出现明显症状为止的时期。
4 评价程序
小麦抗叶锈病评价程序包括接种体制备、接种方法、严重度记载、苗期或成株期抗叶锈病性评价。
小麦抗叶锈病评价程序见图1。
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图1 小麦抗叶锈病评价程序流程图
5 接种体制备
5.1 小麦叶锈菌分离
采集具有典型叶锈病病斑的小麦发病叶片置于铺有滤纸的培养皿中,平展叶片,浸泡16h~24h,
用刀片轻刮发病病斑,将刮下的夏孢子涂抹于感病品种上,均匀喷雾,置于(20±5)℃的保湿间内黑暗保
湿18h~24h,14d后观察发病情况,获得分离物。分离物经形态学鉴定确认为Pucciniatriticina 后,
进行分单孢纯化,经致病性测定后,扩繁保存备用。
5.2 小麦叶锈菌分离菌株的生理小种鉴定
采用一套以Thacher为背景的分别含有Lr1、Lr2a、Lr2c、Lr3、Lr3ka、Lr9、Lr11、Lr16、Lr17、
Lr24、Lr26 和Lr30 共12个抗叶锈病基因的小麦材料,根据叶锈菌与鉴别寄主相互作用产生的抗病或
感病模式,划分出不同的生理小种或致病类型(见附录A 中表A.1)。
5.3 小麦叶锈菌繁殖和保存
5.3.1 育苗
叶锈菌夏孢子在感病品种上繁殖。选用直径为10cm、高度为10cm 的盆钵,装富含有机质的土
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壤,每盆播种20粒~25粒健康饱满感病品种,覆土1cm,之后将育苗钵置于盛水的育苗盘内,使水从育
苗钵底部缓慢吸收至土体表面完全湿润,移出,置于(20±5)℃温室内培养6d~8d,待用。
注:感病品种如郑州5389(或铭贤169)。
5.3.2 接种
接种在操作台(或接种间)内进行。首先用喷雾法净化空气,再用75%(体积分数)乙醇对操作台
(接种间)、接种针和手进行消毒。将待接种幼苗放在操作台(接种间)上,在幼苗转移时应套袋或采取其
他措施防止空气中的孢子污染;写标签,记录接种日期及接种的菌种编号;用手蘸取小麦叶锈菌夏孢子,
接种到无菌苗的第1叶片上。
5.3.3 保湿
将接种后幼苗置于接种桶中,用清水喷雾,使叶片表面附着一层均匀的雾滴,密封,在(20±5)℃黑
暗条件下保湿18h~24h。
5.3.4 菌种繁殖
5.3.4.1 菌种活化
待感病品种无菌苗第1叶片完全展开后,从液氮中取出装有菌种的安瓿瓶,在40 ℃温水中活化
5min~7min,之后置于铺有湿润滤纸的培养皿中(相对湿度大于50%),(20±5)℃黑暗活化10h~
12h。
5.3.4.2 初繁
采取涂抹法接种。从指形管中取出少许叶锈菌夏孢子放在洁净的毛玻璃上,用滴管加入少量水,用
接种针将叶锈菌夏孢子与水拌匀备用。另外用洁净的手指蘸清水或0.05%吐温-20(Tween-20)水溶液
摩擦麦苗叶片数次,去掉叶片表面的蜡质和茸毛,以利于菌液吸附于叶面上。用消毒过的接种针蘸上调
制好的孢子悬浮液,涂抹于麦叶正面,插标签,记录接种日期及所用菌种。接种后将麦苗随即放入保湿
桶中,再用喷雾器喷雾,使麦苗和保湿桶的内壁沾满雾滴,喷雾不能过量。喷雾后,立即盖上塑料薄膜或
玻璃密封,将保湿桶放置在(20±5)℃黑暗条件下保湿18h~24h,取出后置于(20±5)℃温室内培养。
注:在接种不同生理小种进行鉴定时,接种用的一切用具都要先行消毒,防止可能发生的污染。
5.3.4.3 扩繁
可采用涂抹法、扫抹法、喷(撒)粉法或喷雾法接种。
a) 扫抹法:将一叶期的感病幼苗置于接种桶内,用0.05%吐温-20水溶液叶面喷雾,然后将发病
幼苗倒置,使病叶片在接种桶内的无菌苗上扫抹3次~5次,再用0.05%吐温-20水溶液喷雾,
使叶片表面附着一层均匀的雾滴,密封,置于(20±5)℃黑暗保湿18h~24h,取出后置于
(20±5)℃温室内培养。
b) 喷(撒)粉法:小喷粉器(或用双层纱布封口的玻璃试管)经消毒、干燥后,按20∶1~30∶1(质
量比)比例均匀混合干燥滑石粉与叶锈菌夏孢子。接种前,用手蘸清水将叶片拂擦数次,以去
掉叶片蜡质,用喷雾器在麦苗上均匀喷上雾滴,用喷粉器(或用双层纱布封口的玻璃试管)将上
述稀释的孢子粉均匀地喷洒(或抖落)于叶片上,再用喷雾器喷雾,放入保湿桶中,使麦苗、保湿
桶内壁及塑料薄膜内表面都沾上水滴,掌握水滴不下滴为度,盖上塑料薄膜,置于(20±5)℃黑
暗保湿18h~24h,取出后置于(20±5)℃温室内培养。
c) 喷雾法:在小烧杯内,取叶锈菌夏孢子,先用少量清水湿润后,搅成糊状,成株期按每2g夏孢
子加入1000mL 水,转移至喷雾器内;或苗期按每10mg夏孢子加入1mL无毒轻量矿物油
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稀释成夏孢子悬浮液。用小型喷雾器将制备好的新鲜孢子悬浮液喷在已去除蜡质的麦苗上,
自然干燥15min~30min,然后将麦苗放于保湿桶内保湿,(20±5)℃黑暗保湿18h~24h,取出
后置于(20±5)℃温室内培养。
注:喷(撒)粉法及喷雾法适用于对大量材料的接种鉴定。
5.3.5 潜育发病
取出保湿的幼苗,放置于可控制温度的温室内潜育发病,冬季光照不足,需每天增加一定时间的人
工辅助光照。温度范围:昼20 ℃~25 ℃,夜15 ℃~20 ℃;光照强度:6000lx~10000lx,光照时间:
16h。待侵染点显症(接种后4d),剪去心叶,加玻璃罩隔离。接种后约12d~15d,夏孢子即可成熟,
备用。
5.3.6 菌种收集
空气净化和器具消毒操作同5.3.2,轻取产孢麦苗小心横放,用接种针轻轻抖动其叶片,使菌种散落
到玻璃罩内,移去麦苗,再轻敲玻璃罩,将菌种集中,装入指形管。
5.3.7 菌种保藏
5.3.7.1 短期保藏
当菌种在5d~6d内使用时可短期保藏。将装菌种的指形管放入盛有变色硅胶的干燥器内,置于
0℃~5℃冰箱中备用。
5.3.7.2 长期保藏
将菌种置于盛有变色硅胶的干燥器内,放在0 ℃~5 ℃冰箱中干燥5d~6d,移至安瓿管中,抽真
空30min,封管,置于液氮或-80℃超低温冰箱中。
6 田间抗病性鉴定
6.1 鉴定圃选址
鉴定圃应设置在小麦叶锈病适发区,选择具备良好的自然发病环境和灌溉条件、地势平坦,土壤肥
沃的地块。
6.2 鉴定感病对照品种和诱发行品种选择
选用当地感病对照品种作为诱发行品种。
注:如郑州5389(或铭贤169)。
6.3 鉴定圃田间设置及大田播种
6.3.1 田间设置
鉴定圃采用开畦条播、等行距设置方式(图2)。畦埂宽50cm,畦宽250cm,畦长视地形、地势而
定;距畦埂125cm 处顺畦种1行诱发行,在诱发行两侧20cm 横向种植鉴定材料,行长100cm,行距
33cm,重复1次~3次,顺序排列,编号,鉴定圃四周设100cm 宽的保护区。
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注: :表示畦埂;
:表示诱发行和对照品种;
:表示鉴定材料。
图2 鉴定圃田间设置示意图
6.3.2 播种
6.3.2.1 播种时间
播种时间与大田生产一致,或适当调整不同材料的播期以使植株接种期和发病期能够与适宜的气
候条件(湿度与温度)相遇。
6.3.2.2 播种方式及播种量
采用人工开沟的方式。每份材料播种1行,每隔20份鉴定材料播种1行感病对照品种铭贤169,
鉴定材料每行均匀播种100粒;诱发行按每100cm 行长均匀播种100粒。
6.4 接种
6.4.1 接种期
小麦叶锈病抗性鉴定接种期为小麦拔节期,选择晴朗无风的傍晚进行。
6.4.2 人工接种
可采用以下人工接种方法。
a) 喷雾法:接种前3d~4d应先进行田间灌溉,或在雨后接种。将所选生理小种的夏孢子粉用数
滴0.05%吐温-20水溶液调成糊状,按每2g孢子加入1000mL水稀释成夏孢子悬浮液。诱
发行每隔500cm 设100cm 长的接种段,用手持式喷雾器将夏孢子悬浮液均匀喷洒在接种段
的小麦叶片上,之后速覆盖塑料薄膜,四周用土压严,次日清晨揭去薄膜。接种后若遇持续干
旱,应及时进行田间浇灌。
b) 注射法:接种前,应配制好孢子悬浮液(配制方法同前),一般在诱发行上每隔100cm 左右选取
3个~5个单茎分别注射接种。方法是用注射器将孢子悬浮液从小麦心叶与其下的展开叶叶
鞘相接处以下约1cm 处注射,针头宜向下倾斜刺入,但不要刺穿,推进少量悬浮液,以见到心
叶处冒出水珠为度。孢子悬浮液需随用随搅拌或振荡。田间接种注射宜在阴天的傍晚进行。
如天气干旱,接种后在接种点上浇水1次~2次,也可在接种前后适当灌水,不施用任何杀
菌剂。
6.5 病情调查
6.5.1 调查时间
在小麦进入乳熟期进行调查。
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6.5.2 调查方法及项目
调查时每份材料随机抽样20片~50片叶(主要为旗叶),逐叶进行调查,记载严重度、侵染型,计算
普遍率、平均严重度和病情指数,调查2次,间隔10d。
6.5.3 病情级别记载
6.5.3.1 侵染型记载
田间成株期小麦病斑侵染型按0、;、1、2、3和4等6个类型划分,苗期小麦病斑侵染型可按0、;、1、
2、X、Y、Z、3和4等9个类型划分,划分标准见表1,各类型可附加“+”或“-”号,以表示偏重或偏轻,用
以表示小麦品种抗锈程度。根据各级侵染型的症状,逐叶调查记载侵染型。
表1 小麦叶锈病侵染型级别及其症状
侵染型症状
0 无症状
; 产生枯死斑点或失绿反应,不产生夏孢子堆
1 夏孢子堆很小,数量很少,通常不破裂,周围有枯死反应
2 夏孢子堆小到中等,周围有失绿反应
X 不同大小的夏孢子堆随机分布
Y 不同大小的夏孢子堆规则排列,大夏孢子堆排列在叶尖
Z 不同大小的夏孢子堆规则排列,大夏孢子堆排列在叶基
3 夏孢子堆中等大小,周围组织无枯死反应,但有轻微失绿现象
4 夏孢子堆大而多,周围组织无枯死或褪绿反应
注:侵染型级别经常用如下符号进行精细划分,即“-”:夏孢子堆较正常侵染型夏孢子堆略小;“+”:夏孢子堆较
正常侵染型夏孢子堆略大;“C”:褪绿较正常侵染型多;“N”:坏死较正常侵染型多。在单个叶片上有几种侵
染型时可用“,”隔开,主要侵染型记录在前,如4,;或者2=,2+或者1,3C等。
6.5.3.2 严重度记载及平均严重度计算
严重度用分级法表示,设0、1%、5%、10%、20%、40%、60%、80%和100%等9级。调查时每份材
料随机抽样20片~50片叶,逐叶记载严重度,按照公式(1)计算平均严重度。
S =Σn
i=1 (Xi·Si)/Σn
i=1
Xi ×100 …………………………(1)
式中:
S ———平均严重度,%;
i ———病级数(1~n);
Xi———病情为i 级的单元数;
Si ———病情为i 级的严重度值(如小麦叶锈病各级的百分数)。
6.5.3.3 普遍率记载及计算
每一鉴定材料随机调查20片~50片叶,计数发病叶片,按照公式(2)计算普遍率。
P =(l/t)×100 …………………………(2)
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式中:
P ———普遍率,%;
l ———发病叶片数;
t ———总叶片数。
6.5.3.4 病情指数记载及计算
按照公式(3)计算病情指数。
DI=Σn
i=0 (Xi·Si)/Σn
i=0 (Xi·Smax)×100 …………………………(3)
式中:
DI ———病情指数;
i ———病级数(0~n);
Xi ———i 级的单元数;
Si ———i 级严重度的代表值;
Smax ———严重度最高级值。
6.6 抗性评价
6.6.1 鉴定有效性判别
当鉴定圃中的感病或高感对照品种发病严重度为60%以上时,则该批次抗叶锈病鉴定视为有效。
6.6.2 重复鉴定
初次鉴定中表现为免疫、高抗、中抗的材料,次年需用相同的病原菌进行重复鉴定。
6.6.3 抗性评价标准
依据鉴定材料发病程度(病情指数和侵染型)确定其对叶锈病的抗性水平,评价标准见表2。如果
两年鉴定结果不一致,以抗性弱的发病程度为准。
表2 小麦对叶锈病抗性评价
侵染型病情指数抗性评价
0 — 免疫Immune(I)
; — 近免疫Nearlyimmune(NI)
1 — 高抗Highlyresistant(HR)
2 — 中抗Moderatelyresistant(MR)
3~4 ≤30 慢锈Slowrusting(SR)
3 >30 中感Moderatelysusceptible(MS)
4 >30 高感Highlysusceptible(HS)
6.7 鉴定记载表格
小麦抗叶锈病鉴定原始记录及结果按附录B中表B.1进行记录。
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7 苗期抗病性鉴定
7.1 育苗
鉴定材料按一定顺序种植于鉴定苗钵或方形塑料盒内,待第一叶片充分展开时用于接种。
7.2 感病对照品种
鉴定所用感病对照采用当地高感品种。
注:冬性高感品系如郑州5389或铭贤169。
7.3 接种方法
见5.3.4.3c)中喷雾法。
7.4 病情调查及记载
7.4.1 调查时间
在幼苗接种后10d~13d进行病情调查。
7.4.2 调查方法及项目
逐叶调查记载侵染型。
7.4.3 侵染型记载
病斑侵染型按0、;、1、2、3和4等6个类型记载,划分级别见表1、图3和图4。每一鉴定材料随机
调查20片~50片叶,逐叶调查记载侵染型,当发现同一叶片上出现不同侵染型时,主要侵染型记录
在前。
图3 小麦叶锈病苗期侵染型分级图(0~X 抗病,3~4感病)
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图4 小麦叶锈病成株期侵染型分级图(0~2抗病;3~4感病)
7.5 抗性评价
7.5.1 鉴定有效性判别
当感病或高感对照品种侵染型为3型~4型时,则该批次抗叶锈病鉴定视为有效。
7.5.2 重复鉴定
初次鉴定中表现为高抗、中抗的材料,需用相同的病原菌进行重复鉴定1次。
7.5.3 抗性评价
依据鉴定材料发病程度(病情指数和侵染型)确定其对叶锈病的抗性水平,评价见表3。如果两次
鉴定结果不一致,可再重复鉴定1次同时以抗性弱的发病程度为准。
表3 小麦对叶锈病抗性评价
侵染型抗性评价
0 免疫Immune(I)
; 近免疫Nearlyimmune(NI)
1 高抗Highlyresistant(HR)
2 中抗Moderatelyresistant(MR)
3~4 慢锈Slowrusting(SR)
3 中感Moderatelysusceptible(MS)
4 高感Highlysusceptible(HS)
7.5.4 鉴定记载表格
小麦抗叶锈病鉴定原始记录及结果按表B.2进行记录。
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附 录 A
(资料性)
小麦叶锈病病原菌和生理小种
A.1 学名和形态
小麦叶锈菌的病原菌是小麦柄锈菌Pucciniatriticina,属真菌界(Fungi)、担子菌门(Basidiomycota)
、柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)、柄锈菌纲(Pucciniomycetes)、柄锈菌目(Pucciniales)、柄锈菌科
(Puccinaceae)、柄锈菌属(Puccinia)。小麦叶锈病菌是转主寄主的长生活史型锈菌,唐松草、小乌头是
叶锈病菌的转主寄主。夏孢子单胞,球形至近球形,黄褐色,表面具细刺,有散生发芽孔6个~8个,大
小(18μm~29μm)×(17μm~22μm);冬孢子双胞,棒状,顶平,柄短暗褐色,大小(39μm~57μm)×
(15μm~18μm)。冬孢子萌发时产生4个担孢子,侵染转主寄主,产生锈子器和性子器。性子器橙黄
色,球形至扁球形,大小80μm~145μm,埋生在寄主表皮下,产生橙黄色椭圆形性孢子。锈子器生在
对应的叶背病斑处,能产生链状球形锈孢子,大小(16μm~26μm)×(16μm~20μm)。
A.2 生理小种鉴定方法
A.2.1 采用的鉴别寄主
生理小种鉴别寄主采用以Thacher为背景的分别含有Lr1、Lr2a、Lr2c、Lr3、Lr3ka、Lr9、Lr11、
Lr16、Lr17、Lr24、Lr26 和Lr30 等12个抗病基因的小麦材料。
A.2.2 叶锈菌生理小种密码命名系统
参照北美小麦叶锈菌生理小种密码命名系统进行命名,见表A.1。
表A.1 小麦叶锈病病原菌生理小种鉴定与命名
生理小
种名称
侵染型的抗病基因
Lr1 Lr2a Lr2c Lr3 Lr9 Lr16 Lr24 Lr26 Lr3Ka Lr11 Lr17 Lr30
毒力公式
(有效抗病基因/
无效抗病基因)