资源简介
ICS 67.100 CCS X 16
中华 人民 共和 国国 家标 准
GB 31656.26—2026
食品安全国家标准
水产品中苯甲酰脲类药物残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
National food safety standard—
Determination of benzoylureas residues in aquatic products— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method
2026-04-24 发布
2026-10-01 实施
发布
中华 人民 共和 国农 业农 村部中华人民共和国国家卫生健康委员会国家 市场 监督 管理 总局
GB 31656 .26—2026
前言
本文件按照 GB/T
1 .1—2020« 标准化工作导则
第 1 部分 : 标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草。
Ⅰ
GB 31656 .26—2026
食品安全国家标准
水产品中苯甲酰脲类药物残留量的测定
液相色谱串联质谱法
1 范围
本文件规定了水产品中苯甲酰脲类药物残留量检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法 .
本文件适用于鱼、虾、蟹、鳖等水产品中氯吡苯脲、灭幼脲、除虫脲、氟幼脲、杀铃脲、氟苯脲、氟铃脲、氟虫脲、氟酰脲、氟啶蜱脲、氯芬新、氟啶脲 12 种苯甲酰脲类药物残留量的测定 ,其他水产品的检测经验证后可参照执行 .
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款 . 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本 适用 于本 文件 ; 不注 日期 的引 用文 件 , 其最 新版 本(包括 所有 的修 改单)适用 于本文件 .
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 30891—2014 水产品抽样规范
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义 .
4 原理
测定 ,外标法定量 .
试样中的苯甲酰脲类药物 ,经乙腈提取 ,NG丙基乙二胺(PSA)分散固相萃取 ,液相色谱串联质谱法
5 试剂与材料
除非另有说明 ,所用试剂均为分析纯 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水 .
5 .1 试剂
5 .1 .1 甲醇(CH3 OH) :色谱纯 .
5 .1 .2 乙腈(CH3 CN) :色谱纯 .
5 .1 .3 甲酸(HCOOH) :色谱纯 .
5 .1 .4 氯化钠(NaCl) .
5 .1 .5 无水硫酸镁(MgSO4) :550 ℃灼烧 4 h,冷却后储于密闭容器中备用 .
5 .2 溶液配制
5 .2 .1 70%乙腈水溶液 :取乙腈 70 mL,用水稀释至 100 mL,混匀 .
5 .2 .2 0 .1%甲酸水溶液 :取甲酸 1 mL,用乙腈稀释至 1 000 mL,混匀 .
5 .3 标准品
氯吡苯脲、灭幼脲、除虫脲、氟幼脲、杀铃脲、氟苯脲、氟铃脲、氟虫脲、氟酰脲、氟啶蜱脲、氯芬新、氟啶脲标准品 ,纯度均 ≥98 .0% ,见附录 A.
5 .4 标准溶液制备
5 .4 .1 标准储备液 :取标准品各适量(相当于各待测组分 10 mg) ,精密称定 , 用乙腈溶解并稀释定容至
1
10 mL容量瓶 ,配制成浓度为 1 000 mg/L的标准储备液 . - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 6 个月 .
GB 31656 .26—2026
5 .4 .2 混合标准中间液 :准确量取上述标准储备液适量 , 用乙腈稀释制 成浓 度为 10 mg/L 的标 准中 间液 , - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 3 个月 .
5 .4 .3 混合标准工作液(1 μg/mL) :准确量取混合标准中间液适量 ,用乙腈稀释配制成浓度为 1 μg/mL标准工作液 . 4 ℃以下避光保存 ,有效期 2 周 .
5 .5 材料
5 .5 .1 NG丙基乙二胺(PSA) :40 μm~ 60 μm 或相当者 .
5 .5 .2 具塞刻度离心管 :10 mL、15 mL.
5 .5 .3 微孔滤膜 :0 .22 μm 有机系尼龙滤膜 .
6 仪器设备
6 .1 液相色谱串联质谱仪 :配有电喷雾离子源 .
6 .2 离心机 :8 000 r/ min或以上 .
6 .3 电子天平 :感量为 0 .000 01 g 和 0 .01 g.
6 .4 涡旋混合器 .
6 .5 氮吹仪 .
6 .6 超声波清洗器 .
7 试样的制备与保存
7 .1 试样的制备
按照 GB/T 30891—2014 附录 B 的要求制样 .
a) 取均质的供试样品 ,作为供试试样 ;
b) 取均质的空白样品 ,作为空白试样 ;
c) 取均质的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样 .
7 .2 试样的保存
- 18 ℃以下保存 .
8 测定步骤
8 .1 提取
准确称取水产品试料(2±0 .05)g,于 15 mL具塞刻度离心管中 ,加乙腈 6 mL,涡旋混合 30 s,超声提取 2 min,加无水硫酸镁 1 .5 g 和氯化钠 0 .2 g,涡旋混合 30 s,8 000 r/min离心 5 min,上清液移至另一 15 mL具塞刻度离心管中 ,残渣加乙腈 6 mL重复提取 1 次 ,合并 2 次提取液并用乙腈稀释至 15 mL,混匀 ,待净化 .
8 .2 净化
取剂10(准)0(确)m(量)g(取), 涡旋振荡(上述提取)1(液)m(7).in(5),8(m)0(L)00(于)r/(1)m(0)in(m)离心 5(L离心)中in,,上清液移至另(加无水硫酸镁) 一0.1(5)0gmL(和)离(N)G 心管中(丙基乙)二,于 5(胺)P℃(S)气(吸)吹(附)
至近干 ,准确加入 70%乙腈水溶液 1 mL溶解残留物 ,涡旋振荡 30 s,8 000 r/min,离心 5 min,取上清液 ,过 0 .22 μm 滤膜 ,供液相色谱串联质谱仪测定 .
8 .3 基质匹配标准曲线的制备
精密量取 1 μg/mL混合标准工作液适量 ,用乙腈稀释成含苯甲酰脲类药物浓度分别为 2 μg/L、5 μg/L、 10 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L的系列标准溶液 . 从上述标准溶液中各取 1 .0 mL加入试管中 , 吹氮至近干 ,加入 1 mL经提取和净化后的空白基质样品溶液 ,混匀 ,8 000 r/min,离心 5 min,取上清液 ,过滤膜 ,配制成基质匹配标准溶液 ,供液相色谱串联质谱仪测定 .
2
GB 31656 .26—2026
8 .4 测定
8 .4 .1 液相色谱参考条件
a) 色谱柱 :C18 柱 (100 mm×2 .1 mm ,3 .0 μm)或相当者 ;
b) 流动相 :A 为甲醇 ,B 为 0 .1%甲酸水溶液 ,梯度洗脱条件见表 1 ;
c) 流速 :0 .4 mL/min;
d) 柱温 :40 ℃ ;
e) 进样量 :20 μL.
表 1 流动相梯度洗脱条件
时间min
A
%
B
%
0
60
40
2 .0
95
5
8 .5
95
5
8 .6
60
40
10 .0
60
40
8 .4 .2 质谱参考条件
a) 电离方式 : 电喷雾电离(ESI) ;
b) 扫描方式 :负离子模式 ;
c) 检测方式 :多反应监测(MRM) ;
d) 蒸发气温度 :300 ℃ ;
f) 鞘气压力 :3 L/min(氮气) ;
e) 电喷雾电压 : - 3 000 V;
g) 辅助气压力 :1 .5 L/min(氮气) ;
h) 离子传输管温度 :350 ℃ ;
i) 碰撞气压力 :0 .2 Pa(氩气) ;
j) 母离子及定量定性离子、碰撞能量见表 2 .
表 2 化合物的母离子及定量定性离子、碰撞能量
化合物
定性离子对m/z
定量子离子m/z
碰撞能量eV
氯吡苯脲
246 .0>127 .1
246 .0>127 .1
14
246 .0>91 .2
29
灭幼脲
307 .0>154 .1
307 .0>154 .1
14
307 .0>126 .1
27
除虫脲
309 .0>289 .0
309 .0>289 .0
12
309 .0>156 .0
13
氟幼脲
343 .0>323 .0
343 .0>323 .0
13
343 .0>160 .0
27
杀铃脲
357 .0>154 .0
357 .0>154 .0
15
357 .0>176 .0
24
氟苯脲
379 .0>339 .0
379 .0>339 .0
13
379 .0>196 .0
25
氟铃脲
459 .0>439 .0
459 .0>439 .0
14
459 .0>275 .9
21
氟虫脲
487 .0>467 .1
487 .0>467 .1
12
487 .0>411 .1
15
氟酰脲
491 .0>471 .0
491 .0>471 .0
14
491 .0>305 .0
19
氟啶蜱脲
504 .0>304 .9
504 .0>304 .9
15
504 .0>484 .1
15
3
GB 31656 .26—2026
表 2 (续)
化合物
定性离子对m/z
定量子离子m/z
碰撞能量eV
氯芬新
509 .0>326 .0
509 .0>326 .0
20
509 .0>339 .0
14
氟啶脲
537 .9>518 .0
537 .9>518 .0
14
537 .9>355 .0
23
8 .4 .3 测定法
8 .4 .3 .1 定性测定
在同样测试条件下 ,试样溶液中的苯甲酰脲类药物的保留时间与基质匹配标准溶液中相应组分的保留时间相比 ,偏差在 ±0 .1 min以内 ,且检测到的相对离子比率 ,应当与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子比率一致 ,其允许相对偏差不超过 ±40% .
8 .4 .3 .2 定量测定
按 8 .4 .1 和 8 .4 .2 设定仪器条件 , 以基质匹配标准溶液浓度为横坐标、峰面积为纵坐标 ,绘制标准工作曲线 ,作单点或多点校准 ,按外标法计算试样中药物的残留量 ,基质匹配标准溶液及试样溶液中的目标物响应值均在仪器检测的线性范围内 . 标准溶液特征离子质量色谱图见附录 B. 对于试料中苯甲酰脲类药物残留量超过仪器测定线性范围的 ,应对试样溶液采用空白基质溶液稀释后测定 .
8 .5 空白试验
取空白试样 ,除不加药物外 ,采用相同的测定步骤进行平行操作 .
9 结果计算
试样中待测药物的残留量按标准曲线或公式(1)计算 .
ω = … … … … … … … … … … … … … (1)
式中 :
ω — 试样中待测药物残留量的数值 ,单位为微克每千克(μg/kg) ;
ρS — 基质匹配标准溶液中待测药物浓度的数值 ,单位为微克每升(μg/L) ;
A — 试样溶液中待测药物的峰面积 ;
V1 — 提取溶液总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;
V3 — 最终定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;
AS— 基质匹配标准溶液中待测药物的峰面积 ;
V2 — 吸取出用于净化的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;
m — 试样质量的数值 ,单位为克(g) ;
注 :计算结果保留 3 位有效数字 .
10 方法灵敏度、正确度和精密度
10 .1 灵敏度
本方法 12 种苯甲酰脲类药物的检出限为 2 .0 μg/kg,定量限为 5 .0 μg/kg.
10 .2 正确度
本方法在 5 .0 μg/kg~ 50 .0 μg/kg添加浓度的回收率为 70% ~ 120% .
10 .3 精密度
本方法的批内相对标准偏差 ≤15% ,批间相对标准偏差 ≤20% .
4
GB 31656 .26—2026
附录 A
(规范性)
苯甲酰脲类化合物信息
苯甲酰类化合物的中英文通用名称、CAS号、化学分子式和相对分子质量参见表 A.1。
表 A.1 苯甲酰脲类化合物标准物质的信息
序号
中文通用名称
英文通用名称
CAS号
化学分子式
相对分子质量
1
氯吡苯脲
Forchlorfenuron
68157__60__8
C12 H10 ClN3 O
247 .7
2
灭幼脲
Chlorbenzuron
57160__47__1
C14 H10 Cl2 N2 O2
309 .1
3
除虫脲
Diflubenzuron
35367__38__5
C14 H9 ClF2 N2 O2
310 .7
4
氟幼脲
Penfluron
35367__31__8
C15 H9 F5 N2 O2
344 .2
5
杀铃脲
Triflumuron
64628__44__0
C15 H10 ClF3 N2 O3
358 .7
6
氟苯脲
Teflubenzuron
83121__18__0
C14 H6 Cl2 F4 N2 O2
381 .1
7
氟铃脲
Hexaflumuron
86479__06__3
C16 H8 Cl2 F6 N2 O3
461 .1
8
氟虫脲
Flufenoxuron
101463__69__8
C21 H11 ClF6 N2 O3
488 .8
9
氟酰脲
Novaluron
116714__46__6
C17 H9 ClF8 N2 O4
492 .7
10
氟啶蜱脲
Fluazuron
86811__58__7
C20 H10 Cl2 F5 N3 O3
506 .2
11
氯芬新
Lufenuron
103055__07__8
C17 H8 Cl2 F8 N2 O3
511 .1
12
氟啶脲
Chlorfluazuron
71422__67__8
C20 H9 Cl3 F5 N3 O3
540 .6
5
GB 31656 .26—2026
附录 B
(资料性)
标准溶液特征离子质量色谱图
苯甲酰脲类化合物标准溶液特征离子质量色谱图见图 B.1 .
RT: 0 . 00- 10 . 02 SM: 7G RT: 0 . 00- 10 . 02 SM: 7G
RT: 5 . 60
100
80
氯吡苯脲
459 . 0>439 . 0
246 . 0>127 . 1
要 40
20
0
RT: 6 .47
100
80
灭幼脲
307 . 0>154 . 1
40
20
RT: 6 . 35
m/z= 470 . 50-471 . 50 F: -C ESI SRM ms2 491 . 000
[304 . 650-305 . 350 ,
除虫脲
309 . 0>289 . 0
40
20
RT: 6 . 35
m/Z= 304 . 50-305 . 50 F: -C ESI SRM ms2 504 . 000
氟啶蜱脲
氟幼脲
343 . 0>323 . 0
20
RT: 6 . 52
m/Z= 325 . 50- 326 . 50 F: -C ESI SRM ms2 509 . 000
[325 . 650-326 . 350 ,
氯芬新
杀铃脲
357 . 0>154. 0
20
RT: 7 . 31
m/Z= 517 . 50-518 . 50 F: -C ESI SRM ms2 537 . 900
氟啶脲
氟苯脲
537 . 9>518 . 0
379 . 0>339 . 0
40
20
0
2 4
NL: 2. 1 1E4
m/z= 338 . 50-339 . 50 F: -C ESI SRM ms2 379 . 000
[195 . 650- 196 . 350 ,
338 . 650-339 . 350] MS ICIS 5ppbstd
t, min 10
[354 . 650-355 . 350 ,
517 . 650-518 . 350] MS ICIS 5ppbstd
t, min 10
NL: 5 . 97E3
m/z= 466 . 50-467 . 50 F: -C ESI SRM ms2 487 . 000
[410 . 650-411 . 350 ,
466 . 650-467 . 350] MS ICIS 5ppbstd
NL: 6 . 48E4
m/Z= 438 . 50-439 . 50 F: -C ESI SRM ms2 459 . 000
[275 . 650-276 . 350 ,
438 . 650-439 . 350] MS ICIS 5ppbstd
NL: 1 . 59E4
m/Z= 153 . 50- 154 . 50 F: -C ESI SRM ms2 357 . 000
[153 . 650- 154. 350 ,
175 . 650- 176 . 350] MS ICIS 5ppbstd
NL: 6 . 93E3
m/z= 153 . 60- 154 . 60 F: -C ESI SRM ms2 307 . 000
[125 . 650- 126 . 350 ,
153 . 650- 154. 350] MS 5ppbstd
NL: 1 . 93E4
m/z= 126 . 60- 127 . 60 F: -C ESI SRM ms2 246 . 000
[90 . 650-91 . 350,
126 . 650- 127 . 350] MS 5ppbstd
NL: 4. 27E3
m/Z= 288 . 50-289 . 50 F: -C ESI SRM ms2 309 . 000
[155 . 650- 156 . 350 ,
288 . 650-289 . 350] MS 5ppbstd
NL: 2 . 80E4
m/Z= 322 . 50- 323 . 50 F: -C ESI SRM ms2 343 . 000
[159 . 650- 160 . 350 ,
322. 650-323 .350] MS ICIS 5ppbstd
[304 . 650-305 . 350 ,
483 . 650-484 . 350] MS ICIS 5ppbstd
470 . 650-471 . 350] MS ICIS 5ppbstd
338 . 650-339 .350] MS ICIS 5ppbstd
氟酰脲
491 . 0>471 . 0
氟虫脲
487 . 0>467 . 1
0 100
80
0 100
80
0 100
80
0 100
80
40
20
0
40
20
0
40
20
0
40
20
0
40
20
0
40
20
0
509 . 0>326 . 0
504 . 0>304. 9
NL: 4. 53E4
NL: 1 . 86E4
NL: 4. 62E4
NL: 3 . 32E4
2 4
安 60
氟铃脲
安 60
安 60
安 60
安 60
RT: 6 . 96
RT: 6 . 58
RT: 7 . 36
RT: 7 . 75
RT: 7 . 24
RT: 6 . 61
40
40
60
图 B.1 苯甲酰脲类化合物标准溶液特征离子质量色谱图(0 .5 μg/L)
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