GB 29701-2026 食品安全国家标准 动物性食品中地克珠利和托曲珠利砜残留量的测定 高效液相色谱法

ICS 67.100 CCS X 16

中华 人民 共和 国国 家标 准

GB 29701—2026

代替 GB 29701—2013

食品安全国家标准

动物性食品中地克珠利和托曲珠利砜

残留量的测定高效液相色谱法

National food safety standard—

Determination of diclazuril and toltrazuril sulfone residues in animal

derived food—High performance liquid chromatography method

2026-04-24 发布

 

2026-10-01 实施

发布

中华 人民 共和 国农 业农 村部中华人民共和国国家卫生健康委员会国家 市场 监督 管理 总局

GB 29701—2026

前言

本文件按照 GB/T 1 .1—2020« 标准化工作导则第 1 部分 : 标准化文件的结构和起草规则»的规定起草 .

本文件代替 GB 29701—2013« 食品安全国家标准鸡可食性组织中地克珠利残留量的测定高效液相色谱法» . 与 GB 29701—2013 相比 ,除结构调整和编辑性改动外 ,主要变化如下 :

a) 增加了范围中的检测组织(见第 1 章) ;

b) 增加了范围中的药物种类(见第 1 章) ;

c) 灵敏度进一步提高 ,方法检出限为 20 μg/kg,定量限为 50 μg/kg.

本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为 :

— 2013 年首次发布为 GB 29701—2013 ;

— 本次为第一次修订 .

Ⅰ

GB 29701—2026

食品安全国家标准

动物性食品中地克珠利和托曲珠利砜残留量的测定

高效液相色谱法

1 范围

本文件规定了动物性食品中地克珠利和托曲珠利砜残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。

本文件适用于猪、牛、羊、兔和家禽的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中地克珠利和托曲珠利砜残留量的检测。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本 适用 于本 文件 ; 不注 日期 的引 用文 件 , 其最 新版 本(包括 所有 的修 改单)适用 于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4 原理

试样中残留的地克珠利和托曲珠利砜 ,经乙腈提取、正己烷去脂、碱性氧化铝固相萃取柱净化 ,液相色谱法测定 ,外标法定量。

5 试剂与材料

除非另有说明 ,所用试剂均为分析纯 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

5 .1 试剂

5 .1 .1 乙腈(CH3 CN) :色谱纯。

5 .1 .2 乙酸(CH3 COOH) :色谱纯。

5 .1 .3 乙腈(CH3 CN)。

5 .1 .4 无水硫酸钠(Na2 SO4)。

5 .1 .5 正己烷(C6 H14)。

5 .1 .6 N ,N一二甲基甲酰胺(C3 H7 NO) :色谱纯。

5 .2 溶液配制

5 .2 .1 95%乙腈溶液(95 ∶ 5 ,V ∶V) :取乙腈(5 .1 .3)950 mL,用水稀释至 1 000 mL,混匀。

5 .2 .2 80%乙腈溶液(80 ∶ 20 ,V ∶V) :取乙腈(5 .1 .3)800 mL,用水稀释至 1 000 mL,混匀。

5 .2 .3 0 .3%乙酸溶液 :取乙酸 3 .0 mL,用水稀释至 1 000 mL,混匀。

5 .2 .4 乙腈一0 .3%乙酸溶液(1 ∶ 1 ,V ∶V) :取乙腈(5 .1 .1)50 mL,加 0 .3%乙酸溶液 50 mL,混匀。

5 .2 .5 乙腈饱和正己烷 :取适量乙腈(5 .1 .3)和正己烷 ,置于分液漏斗中 ,振荡 ,静置分层 ,取上层正己烷。

5 .3 标准品

地克珠利、托曲珠利砜标准品 ,纯度均 ≥97 .0% ,见附录 A。

5 .4 标准溶液制备

5 .4 .1 标准 储备 液 : 取标 准品 各适 量(相当 于各 待测 组分 25 mg) , 精密 称定 , 用 N , N一二甲 基甲 酰胺

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GB 29701—2026

效(50)9(L)个月(溶解)。,加乙腈定容至 100 mL容量瓶 ,配制成浓度为 0 .25 mg/mL 的标准储备液。 - 20 ℃保存 ,有

5 .4 .2 混合标准中间液(50 μg/mL) :准确量取上述标准储备液适量 ,用乙腈一0 .3%乙酸溶液稀释制成浓度为 50 μg/mL 的混合标准中间液 ,4 ℃保存 ,有效期 3 个月。

5 .5 材料

5 .5 .1 碱性氧化铝固相萃取柱 :2 g/12 mL,或相当者。

5 .5 .2 微孔滤膜 :0 .45 μm 有机系尼龙滤膜 ,或性能相当者。

5 .5 .3 陶瓷均质子。

6 仪器设备

6 .1 液相色谱仪 :配紫外检测器。

6 .2 电子天平 :感量为 0 .000 01 g 和 0 .01 g。

6 .3 氮吹仪(带控温)。

6 .4 固相萃取装置。

6 .5 涡旋混合器。

6 .6 离心机 :最大转速不低于 3 000 r/min。

6 .7 水浴锅。

6 .8 匀浆机。

6 .9 超声波清洗器。

6 .10 振荡器。

7 试样的制备与保存

7 .1 试样的制备

取适量新鲜或解冻的供试样品或空白 ,绞碎 ,并使均质。

a) 取均质后的供试样品 ,作为供试试样 ;

b) 取均质后的空白样品 ,作为空白试样 ;

c) 取均质后的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样。

7 .2 试样的保存

- 18 ℃以下保存。

8 测定步骤

8 .1 提取

8 .1 .1 肌肉、肝脏、肾脏

准确称取试样(5±0 .05) g,置于 50 mL离心管中 ,加入 1 颗陶瓷均质子 ,加入无水硫酸钠 5 g、乙腈(5 .1 .3)10 mL,涡旋混匀 , 中速振荡 10 min,3 000 r/min离心 5 min,取上清液移至分液漏斗中 ,加乙腈饱和正己烷 30 mL,振摇 1 min,静置约 15 min,分离乙腈层。 残余物再按上述步骤重复提取 1 次 , 乙腈层经同一份乙腈饱和正己烷分配 ,振摇 1 min,静置约 15 min,分层 ,合并乙腈层于 60 ℃氮吹至近干 ,残渣加入95%乙腈溶液 5 mL,涡旋混匀 ,为备用液。

8 .1 .2 脂肪

准确称取试样(5±0 .05) g,置于 50 mL离心管中 ,加入 1 颗陶瓷均质子 ,加入无水硫酸钠 5 g、乙腈(5 .1 .3)10 mL,置 50 ℃水浴加热 5 min融化后涡旋混匀 , 中速振荡 10 min,3 000 r/min离心 5 min,取上清液移至分液漏斗中 ,加乙腈饱和正己烷 30 mL,振摇 1 min,静置约 15 min,分离乙腈层。 残余物再按上述步骤重复提取 1 次 , 乙腈层经同一份乙腈饱和正己烷分配 ,振摇 1 min,静置约 15 min,分层 ,合并乙腈

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GB 29701—2026

层于 60 ℃氮吹至近干 ,残渣加入 95%乙腈溶液 5 mL,涡旋混匀 ,为备用液。

8 .2 净化

碱性氧化铝固相萃取柱用 95%乙腈溶液 10 mL活化 ,备用液全部过柱 ,用 95%乙腈溶液 3 mL洗涤装备用液的离心管并过柱 ,不收集 ,用 80%乙腈溶液 7 mL洗脱 ,收集于 10 mL具塞试管中 ,在 60 ℃下氮吹至干 ,加乙腈一0 .3%乙酸溶液 1 .0 mL,涡旋 1 min,超声 2 min,混匀后过 0 .45 μm 微孔滤膜 ,供液相色谱仪测定。

8 .3 标准曲线的制备

精密量取 混合 标准 中间 液适 量 , 用乙 腈一0 .3% 乙酸 溶液 稀释 并定 容 , 制成 浓度 为 0 .1 μg/mL、

0 .25 μg/mL、1 .0 μg/mL、5 .0 μg/mL、30 .0 μg/mL、50 .0 μg/mL 的混 合标 准工 作溶 液 , 供液 相色 谱测

定 , 以测得峰面积为纵坐标、对应的标准溶液浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,求回归方程和相关系数。

8 .4 测定

8 .4 .1 色谱参考条件

a) 色谱柱 :C18 柱 (250 mm×4 .6 mm ,5 μm)或相当者 ;

b) 流动相 : 乙腈 ∶ 0 .3%乙酸溶液(55 ∶ 45) ;

c) 流速 :1 .0 mL/min;

d) 检测波长 :270 nm;

e) 柱温 :30 ℃ ;

f) 进样量 :50 μL。

8 .4 .2 测定法

取试样溶液和相应的混合标准工作溶液 ,作单点或多点校准 ,按外标法以色谱峰面积定量。 标准工作

液及试样溶液中待测物响应值应在仪器检测的线性范围之内。 对于试样中地克珠利、托曲珠利砜残留量

超过仪器测定线性范围的 ,用乙腈一0 .3%乙酸溶液稀释后使试样溶液的地克珠利、托曲珠利砜残留量在线性

范围内。 试样中待测物峰的保留时间与标准工作液相应峰的保留时间偏差应在 ±0.1 min。标准溶液色谱

图见附录 B。

8 .5 空白试验

取空白试样 ,除不加药物外 ,采用相同的测定步骤进行平行操作。

9 结果计算

试样中待测药物的残留量按标准曲线或公式(1)计算。

式中 :

ω — 试样中待测药物残留量的数值 ,单位为微克每千克(μg/kg) ;

ρS — 标准溶液中待测药物浓度的数值 ,单位为微克每毫升(μg/mL) ;

A — 试样溶液中待测药物的峰面积 ;

V — 定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

AS — 标准溶液中待测药物的峰面积 ;

m — 试样质量的数值 ,单位为克(g) ; 1 000 — 换算系数。

注 :计算结果保留 3 位有效数字。

10 方法灵敏度、正确度和精密度

10 .1 灵敏度

本方法的检出限为 20 μg/kg,定量限为 50 μg/kg。

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10 .2 正确度

本方法在 50 μg/kg~ 1 000 μg/kg添加浓度的回收率为 70% ~ 110% .

10 .3 精密度

本方法的批内相对标准偏差 ≤15% ,批间相对标准偏差 ≤20% .

4

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附录 A

(规范性)

地克珠利和托曲珠利砜信息

地克珠利和托曲珠利砜的中英文通用名称、CAS号、化学分子式及相对分子质量见表 A.1 .

表 A.1 地克珠利和托曲珠利砜标准物质的信息

序号

中文通用名称

英文通用名称

CAS号

化学分子式

相对分子质量

1

地克珠利

Diclazuril

101831__37__2

C17 H9 Cl3 N4 O2

407 .64

2

托曲珠利砜

Toltrazurilsulfone

69004__04__2

C18 H14 F3 N3 O6 S

457 .38

5

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附录 B

(资料性)

标准溶液色谱图

标准溶液色谱图见图 B.1 .

响应值 ,

图 B.1 标准溶液色谱图(0 .25 μg/mL)