LY/T 3480-2026 马蓝提取物

ICS65. 050 CCS B 72

中华人民共和国林业行业标准

LY/T 3480—2026

马蓝提取物

Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek extracts

2026-06-03发布 2026-09-01实施

国家 林业 和草 原局 发布

LY/T3480—2026

目次

前言 Ⅲ

1 范围 1

2 规范性引用文件 1

3 术语和定义 1

4 技术要求 4

5 取样 5

6 试验方法 5

7 检验规则 8

8 标志、包装、运输与贮存 9

附录 A (资料性) 液相色谱分析条件及典型谱图 10

Ⅰ

LY/T3480—2026

前言

本文件按照 GB/T 1. 1—2020《标准化工作导则第 1 部分 :标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由国家林业和草原局提出。

本文件由全国林化产品标准化技术委员会(SAC/TC 558)归口。

本文件起草单位 : 中国林业科学研究院林产化学工业研究所、云南桑晖贸易有限责任公司、重庆卉丁科技有限公司、贵州蓝之颜生物科技有限公司、贵州傲原农业发展有限公司、中国检验检疫科学研究院粤港澳大湾区研究院、贵州荔波县南板蓝根产业研究院、贵州青山生物科技有限公司、遵义医科大学。

本文件主要起草人 :王成章、张昌伟、叶建中、高晖、郑昌敏、邓滔、李树、韩昌升、彭密军、周标兰、刘丹阳、薛兴颖、陈虹霞、李文君、齐志文、孔祥慧、周昊、池云居、孙成新。

本文件为首次发布。

Ⅲ

LY/T3480—2026

马蓝提取物

1 范围

本文件规定了马蓝提 取物 的技 术要 求、取样、检验 规则、标志、包装、运输 与贮 存 , 描述 了相 应试 验方法。

本文件适用于以马蓝茎叶为原料 ,采用石灰制靛法生产的靛膏粉和靛膏蓝靛粉 ,或水提取、生物酶发酵或化学转化生产的靛蓝提取物、酚酸提取物和吲哚苷提取物的加工、贸易、流通及应用。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中 , 注日 期的 引用 文件 ,仅该日期对应的版本适用于本文件 ;不注日期的引用文件 ,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 2374 染料染色测定的一般条件规定

GB/T 2386 染料及中间体水分的测定

GB/T 2390 染料 pH值的测定

GB 5009. 4 食品安全国家标准食品中灰分的测定

GB/T 6679 固体化工产品采样通则

GB/T 13885 饲料中钙、铜、铁、镁、锰、钾、钠和锌含量的测定原子吸收光谱法

GB 19601 染料产品中 23种有害芳香胺的限量及测定

GB 20814 染料产品中重金属元素的限量及测定

GB/T 21876 溶剂染料及染料中间体灰分的测定

GB/T 24101 染料产品中 4 氨基偶氮苯的限量及测定

GB/T 43733 植物中绿原酸类物质的测定高效液相色谱法

GB/T 44349 蜂花粉总多酚的检测福林酚试剂比色法

中华人民共和国药典 2025版四部

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

1

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3.1 靛蓝 indigo

H N

N H

注 :CAS号 482 89 3,分子式 C16 H10N2 O2 ,相对分子质量 262. 26。通用别名为靛青、靛蓝粉、靛青粉、还原靛蓝、纯靛、靛兰 ;食品级别名食品蓝 1 号、食用青色 2 号、食用蓝、酸性靛蓝、硬化靛蓝 ;染料别名 C. I. 颜料蓝 66(C. I. Pig- mentBlue66)、C. I. 还原蓝 1(C. I. VatBlue1)、莫诺莱特海军蓝 BV(MonoliteNavyBlueBV) ;来源于化学合成、生物合成和天然植物。天然靛蓝来源于爵床科 植物(如马 蓝 Baphicacanthus cusia(Nees)Bremek)、蓼属 植物(如蓼蓝 Polygonum tinctorium)、豆科植物(如木蓝 Indigofera tinctoria)等蓝草类植物。

3. 2 靛玉红 indirubin

NH

N H

注 :CAS号 479 41 4,分子式 C16 H10N2 O2 ,相对分子质量 262. 26,系统命名 2 - (2 - oxo 1h indol- 3 - ylidene) 1h indol- 3- one,立体异构体命名(2Z) 2,3' biindole 2',3(1H , 1'H) dione,别名为靛玉、靛蓝嘌呤、炮弹树碱 B、C. I. 73200(染料)。来源于化学合成、生物合成和天然植物。天然靛玉红来源于爵床科植物(如马蓝 Baphi- cacanthus cusia(Nees)Bremek)、蓼属植物(如蓼蓝 Polygonum tinctorium)、豆科植物(如木蓝 Indigofera tinctoria)等蓝草类植物。

3. 3 绿原酸 chlorogenicacid

OH

OH

HO O

/

HO

Il

o

H

HO

注 :CAS号 327 97 9,分子式 C16 H18O9 ,相对分子质量 354. 31。

2

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3. 4 吲哚苷 indican

H N

OH

-OH

HO

OH

注 :CAS号 487 60 5,分子式 C14 H17NO16 ,相对分子质量 295. 29。又称靛苷、蓝苷、吲哚 甙 ,是靛 蓝和 靛玉 红的 前体物质。

3. 5 马蓝提取物 Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek extracts

以马蓝茎叶为原料 ,采用石灰制靛法生产的含有靛蓝和靛玉红的固体粉末 ,或采用水提取、生物酶发酵或化学转化 ,再经分离 ,浓缩 ,干燥等工艺制成的固体粉末。

注 :根据加工工艺不同 ,马蓝提取物分为靛膏粉、靛膏蓝靛粉、靛蓝提取物、酚酸提取物和吲哚苷提取物。

3. 5. 1

靛膏粉 indigo pastepowder from Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek

新鲜马蓝茎叶经水自然发酵、固液分离 ,滤液经石灰制靛法加工的膏状物再干燥得到的灰蓝色或蓝色固体粉末 , 以靛蓝和靛玉红为标志性成分。

注 :又称靛泥粉 ,靛青粉 ,为天然植物靛蓝。

3. 5. 2

靛膏蓝靛粉 extractsfrom indigo pastepowder

石灰制靛法加工的靛膏或靛膏粉经水洗、酸碱法除去石灰或碳酸钙等无机杂质、再经分离和干燥得到的深蓝色固体粉末 , 以靛蓝和靛玉红为标志性成分。

注 :又称石灰制靛蓝粉 ,蓝靛粉、靛青粉 ,为天然植物靛蓝。

3. 5. 3

靛蓝提取物 indigo extractsfrom Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek

马蓝茎叶经水提取和生物酶转化、或茎叶提取液经化学法转化、滤液未经石灰制靛法加工直接分离和干燥得到的深蓝色或黑色固体粉末 , 以靛蓝和靛玉红为标志性成分。

注 :又称马蓝纯靛蓝粉 ,马蓝纯靛粉 ,纯蓝靛粉 ,为天然植物靛蓝。

3. 5. 4

酚酸提取物 phenolicacid extractfrom Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek

马蓝茎叶经提取、分离、浓缩、干燥得到的棕褐色粉末 ,主要活性成分包括酚酸类(以绿原酸为标志性成分)。

注 :又称马蓝叶提取物、南大青叶提取物。

3. 5. 5

吲哚苷提取物 indican extractfrom Baphicacanthuscusia(Nees)Bremek

马蓝茎叶经灭酶、提取、浓缩、干燥得到的棕褐色固体粉末 , 以吲哚苷为标志性成分。

3

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4 技术要求

4. 1 定性

靛膏粉和靛膏蓝靛粉不溶于水 ,水层显淡蓝色或无色 ;靛蓝提取物不溶于水 ,水层无色。

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和 靛蓝 提取 物均 在薄 层色 谱 (TLC)上与 标准 品(靛蓝 和靛 玉红)具有 相同 的斑点。

4. 2 技术指标

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物的感官指标和理化指标应分别符合表 1 和表 2 的要求。

表 1 靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物的感官指标

指标

靛膏粉

靛膏蓝靛粉

靛蓝提取物

形态与色泽

灰蓝色或蓝色固体粉末

深蓝色固体粉末

深蓝色或黑色固体粉末

气味

马蓝靛草和石灰气味

略有靛草气味

无明显气味

表 2 靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物的理化指标

指标

靛膏粉

靛膏蓝靛粉

靛蓝提取物

水分/% ≤

7. 0

灰分/% ≤

80. 0

35. 0

3. 0

酸不溶性灰分/% ≤

2. 0

钙/% ≤

40. 0

15. 0

0. 1

靛蓝/%

2. 0~ 5. 0

10. 0~ 30. 0

30. 0~ 50. 0

靛玉红/%

0. 1~ 0. 3

0. 3~ 1. 0

0. 5~ 3. 0

色光(与标准品)

不考核

近似 ~微

近似 ~微

强度(为标准品的)/分

不考核

100

100

铅 (Pb)/(mg/kg) ≤

20. 0

砷 (As)/(mg/kg) ≤

3. 0

2. 0

2. 0

有害芳香胺

ND

pH

7. 0~ 9. 0

6. 0~ 7. 0

6. 0~ 7. 0

注 :ND代表不得检出。

酚酸提取物和吲哚苷提取物的感官指标和理化指标应分别符合表 3 和表 4 的要求。

表 3 酚酸提取物和吲哚苷提取物的感官指标

指标

酚酸提取物

吲哚苷提取物

形态与色泽

棕褐色固体粉末

气味

马蓝叶固有香气味

4

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表 4 酚酸提取物和吲哚苷提取物的理化指标

指标

酚酸提取物

吲哚苷提取物

水分/% ≤

5. 0

灰分/% ≤

3. 0

酸不溶性灰分/% ≤

1. 0

吲哚苷/% ≥

ND

20. 0

总多酚/% ≥

10. 0

5. 0

绿原酸/% ≥

5. 0

0. 5

注 :ND代表不得检出。

5 取样

以批为单位采样 ,生产厂以一次拼混均匀的产品为一批。按照 GB/T 6679—2003 中 4. 3. 1 的规定 ,使用采样探子采样。采样时应采取包括上、中、下三部分的样品 ,所采样品质量不少于 500 g。将采取的样品充分混匀后 ,分装于两个清洁、干燥、密封良好的容器中 ,其上粘贴标签。注明 :产品名称、批号、生产厂名称、取样日期、地点、产品状态。一份供检验 ,一份保存备查。

6 试验方法

6. 1 水溶性试验

分别精密称取靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物 50. 0 mg,加水 10 mL,振摇后放置过夜 , 观察水溶性和水层颜色。

6. 2 薄层色谱定性

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物按 “中华人民共和国药典 2025版四部 ”的规定进行。

6. 3 感官检验

取马蓝提取物适量置于白色瓷盘中观察其色泽、形态 ,并嗅其气味。

6. 4 水分的测定

按 GB/T 2386的规定进行。

6. 5 灰分的测定

按 GB/T 21876的规定进行。

6. 6 酸不溶性灰分的测定

按 GB 5009. 4 中第三法的规定进行。

6. 7 钙的测定

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物按 GB/T 13885的规定进行。

5

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6. 8 靛蓝和靛玉红的测定

6. 8. 1 试剂和材料

a) 甲醇 :色谱纯 ;

b) N ,N 二甲基甲酰胺 :分析纯 ;

c) 靛蓝 :纯度 ≥98. 8% ;

d) 靛玉红 :纯度 ≥98. 9% ;

e) 水 :色谱纯。

6. 8. 2 仪器和设备

a) 分析天平 :感量为 0. 01 mg;

b) 过滤膜(聚偏氟乙烯有机滤膜 ,ø5cm) :0. 45 μm;

c) 高效液相色谱仪 :配备紫外检测器。

6. 8. 3 对照品溶液的配制

分别精密称取靛蓝和靛玉红对照品 10 mg并置于 100 mL棕色容量瓶中 ,加 N ,N 二甲基甲酰胺约45 mL,超声处理使溶解 ,放冷 ,加 N ,N 二甲基甲酰胺至刻度 ,摇匀 ,得对照品母液(靛蓝和靛玉红浓度均为 0. 1 mg/mL)。 将对 照品 母液 分别 稀释 1 倍、2 倍、4 倍、8 倍、16倍 , 得浓 度分 别为 50 μg/mL、 25μg/mL、12. 5 μg/mL、6. 25μg/mL、3. 13μg/mL 的系列对照品稀释液。

6. 8. 4 标准曲线的绘制

分别精确吸取对照品稀释液 10 μL,用高效液相色谱测定靛蓝和靛玉红的峰面积 ,分析条件见附录A。 由靛蓝和靛玉红峰面积对应的浓度关系 ,绘制靛蓝和靛玉红的标准曲线(R2 ≥0. 9990)。

6. 8. 5 供试样品的准备

分别精密称取靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物 100 mg,置 500mL棕色容量瓶中 ,加 N ,N 二甲基甲酰胺约 200 mL,超声处理 30 min,放冷 ,加 N ,N 二甲基甲酰胺至刻度 ,摇匀 ,过滤 ,取滤液 , 即得。

6. 8. 6 结果

精确吸取 10 μL供试样品 ,按附录 A 中高效液相色谱条件进样分析 ,记录靛蓝和靛玉红的峰面积。根据靛蓝和靛玉红标准曲线 ,分别按公式(1)计算供试样品中靛蓝和靛玉红的含量。

… … … … … … … ( 1 )

式中 :

⑴ — 供试样品中靛蓝和靛玉红的含量 ,单位为 % ;

C— 分别由靛蓝和靛玉红标准曲线计算出供试 样品 中靛 蓝和 靛玉 红峰 的浓 度 , 单位 为毫 克每 升(mg/L) ;

V — 供试样品溶液体积 ,单位为升(L) ;

m — 供试样品的质量 ,单位为毫克(mg)。

取两次测定结果的算术平均值为最终结果 ,报告至小数点后第一位。两次平行试验结果的绝对值差应不大于 0. 10。

6

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6. 9 吲哚苷的测定

6. 9. 1 试剂和材料

a) 甲醇 :色谱纯 ;

b) 吲哚苷 :纯度 ≥99. 0% ;

c) 水 :色谱纯。

6. 9. 2 仪器和设备

a) 分析天平 :感量为 0. 01 mg;

b) 过滤膜(聚偏氟乙烯有机滤膜 ,ø5cm) :0. 45 μm;

c) 高效液相色谱仪 :配备紫外检测器。

6. 9. 3 对照品溶液的配制

精密称取吲哚苷对照品 5 mg,用水定容至 50 mL容量瓶中 ,得浓度为 0. 1 mg/mL 的对照品母液。

将对照 品母 液分 别稀 释 1 倍、2 倍、4 倍、8 倍、16 倍 , 得浓 度分 别为 50 μg/mL、25 μg/mL、 12. 5 μg/mL、6. 25 μg/mL、3. 13μg/mL 的系列对照品稀释液。

6. 9. 4 标准曲线的绘制

分别精确吸取对照品稀释液 10 μL,用高效液相色谱测定吲哚苷的峰面积 ,分析条件见附录 A。 由吲哚苷峰面积对应的浓度关系 ,绘制吲哚苷的标准曲线(R2 ≥0. 9990)。

6. 9. 5 供试样品的制备

精密称取吲哚苷提取物 100 mg,定容至 500 mL容量瓶中 ,超声处理 30 min,过滤 ,取滤液 , 即得。

6. 9. 6 结果

精确吸取 10 μL供试样品 ,按附录 A 中高效液相色谱条件进样分析 ,记录吲哚苷的峰面积。根据吲哚苷标准曲线 ,按公式(2)计算样品中吲哚苷的含量。

a×b

γ≡ ×100% … … … … … … … … ( 1 )

m

式中 :

γ — 供试样品中吲哚苷的含量 ,单位为 % ;

a — 由标准曲线计算出供试样品中吲哚苷的浓度 ,单位为毫克每升(mg/L) ;

b — 供试样品溶液体积 ,单位为升(L) ;

m— 供试样品的质量 ,单位为毫克(mg)。

取两次测定结果的算术平均值为最终结果 ,报告至小数点后第一位。两次平行试验结果的绝对值差应不大于 0. 10。

6. 10 总多酚的测定

酚酸提取物和吲哚苷提取物按 GB/T 44349的规定进行。

6. 11 绿原酸的测定

酚酸提取物和吲哚苷提取物按 GB/T 43733的规定进行。

7

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6. 12 色光与强度的测定

靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物按 GB/T 2374中第 7章的有关规定进行。

6. 13 重金属的测定

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物中铅和砷的测定按 GB 20814的规定进行。

6. 14 有害芳香胺的测定

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物按 GB/T 24101和 GB 19601的规定进行。

6. 15 pH 的测定

靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物按 GB/T 2390的规定进行。

7 检验规则

7. 1 检验分类

7. 1. 1 概述

产品检验分为出厂检验和型式检验。

7. 1. 2 出厂检验

产品应经生产企业质检部门检验合格 ,并附有产品质量合格证后方可出厂。靛膏粉、靛膏蓝靛粉和靛蓝提取物的出厂检验项目包括水溶性、薄层色谱定性、形态与色泽、气味、水分、灰分、酸不溶性灰分、钙、靛蓝、靛玉红、色光、强度、铅、砷、有害芳香胺、pH;酚酸提取物和吲哚苷提取物的出厂检验项目包括形态与色泽、气味、水分、灰分、酸不溶性灰分、吲哚苷、总多酚、绿原酸。

7. 1. 3 型式检验

型式检验包括第 4章中各产品所列的全部项目。有下列情况之一时 ,应进行型式检验 :

a) 当原辅材料或生产工艺发生较大变动时 ;

b) 长期停产后再次恢复生产时 ;

c) 正常生产时 ,每一年检验不少于一次 ;

d) 国家质量监督机构提出要求时。

7. 2 组批规则

采用间歇法生产且采用桶装时 ,每 1 釜产品为 1 个批次 ;采用连续法生产且采用桶装时 ,生产当日 0时至 24时收集的产品为 1个批次 ;采用储罐贮存时 ,每个储罐中的产品为 1个批次。

7. 3 抽样规则

用于产品检验的试样应遵照以下抽样规则 :

a) 应按同一批次进行随机抽检 ,抽检桶数为总桶数的 5% ,如同一批次总桶数小于 5 桶时 ,应全部抽检。采用其他包装形式时 ,可参考桶装产品抽样数量进行抽样 ;

b) 罐装或槽车取样应采用专用取样工具 ,分别抽取上、中、下的样品 ,取样量应相等。

7. 4 判定

样品检验如有不合格项 ,允许自同批次产品中加倍抽样 ,对不合格项进行复检。 复检结果若仍不合

8

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格 ,则判该批产品不合格。

8 标志、包装、运输与贮存

8. 1 标志

8. 1. 1 包装上应标明 :产品名称、级别、毛质量、净含量、商标、厂名、厂址和出厂日期。

8. 1. 2 出口产品应按出口要求进行标志。

8. 2 包装

8. 2. 1 外包装用塑料桶 , 内用塑料袋 ,加盖密封。

8. 2. 2 亦可按客户要求包装 ,但容器材料和容量应符合产品的物化性质 ,容器应干净无污染。

8. 3 运输

运输工具应清洁卫生 , 防止日晒、雨淋、受潮 ,严禁与有毒、有害、有异味的物质共运。

8. 4 贮存

产品应贮存在阴凉、通风、干燥、清洁的室内 ,严禁与有毒、有害、有异味的物质混贮。

9

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附录 A

(资料性)

液相色谱分析条件及典型谱图

A. 1 靛蓝和靛玉红液相色谱分析条件

液相色谱分析条件 :C18液相色 谱柱 , 长 250 mm , 内径 4. 6 mm , 粒度 5 μm;流动 相为 甲醇 ∶ 水 = 70 ∶ 30(v/v) ,柱温 30℃ ,流速 1. 0 mL/min,进样量 10 μL,检测波长 290 nm。

A. 2 靛蓝和靛玉红液相色谱典型谱图

对照品 ,靛膏粉、靛蓝蓝靛粉和靛蓝提取物中靛蓝和靛玉红的液相色谱典型谱图分别见图 A. 1、图A. 2。

mAU

10

500

400

300

200

100

0

 

靛蓝

靛玉红

0 . 0 5 . 0 10 . 0 15 . 0 20 . 0 25 . 0 min

图 A. 1 对照品中靛蓝和靛玉红的液相色谱典型谱图

300 -

MAU

200 -

100

0

靛蓝

靛玉红

0 . 0 5 . 0 10 . 0 15 . 0 20 . 0 25 . 0 min

图 A. 2 靛膏粉、靛蓝蓝靛粉和靛蓝提取物中靛蓝和靛玉红的液相色谱典型谱图

A. 3 吲哚苷液相色谱分析条件

液相色谱分析条件 :C18液相色 谱柱 , 长 250 mm , 内径 4. 6 mm , 粒度 5 μm;流动 相为 甲醇 ∶ 水 = 20 ∶ 80(v/v) ,柱温 30℃ ,流速 1. 0 mL/min,进样量 10 μL,检测波长 230 nm。

A. 4 吲哚苷液相色谱典型谱图

对照品及吲哚苷提取物中吲哚苷的液相色谱典型谱图分别见图 A. 3、图 A. 4。

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11

1 500

1 000

500

1 500

1 000

500

 

mAU

吲哚苷

0 . 0 5 . 0 10 . 0 15 . 0 20 . 0 25 . 0 min

图 A. 3 对照品中吲哚苷的液相色谱典型谱图

MAU

吲哚苷

. 0 5 . 0 10 . 0 15 . 0 20 . 0 25 . 0 min

图 A. 4 吲哚苷提取物中吲哚苷的液相色谱典型谱图