BJS 202501 食品中坎地沙坦酯、拉西地平、阿齐沙坦的测定

食品 补充 检验 方法

BJS202501

食品中坎地沙坦酯、拉西地平、阿齐沙坦的测定

2025-09-29发布

国家市场监督管理总局发 布

食品中坎地沙坦酯、拉西地平、

阿齐沙坦的测定

1 范围

本方法规定了食品中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的液相色谱-串联质谱测定方法。

本方法适用于压片糖果、代用茶、固体饮料、茶饮料、饼干、果冻、配制酒和保健食品(口服液、茶剂、片剂、硬胶囊、软胶囊)中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的测定。

2 原理

试样经 0. 2%甲酸乙腈溶液提取 ,提取液经离心、稀释、过滤膜后 ,采用液相色谱-串联质谱仪检测 ,外标法定量。

3 试剂和材料

除非另有说明 ,本方法所用试剂均为分析纯 ,水为 GB/T 6682规定的一级水。

3. 1 试剂

3. 1. 1 乙腈(CH3CN)。

3. 1.2 乙腈(CH3CN) :色谱纯。

3. 1.3 甲醇(CH3 OH) :色谱纯。

3. 1.4 甲酸(HCOOH) :色谱纯。

3. 1.5 甲酸铵(HCOONH4) :色谱纯。

3.2 试剂配制

3.2. 1 0. 2%甲酸乙腈溶液 :量取 2 mL 甲酸(3. 1. 4) ,用乙腈(3. 1. 1)溶解并定容至 1 000 mL,混匀。

3.2.2 5 mmol/L甲酸铵溶液 :称取 0. 315 g 甲酸铵(3. 1. 5) ,用水溶解并定容至 1 000 mL,混匀。

3.3 标准品

坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦标准品 ,纯度 ≥98. 0% , 或经国家认证并授予标准物质证书的标准品 ,其中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量见附录 A。

3.4 标准溶液配制

3.4. 1 标准储备液(1. 0 mg/mL)

分别准确称取坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦标准品(3. 3)各 10 mg,用甲醇(3. 1. 3)溶解并定容于 10 mL容量瓶中 ,混匀 ,将溶液转移至棕色试剂瓶内。 -20 ℃及以下避光保存 ,有效期 6个月。

3.4.2 混合标准中间液

分别准确吸取坎地沙坦酯和阿齐沙坦标准储备液 0. 1 mL、拉西地平标准储备液 0. 2 mL 于 10 mL

1

容量瓶中 ,用甲醇(3. 1. 3)定容至刻度 ,混匀 ,将溶液转移至棕色试剂瓶内 ,其中坎地沙坦酯和阿齐沙坦的质量浓度均为 10 μg/mL, 拉西 地平 的质 量浓 度为 20 μg/mL。 - 20 ℃及以 下避 光保 存 , 有效 期3个月。

3.4.3 基质标准系列工作溶液

用空白基质提取液(5. 2. 3)将混合标准中间液(3. 4. 2)逐级稀释 , 配制成基质标准系列工作溶液 ,其中坎地沙坦酯和阿齐沙坦的系列质量浓度为 1 μg/L、2 μg/L、5 μg/L、10μg/L、25μg/L和 50μg/L,拉西地平的系列质量浓度为 2 μg/L、4 μg/L、10μg/L、20μg/L、50μg/L和 100μg/L,或依仪器响应情况配制适当浓度的基质标准系列工作溶液。 临用现配。

注 : 拉西地平对光不稳定 ,配制过程需避光。

3.5 材料

3.5. 1 亲水性聚四氟乙烯微孔滤膜 :0. 22 μm ,或性能相当者。

4 仪器和设备

4. 1 液相色谱-串联质谱仪 :配电喷雾离子源(ESI源)。

4.2 电子天平 :感量分别为 0. 001 g 和 0. 01 mg。

4.3 涡旋混合器。

4.4 超声波提取仪。

4.5 离心机 :转速 ≥4000 r/min。

4.6 粉碎机。

4.7 匀浆机。

5 分析步骤

5. 1 试样制备与保存

5. 1. 1 固体试样、半固体试样

取适量代表性试样(压片糖果、代用茶、固体饮料、饼干、茶剂、片剂)置粉碎机中粉碎 ,充分混匀 ;硬胶囊试样(含胶囊壳)整体进行粉碎 ;软胶囊试样先取出内容物 ,再将胶囊壳剪碎至 2 mm 以下 ,并使胶囊壳与内容物充分混匀 ;果冻试样充分均质至浆状 ;黏稠状试样充分搅拌均匀。制备好的试样装入洁净容器中 ,密封并标记 ,果冻置 4 ℃避光保存 ,其他按试样标示的保存条件避光保存。

5. 1.2 液体试样

取适量代表性试样(茶饮料、配制酒、口服液) ,充分混匀后装入洁净容器中 ,密封并标记 ,按试样标示的保存条件避光保存。

5.2 试样前处理

5.2. 1 固体试样、半固体试样

称取 1 g(精确至 0.001g)试样于 50mL具塞离心管中 ,准确加入 25 mL 0. 2%甲酸乙腈溶液(3. 2. 1) ,涡旋混匀 1 min, 超声 提取 10 min, 4 000 r/min离心 4 min, 准确 吸取 1. 0 mL 上清 液 , 用水 定容 至2 mL,混匀后(若浑浊 ,则以 4000 r/min离心 4 min) ,用微孔滤膜(3. 5. 1)过滤 ,供液相色谱-串联质谱仪

2

测定。

5.2.2 液体试样

准确量取 1. 0 mL试样于 25 mL容量瓶中 ,用 0. 2%甲酸乙腈溶液(3. 2. 1)稀释至刻度 ,混匀。 准确吸取 1. 0 mL试样 溶液 , 用水 定容 至 2 mL, 混匀 后用 微孔 滤膜 (3. 5. 1)过滤 , 供液 相色 谱-串联 质谱 仪测定。

注 : 拉西地平的操作过程应避免强光照射。

5.2.3 空白基质提取液

称取与试样基质基本相同或相近的阴性基质试样 ,按照 5. 2. 1 或 5. 2. 2 操作步骤进行空白基质提取液的制备。

阴性基质试样中各待测化合物的含量应在方法检出限以下。

5.3 仪器参考条件

5.3. 1 液相色谱参考条件如下 :

a) 色谱柱 :C18色谱柱(2. 1 mm×50 mm ,1. 7 μm) ,或性能相当者 ;

b) 流动相 :A 为 5 mmoL/L甲酸铵溶液(3. 2. 2) ,B为乙腈(3. 1. 2) ,梯度洗脱程序见表 1;

c) 流速 :0. 3 mL/min;

d) 柱温 :35 ℃ ;

e) 进样体积 :2 μL。

表 1 参考梯度洗脱程序

时间/min

流动相 A/%

流动相 B/%

0. 0

95

5

1. 0

3. 0

98

4. 5

4. 6

6. 0

5.3.2 质谱参考条件如下 :

a) 离子源 : 电喷雾离子源(ESI源) ;

b) 扫描方式 :正离子扫描 ;

c) 检测方式 :多反应监测(MRM) ;

d) 毛细管电压 :3. 0 kV;

e) 干燥气温度 :210 ℃ ;

f) 干燥气流速 :16L/min;

g) 雾化气压力 :206. 8 kPa;

h) 鞘气温度 :330 ℃ ;

i) 鞘气流速 :11 L/min;

j) 碎裂电压 :380V;

k) 待测化合物定性离子对、定量离子对和碰撞能量的参考值见表 2。

3

表 2 待测化合物定性离子对、定量离子对和碰撞能量的参考值

化合物名称

定性离子对(m/z)

定量离子对(m/z)

碰撞能量/eV

坎地沙坦酯

611. 0>349. 0

611. 0>423. 0

38

12

拉西地平

456. 1>354. 0

456. 1>400. 0

16

阿齐沙坦

457. 1>233. 0

22

457. 1>279. 0

5.4 标准曲线的制作

将基质标准系列工作溶液(3. 4. 3)分别注入液相色谱-串联质谱仪中 ,测定相应的离子对的峰面积 ,以定量离子对的峰面积为纵坐标 ,基质标准系列工作溶液浓度为横坐标 ,绘制标准曲线。

5.5 试样溶液的测定

5.5. 1 定性测定

在同样测试条件下 ,试样溶液中待测化合物的保留时间与基质标准工作溶液中对应化合物的保留时间偏差在 ±2. 5%以内 ,且试样中待测化合物定性离子的相对离子丰度与浓度接近的基质标准工作溶液中对应化合物的定性离子的相对离子丰度比较 ,偏差不超过表 3规定的范围 ,则可判定为试样中检出对应的待测化合物。

表 3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差

相对离子丰度/%

> 50

> 20~ 50

> 10~ 20

≤10

最大允许偏差/%

±20

±25

±30

±50

5.5.2 定量测定

将试样溶液按仪器参考条件(5. 3)进行测定 ,按外标法计算试样中待测化合物的含量。试样溶液中待测化合物的峰面积均应在仪器检测的线性范围之内 ,超出线性范围时 ,应根据测定浓度进行适当倍数稀释 , 同时用同等稀释倍数的空白基质配制标准曲线溶液后再测定。

基质标准溶液中各待测化合物特征离子质量色谱图见附录 B。

5.6 空白试验

除不加试样外 ,均按 5. 2 的步骤操作。

6 结果计算

试样中待测化合物的含量按式(1)计算 :

X f … … … … … … … … … …

4

式中 :

X — 试样中待测化合物的含量 , 固体试样单位为毫克每千克(mg/kg) ,液体试样单位为毫克

每升(mg/L) ;

ρ — 由基质标准曲线求得试样溶液中待测化合物的质量浓度 ,单位为微克每升(μg/L) ; V2 — 移取的上清液稀释定容后的体积 ,单位为毫升(mL) ;

V — 试样的提取液体积 ,单位为毫升(mL) ;

1 000— 换算系数 ;

m — 试样的质量 , 固体试样单位为克(g) ,液体试样单位为毫升(mL) ;

V1 — 移取的上清液体积 ,单位为毫升(mL) ;

f — 稀释倍数。

计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示 ,结果保留三位有效数字。

7 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的 15%。

8 其他

当称样量为 1 g 时 ,试样中坎地沙坦酯和阿齐沙坦的检出限为 0. 05 mg/kg,定量限为 0. 10 mg/kg;拉西地平的检出限为 0. 10 mg/kg,定量限为 0. 20 mg/kg。

当取样量为 1.0 mL时 ,试样中坎地沙坦酯和阿齐沙坦的检出限为 0. 05 mg/L,定量限为 0. 10 mg/L;拉西地平的检出限为 0. 10 mg/L,定量限为 0. 20 mg/L。

9 结果表述

当各待测化合物的检测结果大于各自定量限时 ,可认为存在非法添加各待测化合物的可能 ,并应结合现场执法证据进行综合研判。

附录 A

(资料性)

标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和相对分子质量

标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和相对分子质量见表 A. 1。

表 A. 1 标准品的中文名称、英文名称、CAS号、分子式和相对分子质量

序号

中文名称

英文名称

CAS号

分子式

相对分子质量

Candesartancilexetil

145040-37-5

C33 H34N6 O6

610. 66

Lacidipine

103890-78-4

C26 H33NO6

455. 54

Azilsartan

147403-03-0

C25 H20N4 O5

456. 45

6

附录 B

坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的特征离子质量色谱图

空白压片糖果基质标准溶液中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的特征离子质量色谱图见图 B. 1。

a) 坎地沙坦酯 b) 拉西地平 c) 阿齐沙坦

图 B. 1 空白压片糖果基质标准溶液中坎地沙坦酯、拉西地平和阿齐沙坦的

特征离子质量色谱图(10μg/L)

本方法起草单位 :安徽省食品药品检验研究院(张居舟、李静、方凌、章萍萍、周迪、赵维克、刘琴芳、谢继辉、姚帮本、韩芳、张雷)。