BJS 202503 小麦粉及其制品和小麦粉添加剂中乙酰氧肟酸的测定

食品 补充 检验 方法

BJS202503

小麦粉及其制品和小麦粉添加剂中乙酰氧肟酸的测定

2025-09-29发布

国家市场监督管理总局发 布

小麦粉及其制品和小麦粉添加剂中

乙酰氧肟酸的测定

1 范围

本方法规定了小麦粉及其制品、小麦粉及其制品使用的食品添加剂中乙酰氧肟酸的气相色谱测定方法。

本方法适用于小麦粉及其制品中乙酰氧肟酸的测定 ,也适用于小麦粉及其制品使用的食品添加剂中乙酰氧肟酸的测定。

2 原理

试样经无水乙醇提取 ,离心 ,过滤膜后 , 滤液采用配有氮磷检测器(NPD) 的气相色谱仪检测 ,保留时间定性 ,外标法定量。

3 试剂和材料

除非另有说明 ,所用试剂均为分析纯 ,水为 GB/T 6682规定的一级水。

3. 1 试剂

3. 1. 1 无水乙醇(C2 H5 OH) :色谱纯。

3.2 标准品

3.2. 1 乙酰氧肟酸(C2 H5NO2 ,CAS号 : 546-88-3) :纯度 ≥98% ,或经国家认证并授予标准物质证书的标准品 ,相关信息见附录 A。

3.3 标准溶液配制

3.3. 1 标准储备液(1 000 μg/mL) :准确称取 10 mg(精确至 0. 01 mg)乙酰氧肟酸标准品(3. 2. 1) ,用无水乙醇(3. 1. 1)溶解并定容至 10 mL, 配制成质量浓度为 1 000 μg/mL 的乙酰氧肟酸标准储备液。 在4 ℃避光保存 ,有效期 6个月。

3.3.2 标准中间液(100μg/mL) : 准确移取 1 000 μg/mL 的乙酰氧肟酸标准储备液(3. 3. 1) 1. 0 mL至10mL容量瓶中 ,用无水乙醇(3. 1. 1)定容至刻度 ,混匀 ,得到质量浓度为 100μg/mL 的乙酰氧肟酸标准中间液。在 4 ℃避光保存 ,有效期 3个月。

3.3.3 系列标准工作液 :分别准确吸取 100 μg/mL 的乙酰氧肟酸标准中间液(3. 3. 2)0. 06 mL、0. 10 mL、 0. 20 mL、0. 40 mL、0. 60 mL、0. 80 mL、1. 00 mL至 10 mL容量瓶中 ,用无水乙醇(3. 1. 1)定容至刻度 ,摇匀 ,得到质量浓度为 0. 60 μg/mL、1. 00 μg/mL、2. 00 μg/mL、4. 00 μg/mL、6. 00 μg/mL、8. 00 μg/mL 和

10. 00 μg/mL 的系列标准工作液 ,现用现配。或依仪器响应情况配制适当质量浓度的系列标准工作液。 3.4 材料

3.4. 1 离心管 :15 mL。

3.4.2 滤膜 :有机系 ,0. 45 μm。

1

4 仪器和设备

4. 1 气相色谱仪 :配有氮磷检测器(NPD)。

4.2 电子天平 :感量为 0. 01 mg和 0. 01 g。

4.3 超声波发生器。

4.4 涡旋混合器。

4.5 离心机 :转速 ≥8000 r/min。

4.6 食品粉碎机。

5 分析步骤

5. 1 试样制备和保存

称取具代表性小麦粉、小麦粉及其制品使用的食品添加剂样品约 200g,混合均匀 ,干燥避光密封保存备用。对于小麦粉制品 ,称取代表性样品约 200 g,湿度较低的样品 ,用食品粉碎机打碎混匀 ;湿度较高的样品 ,先剪碎 ,再用食品粉碎机混匀。4 ℃下冷藏避光密封保存备用 ,有效期 7 天。

5.2 样品前处理

准确称取 1 g(精确至 0. 01g)试样 ,置于 15mL具塞离心管中 ,准确加入无水乙醇(3. 1. 1)10mL,涡旋振荡 10 min,超声提取 10 min,混匀 ,8 000 r/min离心 5 min。上清液经 0. 45 μm 有机系滤膜过滤 ,弃去初滤液 2滴 ~ 5滴后备用。

5.3 仪器参考条件

气相色谱条件如下。

— 色谱柱 :键合/交联聚乙二醇石英毛细管柱(60 m×0. 32 mm×0. 25 μm)或其他等效柱。

— 载气 :高纯氮气。

— 载气流速 :2. 5 mL/min,尾吹气流速 :7. 5 mL/min。

— 进样口温度 :200 ℃。

— 1(进)i。式 :脉冲不分流 ,脉冲压力 20 psi(1 psi= 6. 895 kPa) , 维持时间 0. 75 min, 不分流时间

— 进样量 :1 μL。

— 升温程序 :起始温度 150℃ ,保持 1 min,15℃/min升温至 200℃ ,保持 1 min,10℃/min升温至 230 ℃ ,保持 2 min。240 ℃后运行 2 min。

— 检测器 :氮磷检测器(NPD) ,温度 320 ℃ ,空气流量 60 mL/min,氢气流量 3 mL/min。

5.4 标准曲线的制作

将系列标准工作液(3. 3. 3)按浓度由低到高分别注入气相色谱仪中 ,测定相应的峰面积 , 以系列标准工作液的质量浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线。

5.5 试样溶液的测定

将试样溶液注入气相色谱仪中 ,得到相应的峰面积。试样溶液中目标物色谱峰的保留时间与对应标准溶液色谱峰的保留时间偏差应在 ±0. 5%之内。 根据标准曲线 ,外标法定量 ,得到试样溶液中乙酰氧肟酸的浓度。试样溶液中乙酰氧肟酸的浓度应在标准曲线线性范围以内 ,超出线性范围则应稀释后

2

重新上机测定。 乙酰氧肟酸标准溶液特征色谱图见附录 B。

5.6 空白试验

除不加试样外 ,采用完全相同的测定步骤进行操作。

6 结果计算

试样中乙酰氧肟酸的含量按公式(1)计算 :

X

式中 :

X — 试样中乙酰氧肟酸的含量 ,单位为毫克每千克(mg/kg) ;

ρ — 由标准曲线得到的试样溶液中乙酰氧肟酸的质量浓度 ,单位为微克每毫升(μg/mL) ;

ρ0 — 由标准曲线得到的空白溶液中乙酰氧肟酸的质量浓度 ,单位为微克每毫升(μg/mL) ;

V — 试样溶液的体积 ,单位为毫升(mL) ;

f — 试样溶液的稀释倍数 ;

1 000— 换算系数 ;

m — 试样的质量 ,单位为克(g)。

以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示 ,计算结果保留三位有效数字。

7 精密度

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的 10%。

8 其他

本方法的检出限为 2 mg/kg,定量限为 6. 00 mg/kg。

9 结果表述

当乙酰氧肟酸的检测结果大于定量限时 ,可认为存在使用乙酰氧肟酸防止返色褐变的可能 ,并应结合现场执法证据进行综合研判。

3

附录 A

(资料性)

乙酰氧肟酸相关信息

乙酰氧肟酸相关信息见表 A. 1。

表 A. 1 乙酰氧肟酸中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量和结构式

中文名称

英文名称

CAS号

分子式

相对分子质量

结构式

乙酰氧肟酸

Acetohydroxamic acid

546-88-3

C2 H5 NO2

75. 07

4

附录 B

乙酰氧肟酸气相色谱图

乙酰氧肟酸气相色谱图见图 B. 1。

图 B. 1 乙酰氧肟酸标准溶液(5. 0 μg/mL)的气相色谱图

本方法起草单位 :河南省 食品 和盐 业检 验技 术研 究院(河南 省粮 油饲 料产 品质 量监 督检 验中 心) (袁利杰、袁阳蕾、宁亚萍、牛华伟、张培毅、杨芮、李嘉、谷瑞丽、凡猛、石璐、李彤辉、武文凯、刘璐、赵光升)。