《医用个人防护用品材料抗病毒活性测定》标准内容总结

一、标准概述

该标准（T/CIAA 021-2025）由中国中关村汇智抗菌新材料产业技术创新联盟发布，首次规定了医用个人防护用品对特定病毒抗病毒活性的测试方法。标准适用于包括医用外科口罩、医用防护口罩、眼罩、防护面屏、一次性隔离衣、医用一次性防护服、一次性手套、靴套、鞋套等医用防护用品及其制作材料。

二、术语与定义

标准明确了11个关键术语的定义：

1. ​​病毒​​：由核酸分子与保护性外壳构成的非细胞形态类生物结构
2. ​​抗病毒活性​​：通过物理或化学方法导致病毒失活的特性
3. ​​医用个人防护用品​​：保护个人避免因接触病原微生物等导致损伤的各种屏障用品
4. ​​对照样品​​：不含抗病毒材料组分的对照材料
5. ​​CPE​​：病毒引起的细胞病变效应
6. ​​病毒感染滴度​​：单位体积液体中具有生物活性的病毒颗粒数
7. ​​病毒蚀斑​​：病毒感染细胞后形成的局限性病变细胞区
8. ​​PFU​​：蚀斑形成单位
9. ​​TCID50​​：半数组织培养感染剂量
10. ​​多孔亲水性材料​​：水接触角小于65°的固体材料
11. ​​无孔疏水性材料​​：水接触角大于65°的固体材料

三、测试方法原则

测试方法基于将富含感染活性病毒的悬液与测试样品接触一定时间后，检测病毒悬液中仍具有感染活性的病毒数量。通过比较抗病毒产品样品和对照样品处理后具有感染活性病毒数量变化，计算产品抗病毒活性。

四、试验方法

1. 材料及样品准备

• ​​试剂​​：包括无菌水、DMEM培养基、青霉素、链霉素、胎牛血清、PBS等
• ​​设备​​：二氧化碳培养箱、高压蒸汽灭菌器、离心机、倒置显微镜等

• ​​代表性病毒​​：
  • 包膜病毒：甲型流感病毒H1N1 A/PR/8/34
  • 非包膜病毒：肠道病毒71型Human enterovirus 71 strain H
• ​​病毒制备​​：在宿主细胞中培养至75%-100%细胞出现病变时收获
• ​​宿主细胞准备​​：使用MDCK细胞和Nero细胞，培养至80%-90%融合度

• ​​多孔亲水性材料​​：称取(0.40±0.05)g，裁剪为20mm×20mm薄片
• ​​无孔疏水性材料​​：裁剪成50mm×50mm大小薄片，厚度不大于5mm
• ​​覆盖膜​​：聚乙烯薄膜，40mm×40mm，厚度0.05mm~0.10mm

2. 试验流程

• 病毒悬液浓度：1.0×10⁷~10.0×10⁷ PFU(TCID50)/mL
• ​​亲水性样品​​：在无菌小瓶容器中处理，0.2mL病毒悬液上样
• ​​疏水性样品​​：在无菌平皿容器中处理，0.2mL病毒悬液上样后覆盖膜

• ​​温度条件​​：标准25℃，可调整0℃~40℃
• ​​孵育时间​​：标准2h，可调整5min~24h
• ​​洗脱​​：使用SCDLP培养基洗脱，0.22μm孔径滤膜过滤

• ​​病毒蚀斑法​​：通过计数蚀斑数计算病毒滴度
• ​​TCID50法​​：通过观察细胞病变效应计算病毒滴度

3. 测试结果

• 病毒悬液滴度范围：1.0×10⁷~10.0×10⁷ PFU(TCID50)/mL
• "0"h孵育对照样品病毒滴度对数减少值<1.0
• "0"h孵育三个试样的对照样品病毒滴度值变异系数对数值≤0.2

• ​​抗病毒活性值​​：Mv=lg(Vb)-lg(Vc)
• ​​抗病毒活性率​​：R(%)=(B-C)/B×100%

• ​​高效主动抗病毒材料​​：10min内抗病毒性能≥99%
• ​​中效抗病毒材料​​：2h内抗病毒性能≥99%
• ​​弱效抗病毒材料​​：24h内抗病毒性能≥99%

五、附录内容

附录A：病毒蚀斑分析实验

详细描述了病毒蚀斑法的原理、材料、方法和步骤，包括单层细胞准备、病毒样品稀释和感染、琼脂糖覆盖物准备、蚀斑染色和计数等。

附录B：病毒TCID50的测定

详细描述了TCID50法的原理、材料、方法和步骤，包括单层细胞准备、病毒样品稀释和感染、细胞病变观察、TCID50统计和计算等。

六、测试报告要求

测试报告应包含以下信息：

1. 采用的标准
2. 试验起始及试验环境等基本信息
3. 空白对照样及抗病毒试样的制备过程
4. 试验接种液的体积及病毒滴度
5. 覆盖膜信息（如使用）
6. 回收得到的病毒滴度
7. 抗病毒活性值或抗病毒率
8. 与规定程序的任何偏差

该标准为医用个人防护用品的抗病毒性能评价提供了科学、规范的方法，有助于提升医用防护产品的质量控制和性能评估。