GB 31658.34-2026 食品安全国家标准 动物性食品中吩噻嗪类药物残留量的测定 液相色谱—串联质谱法

ICS 67.100 CCS X 16

中华 人民 共和 国国 家标 准

GB 31658.34—2026

食品安全国家标准动物性食品中

吩噻嗪类药物残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

National food safety standard—

Determination of phenothiazines residue in animal derived food— Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method

2026-04-24 发布

 

2026-10-01 实施

发布

中华 人民 共和 国农 业农 村部中华人民共和国国家卫生健康委员会国家 市场 监督 管理 总局

GB 31658 .34—2026

前言

本文件按照 GB/T

1 .1—2020« 标准化工作导则

第 1 部分 : 标准化文件的结构和起草规则»的规定

起草。

Ⅰ

GB 31658 .34—2026

食品安全国家标准

动物性食品中吩噻嗪类药物残留量测定

液相色谱串联质谱法

1 范围

本文件规定了动物性食品中吩噻嗪类药物残留量检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法。

本文件适用于猪、牛、羊的肌肉、肝脏、肾脏、脂肪及牛奶等动物源食品中氯丙嗪、异丙嗪、乙酰丙嗪、丙酰丙嗪、三氟丙嗪、三氟拉嗪、甲硫哒嗪、奋乃静、乙酰奋乃静、丙酰奋乃静等吩噻嗪类药物单个或混合物残留量的测定 ,其他畜禽产品的检测经验证后可参照执行。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本 适用 于本 文件 ; 不注 日期 的引 用文 件 , 其最 新版 本(包括 所有 的修 改单)适用 于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4 原理

试样中残留的吩噻嗪类药物用碱性乙腈提取 , 阳离子交换固相萃取柱净化 ,液相色谱串联质谱测定 ,外标法定量。

5 试剂与材料

除非另有说明 ,所用试剂均为分析纯 ;水为 GB/T 6682 规定的一级水。

5 .1 试剂

5 .1 .1 乙腈(CH3 CN) :色谱纯。

5 .1 .2 甲醇(CH3 OH) :色谱纯。

5 .1 .3 甲酸(HCOOH) :色谱纯。

5 .1 .4 氨水(NH3 . H2 O) :25% ~ 28%。

5 .2 溶液配制

5 .2 .1 5%氨水乙腈溶液 :取氨水 5 mL,用乙腈稀释至 100 mL,混匀。

5 .2 .2 1%甲酸乙腈溶液 :取甲酸 1 mL,用乙腈稀释至 100 mL,混匀。

5 .2 .3 5%氨化甲醇溶液 :取氨水 5 mL,用甲醇稀释至 100 mL,混匀 , 临用现配。

5 .2 .4 0 .1%甲酸水溶液 :取甲酸 1 mL,用水稀释至 1 000 mL,混匀。

5 .2 .5 0 .1%甲酸水乙腈溶液 :取 0 .1%甲酸水溶液 70 mL,用乙腈稀释至 100 mL,混匀。

5 .3 标准品

氯丙嗪、异丙嗪、乙酰丙嗪、丙酰丙嗪、三氟丙嗪、三氟拉嗪、甲硫哒嗪、奋乃静、丙酰奋乃静、乙酰奋乃静 ,纯度均 ≥98 .0% ,具体见附录 A。

5 .4 标准溶液制备

5 .4 .1 标准储备溶液(100 μg/mL) :准确称取氯丙嗪、异丙嗪、乙酰丙嗪、丙酰丙嗪、三氟丙嗪、三氟拉嗪、

1

GB 31658 .34—2026

甲硫哒嗪、奋乃静、丙酰奋乃静、乙酰奋乃静标准品适量(相当于各待测组分 10 mg) ,用甲醇溶解并定容至100 mL容量瓶 ,配制成浓度为 100 μg/mL 的储备液 , - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 6 个月 .

5 .4 .2 混合标准中间液(10 μg/mL) :准确移取 100 μg/mL 吩噻嗪类药物标准储备液 1 000 μL,用甲醇稀释并定容至 10 mL容量瓶 , - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 6 个月 .

5 .4 .3 混合标准工作液(100 ng/mL) :准确移取 10 μg/mL 吩噻嗪类药物混合标准中间液 100 μL,用甲醇稀释并定容至 10 mL容量瓶 , - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 6 个月 .

5 .5 材料

5 .5 .1 阳离子交换固相萃取柱 :60 mg/3 mL,或相当者 .

5 .5 .2 微孔滤膜 :0 .22 μm 有机系 .

6 仪器和设备

6 .1 液相色谱串联质谱仪 :配电喷雾离子源 .

6 .2 分析天平 :感量为 0 .000 01 g 和 0 .01 g.

6 .3 匀浆机 .

6 .4 离心机 :8 000 r/min或以上 .

6 .5 氮吹仪 .

6 .6 涡旋混合器 .

6 .7 振荡器 .

6 .8 固相萃取装置 .

7 试样的制备与保存

7 .1 试样的制备

7 .1 .1 组织

取适量新鲜或解冻空白或供试组织 ,绞碎并均质 .

a) 取绞碎并均质后的供试样品 ,作为供试试样 ;

b) 取绞碎并均质后的空白样品 ,作为空白试样 ;

c) 取绞碎并均质后的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样 .

7 .1 .2 牛奶

取适量新鲜或解冻的空白或供试牛奶 ,混合均匀 .

a) 取混匀后的供试样品 ,作为供试试样 ;

b) 取混匀后的空白样品 ,作为空白试样 ;

c) 取混匀后的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样 .

7 .2 试样的保存

- 18 ℃以下保存 ,避免反复冻融 .

8 测定步骤

8 .1 提取

准确称取试样(2±0 .05)g,置于 50 mL离心管中 ,加 5%氨水乙腈溶液 8 mL, 涡旋混合 1 min,振荡5 min,8 000 r/min离心 5 min. 取上清液转移至另一离心管中 . 残渣中加 5%氨水乙腈溶液 8 mL重复提取 1 次 ,合并 2 次的上清液 ,于 45 ℃水浴氮吹至近干 . 取 3 mL 1%甲酸乙腈溶液溶解上述残留物 , 涡旋混合 30 s,8 000 r/min离心 5 min,上清液备用 .

8 .2 净化

用甲醇、水各 3 mL活化固相萃取小柱 ;取备用上清液过柱 ,依次用水、甲醇各 3 mL淋洗小柱 ,抽干 ;

2

GB 31658.34—2026

用 3 mL 5%氨化甲醇溶液洗脱 ,收集洗脱液 ;45 ℃水浴氮气吹至近干 ,用 0.1%甲酸水乙腈溶液稀释至1.0 mL,涡旋混合 30 s,过 0.22 μm 滤膜 ,滤液装入进样瓶 ,待测。

8.3 基质匹配标准曲线的制备

准确量取标准工作溶液适量 ,用经提取和净化后的空白基质样品溶液稀释成浓度为 1.0 ng/mL、2.0

ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL、100.0 ng/mL 的基质匹配标准溶液 ,供液相

色谱串联质谱仪测定 ,临用前配制。 以基质匹配标准溶液浓度为横坐标、药物定量离子峰面积为纵坐标 ,

绘制标准曲线 ,求回归方程和相关系数。

8.4 测定

8.4.1 液相色谱参考条件

a) 色谱柱 :C18 柱 ,100 mm×2.1 mm(内径) ,粒径 1.7 μm,或相当者 ;

b) 流动相 :A 为 0.1%甲酸水溶液 ,B为乙腈 ,梯度洗脱(梯度洗脱程序见表 1) ;

c) 流速 :0.3 mL/min;

d) 柱温 :35 ℃ ;

e) 进样量 :5 μL。

表 1 流动相梯度洗脱条件

时间min

A

%

B

%

0

70

30

1.0

60

40

3 0

10

90

4 0

10

90

4.6

70

30

6.0

70

30

8.4.2 质谱参考条件

a) 电离方式 :电喷雾电离(ESI) ;

b) 扫描方式 :正离子扫描 ;

c) 检测方式 :多反应监测(MRM) ;

d) 离子源温度 :150 ℃ ;

e) 雾化温度 :500 ℃ ;

f) 电离电压 :0.5 kV;

g) 锥孔气流速 :50 L/h;

h) 雾化气流速 :1 000 L/h;

i) 定性离子对、定量子离子、锥孔电压、碰撞能量见表 2。

表 2 吩噻嗪类药物定性离子对、定量子离子和锥孔电压、碰撞能量

药物名称

离子对

m/z

锥孔电压V

碰撞能量eV

氯丙嗪

318.9>58.0

318.9>86.0 ∗

30

28

18

异丙嗪

285.2>86.1 ∗

285.2>198.1

20

14

20

乙酰丙嗪

327.1>58.0

327.1>86.0 ∗

32

26

20

丙酰丙嗪

341.2>86.0 ∗

341.2>58.0

34

18

26

三氟丙嗪

353.1>86.1 ∗

353.1>58.0

26

20

24

3

GB 31658.34—2026

表 2 (续)

药物名称

离子对

m/z

锥孔电压V

碰撞能量eV

三氟拉嗪

408.5>141.3

408.5>113.2 ∗

40

22

28

甲硫哒嗪

371.2>126.2 ∗

371.2>98.1

36

22

30

奋乃静

404.4>171.2 ∗

404.4>143.1

40

22

28

丙酰奋乃静

426.4>143.1

426.4>171.1 ∗

40

30

24

乙酰奋乃静

412.5>171.3

412.5>143.3 ∗

44

24

30

∗ 为定量离子对 .

8.4.3 测定法

8.4.3.1 定性测定

在同样测试条件下 ,试样溶液中吩噻嗪类药物的保留时间与基质匹配标准溶液中相应组分的保留时间偏差在 ±0.1 min以内 ;且检测到的相对离子丰度比率 ,应当与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子丰度比率一致 ,其允许偏差不超过 ±40% .

8.4.3.2 定量测定

按 8.4.1 和 8.4.2 设定仪器条件 ,以基质匹配标准溶液浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标 ,绘制标准工作曲线 ,作单点或多点校准 ,按外标法计算试样中药物的残留量 . 基质匹配标准溶液和试样溶液中待测物的响应值均在仪器检测的线性范围之内 . 吩噻嗪类药物标准溶液特征离子质量色谱图见附录 B. 对于试料中吩噻嗪类药物残留量超过仪器测定线性范围的 ,应对试样溶液采用空白基质样品溶液稀释后测定 .

8.5 空白试验

取空白试样 ,采用相同的测定步骤进行平行操作 .

9 结果计算和表述

试样中吩噻嗪类药物的残留量按标准曲线或公式(1)计算 .

式中 :

ω —供试样品中待测药物残留量的数值 ,单位为微克每千克(μg/kg) ;

A —试样溶液中待测药物的峰面积 ;

ρS —基质标准溶液中待测药物浓度的数值 ,单位为纳克每毫升(ng/mL) ;

V —试样最终定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

V1 —提取液定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

AS —基质标准溶液中待测药物的峰面积 ;

m —试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

V2 —提取液过柱体积的数值 ,单位为毫升(mL) .

注 :计算结果不小于 1 μg/kg的保留 3 位有效数字 ,1 μg/kg以下保留至小数点后 2 位 .

10 方法灵敏度、正确度、精密度

10.1 灵敏度

本方法检出限为 0.5 μg/kg,定量限为 1.0 μg/kg.

4

GB 31658 .34—2026

10 .2 正确度

本方法在 1 .0 μg/kg~ 10 μg/kg添加浓度水平上的回收率均为 60% ~ 120%。

10 .3 精密度

本方法批内相对标准偏差 ≤20% ,批间相对标准偏差 ≤20%。

5

GB 31658.34—2026

附录 A

(规范性)

吩噻嗪类化合物信息

吩噻嗪类药物中英文通用名称、化学分子式和 CAS号见表 A.1。

表 A.1 吩噻嗪类药物的中英文通用名称、化学分子式和 CAS号

序号

中文通用名称

英文通用名称

化学分子式

CAS号

1

氯丙嗪

Chlopromazine

C17 H19 ClN2 S

50__53__3

2

异丙嗪

Promethazine

C17 H20 N2 S

60__87__7

3

乙酰丙嗪

Acepromazine

C19 H22 N2 OS

61__00__7

4

丙酰丙嗪

Propionylpromazne

C20 H24 N2 OS

7681__67__6

5

三氟丙嗪

Triflupromazine

C18 H19 F3 N2 S

146__54__3

6

三氟拉嗪

Trifluoperazine

C21 H24 F3 N3 S

117__89__5

7

甲硫哒嗪

Thioridazine

C21 H26 N2 S2

50__52__2

8

奋乃静

Perphenazine

C21 H26 ClN3 OS

58__39__9

9

丙酰奋乃静

Carfenazine

C24 H31 N3 O2 S

2622__30__2

10

乙酰奋乃静

Acetophenazine

C23 H29 N3 O2 S

2751__68__0

6

GB 31658 .34—2026

附录 B

(资料性)

吩噻嗪类药物标准溶液特征离子质量色谱图

吩噻嗪类药物标准溶液特征离子质量色谱图见图 B.1。

%

100 0

1 1 : MRM Of 6 channels ES+ 1 . 93 412.48>171 . 31 (YX FNJ)

8 . 87e4 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

3: MRM Of 10 channels ES+

327 . 09>85 . 98 (YXBQ) 2 . 65e5

t, min 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2 . 50 3 . 00 3 . 50 4. 00 4. 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

3: MRM Of 10 channels ES+

285 .22>86 . 05 (YBQ) 1 . 34e5

t, min 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

3: MRM Of 10 channels ES+

426 . 35>171 . 14 (BX FNJ) 1 . 42e5

0 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

9: MRM Of6 channels ES+

404 .41>171 . 16 (FNJ)

2 . 07e4

t, min 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

9: MRM Of 6 channels ES+

341 . 22>86 . 05 (BXBQ)

1 . 25e5

0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50

6 .50

t, min 7 . 00

%

100 0

8: MRM Of2 channels ES+ 3 . 66 318 . 97>85 . 98 (LBQ)

1 .49e5 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

13: MRM Of 6 channels ES+

408 .48>141 . 26 (SFLQ)

1 . 37e5

0 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

13: MRM Of6 channels ES+ 4. 02 353 . 1>86 . 09 (SFBQ)

3 . 52e5

0 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2 . 50 3 . 00 3 . 50 4. 00 4. 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

13: MRM Of 6 channels ES+ %

1O0 4. 08 371 .22>126 . 2 JL.DQ)

1 . 43e5 0 t, min

-0 . 00 0 .50 1 . 00 1 .50 2. 00 2. 50 3 . 00 3 . 50 4 . 00 4 . 50 5 . 00 5 . 50 6 . 00 6 .50 7 . 00

%

100

%

100

%

100

%

100

%

100

%

100

%

100

2.46

2 .24

3 . 15

2 .27

3 . 93

2 . 83

标引序号说明 :

1 — 乙酰奋乃静 ;

6 — 丙酰丙嗪 ;

2 — 乙酰丙嗪 ;

7 — 氯丙嗪 ;

3 — 异丙嗪 ;

8 — 三氟拉嗪 ;

4 — 丙酰奋乃静 ;

9 — 三氟丙嗪 ;

5 — 奋乃静 ;

10 — 甲硫哒嗪。

图 B.1

吩噻嗪类药物标准溶液特征离子质量色谱图(1 .0

μg/L)