GB 31659.14-2026 食品安全国家标准 乳及乳粉中吩噻嗪类药物残留量的测定 液相色谱—串联质谱法

ICS 67.100 CCS X 16

中华 人民 共和 国国 家标 准

GB 31659.14—2026

食品安全国家标准

乳及乳粉中吩噻嗪类药物残留量的测定

液相色谱-串联质谱法

National food safety standard—

Determination of phenothiazines residues in milk and milk powder—

Liquid chromatography-tandem mass spectrometry method

2026-04-24 发布

 

2026-10-01 实施

发布

中华 人民 共和 国农 业农 村部中华人民共和国国家卫生健康委员会国家 市场 监督 管理 总局

GB 31659 .14—2026

前言

本文件按照 GB/T

1 .1—2020« 标准化工作导则

第 1 部分 : 标准化文件的结构和起草规则»的规定

起草。

Ⅰ

GB 31659 .14—2026

食品安全国家标准

乳及乳粉中吩噻嗪类药物残留量的测定

液相色谱串联质谱法

1 范围

本文件规定了乳与乳粉中吩噻嗪类药物残留量检测的制样和液相色谱串联质谱测定方法。

本文件适用于牛乳、羊乳、牛乳粉和羊乳粉中氯丙嗪、异丙嗪、乙酰丙嗪、丙酰丙嗪、赛拉嗪 5 种吩噻嗪类药物残留量的测定。 其他类型乳和乳粉经验证后可参照执行。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。 其中 ,注日期的引用文件 ,仅该日期对应的版本 适用 于本 文件 ; 不注 日期 的引 用文 件 , 其最 新版 本(包括 所有 的修 改单)适用 于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

3 术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4 原理

试样中的吩噻嗪类药物 ,经酸化乙腈提取 ,混合型强阳离子交换柱净化 ,液相色谱串联质谱仪测定 ,外标法定量。

5 试剂与材料

除非另有说明 ,所用试剂均为分析纯 ,水为 GB/T 6682 规定的一级水。

5 .1 试剂

5 .1 .1 甲醇(CH3 OH) :色谱纯。

5 .1 .2 乙腈(CH3 CN) :色谱纯。

5 .1 .3 乙腈(CH3 CN)。

5 .1 .4 甲酸(HCOOH) :色谱纯。

5 .1 .5 氨水(NH3 . H2 O) :25% ~ 28%。

5 .1 .6 浓盐酸(HCl) :35% ~ 37%。

5 .1 .7 乙酸铵(CH3 COONH4)。

5 .2 溶液配制

5 .2 .1 0 .1 mol/L盐酸溶液 :取浓盐酸 0 .835 mL,用水稀释至 100 mL,混匀。

5 .2 .2 乙腈盐酸溶液(9+1) :取 0 .1 mol/L盐酸溶液 50 mL, 乙腈(5 .1 .3)450 mL,混匀。

5 .2 .3 5%氨水乙腈溶液 :取氨水 5 mL,用乙腈(5 .1 .3)稀释至 100 mL,混匀。

5 .2 .4 2 mmol/L乙酸铵溶液(含 0 .1%甲酸) :取乙酸铵 0 .154 g,加甲酸 1 mL,用适量水溶解并稀释至1 000 mL,混匀。

5 .3 标准品

氯丙嗪、异丙嗪、乙酰丙嗪、丙酰丙嗪、赛拉嗪标准品 ,纯度均 ≥95 .0% ,见附录 A。

1

GB 31659 .14—2026

5 .4 标准溶液制备

5 .4 .1 标准储备液 :取标准品各适量(相当于各待测组分 10 mg) ,精密称定 , 用甲醇溶解并稀释定容至100 mL,配制成浓度为 100 mg/L的标准储备液 . - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 12 个月 .

5 .4 .2 混合标准中间液 :准确量取上述标准储备液适量 , 用甲醇稀释制 成浓 度为 10 mg/L 的标 准中 间液 , - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 3 个月 .

5 .4 .3 混合标准工作液(100 μg/L) :准确量取混合标准中间液适量 ,用甲醇稀释配制成浓度为 100 μg/L标准工作液 . - 18 ℃以下避光保存 ,有效期 1 个月 .

5 .4 .4 混合标准工作液(20 μg/L) :准确量取 100 μg/L混合标准工作液适量 ,用甲醇稀释配制成浓度为20 μg/L标准工作液 . 临用现配 .

5 .5 材料

5 .5 .1 混合型强阳离子交换固相萃取柱 :60 mg/3 mL,或相当者 .

5 .5 .2 微孔滤膜 :0 .22 μm 有机系尼龙滤膜 .

6 仪器设备

6 .1 液相色谱串联质谱仪 :配电喷雾离子源 .

6 .2 离心机 :9 500 r/ min或以上 .

6 .3 电子天平 :感量为 0 .000 01 g、0 .001 g 和 0 .01 g.

6 .4 涡旋混合器 .

6 .5 振荡器 .

6 .6 超声波清洗器 .

6 .7 固相萃取装置 .

7 试样的制备与保存

7 .1 试样的制备

7 .1 .1 乳

取适量新鲜或冷藏的供试乳或空白乳 ,混合均匀 .

a) 取混匀的供试样品 ,作为供试试样 ;

b) 取混匀的空白样品 ,作为空白试样 ;

c) 取混匀的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样 .

7 .1 .2 乳粉

取适量供试乳粉或空白乳粉 ,混合均匀 .

a) 取混匀的供试样品 ,作为供试试样 ;

b) 取混匀的空白样品 ,作为空白试样 ;

c) 取混匀的空白样品 ,添加适宜浓度的标准工作液 ,作为空白添加试样 .

7 .2 试样的保存

乳试样密封- 18 ℃及以下温度保存 ,乳粉试样室温避光保存 .

8 测定步骤

8 .1 提取

准确称取牛乳(羊乳)试料(2±0.05) g,于 50 mL离心管 . 乳粉试料称取(2±0.05) g 于 15 mL离心管 ,加水 8 mL,超声溶解后 ,稀释至 10 mL,混匀 ,取 2 mL样品溶液 . 加乙腈盐酸溶液 4 mL,涡旋混合 20 s,振荡 10 min,9 500 r/min离心 5 min. 全部上清液转移至另一洁净刻度离心管 ,残渣中再加入乙腈盐酸溶液4 mL,重复提取 1 次 ,合并 2 次提取液并用水稀释至 10 mL,涡旋混合 1 min,9 500 r/min离心5 min,待净化 .

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GB 31659 .14—2026

8 .2 净化

取混合型强阳离子交换固相萃取柱 ,依次以甲醇 3 mL和水 3 mL预处理。 取待净化提取液 5 mL过

液于15 mL刻度试管中。 45 ℃水浴氮气吹至约 1 mL, 用 2 mmol/L乙酸铵溶液(含 0 .1%甲酸)稀释至

柱 , 流速控制在约 1 滴/s,弃去流出液。 用水 3 mL淋洗 ,抽干。 用 5%氨水乙腈溶液 5 mL洗脱 ,收集洗脱

2 mL,涡旋混合 1 min,过 0 .22 μm 滤膜 ,供液相色谱串联质谱仪测定。

8 .3 基质匹配标准曲线的制备

精密量取 100 μg/L混合 标准 工作 液 (5 .4 .3) 或 20 μg/L混合 标准 工作 液 (5 .4 .4) 适量 , 用乙 腈

(5 .1 .2)稀释成含吩噻嗪药物浓度分别为 0.05 μg/L、0.1 μg/L、0.2 μg/L、0.5 μg/L、1 .0 μg/L、2.0 μg/L、

提取和净化后的空白基质样品溶液 ,混匀 ,配制成基质匹配标准溶液 ,供液相色谱串联质谱仪测定。 乳粉

基质匹配标准溶液浓度 :0 .05 μg/L、0 .1 μg/L、0 .2 μg/L、0 .5 μg/L、1 .0 μg/L。 牛羊乳基质匹配标准溶

5 .0 μg/L的系列标准溶液。 从上述标准溶液中各取 1 .0 mL加入洁净试管中 , 吹氮至近干 ,加入 1 mL经

液浓度 :0 .2 μg/L、0 .5 μg/L、1 .0 μg/L、2 .0 μg/L、5 .0 μg/L。

8 .4 测定

8 .4 .1 液相色谱参考条件

a) 色谱柱 :C18 柱 (100 mm×2 .1 mm ,2 .7 μm)或相当者 ;

b) 流动相 :A 为 2 mmol/L乙酸铵溶液(含 0 .1%甲酸) ,B为乙腈(5 .1 .2) ,梯度洗脱条件见表 1 ;

表 1 流动相梯度洗脱条件

时间min

A

%

B

%

0

95

5

5 .0

10

90

7 0

10

90

7 .1

95

5

10

95

5

c) 流速 :0 .25 mL/min;

d) 柱温 :40 ℃ ;

e) 进样量 :5 μL。

8 .4 .2 质谱参考条件

a) 电离方式 : 电喷雾电离(ESI) ;

b) 扫描方式 :正离子模式 ;

c) 检测方式 :多反应监测(MRM) ;

d) 离子源温度 :550 ℃ ;

e) 电喷雾电压 :5 500 V;

f) 气帘气压力(CUR) :35 .0 psi(氮气) ;

g) 碰撞气体(CAD) :Medium(氮气) ;

h) 雾化气(GS1) :40 psi;

i) 辅助气(GS2) :60 psi;

j) 定性离子对、定量子离子、去簇电压及碰撞能量见表 2。

表 2 5 种吩噻嗪类药物的定性离子对、定量离子对、去簇电压及碰撞能量参考值

药物

定性离子对m/z

定量子离子m/z

去簇电压V

碰撞能量eV

氯丙嗪

319 .1>58 .1

319 .1>58 .1

60

26

319 .1>86 .1

27

异丙嗪

285 .1>86 .1

285 .1>86 .1

50

26

285 .1>198 .0

27

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GB 31659 .14—2026

表 2 (续)

药物

定性离子对m/z

定量子离子m/z

去簇电压V

碰撞能量eV

乙酰丙嗪

327 .1>86 .1

327 .1>86 .1

60

26

327 .1>58 .1

27

丙酰丙嗪

341 .2>58 .1

341 .2>58 .1

60

26

341 .2>86 .1

27

赛拉嗪

221 .2>90 .0

221 .2>90 .0

60

26

221 .2>164 .0

27

8 .4 .3 测定法

8 .4 .3 .1 定性测定

在同样测试条件下 ,试样溶液中的吩噻嗪类药物的保留时间与基质匹配标准溶液中相应组分的保留时间相比 ,偏差在 ±0 .1 min以内 ,且检测到的相对离子比率 ,应当与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子比率一致 ,其允许相对偏差在 ±40%内 .

8 .4 .3 .2 定量测定

按 8 .4 .1 和 8 .4 .2 设定仪器条件 , 以基质匹配标准溶液浓度为横坐标、以峰面积为纵坐标 ,绘制标准工作曲线 ,作单点或多点校准 ,按外标法计算试样中药物的残留量 ,基质匹配标准溶液及试样溶液中的目标物响应值均在仪器检测的线性范围内 . 标准溶液特征离子质量色谱图见附录 B. 对于试料中吩噻嗪类药物残留量超过仪器测定线性范围的 ,应对试样溶液采用空白基质溶液稀释后测定 .

8 .5 空白试验

取空白试样 ,采用相同的测定步骤进行平行操作 .

9 结果计算

试样中待测药物的残留量按标准曲线或公式(1)计算 .

ω = … … … … … … … … … … … … … (1)

式中 :

ω — 试样中待测药物残留量的数值 ,单位为微克每千克(μg/kg) ;

ρS — 标准溶液中待测药物浓度的数值 ,单位为微克每升(μg/L) ;

A — 试样溶液中待测药物的峰面积 ;

V1 — 提取溶液总体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

V3 — 最终定容体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

AS — 标准溶液中待测药物的峰面积 ;

V2 — 吸取出用于净化的提取溶液体积的数值 ,单位为毫升(mL) ;

m — 试样质量的数值 ,单位为克(g) ;

1 000 — 换算系数 .

注 :计算结果不小于 1 μg/kg的保留 3 位有效数字 ,1 μg/kg以下保留至小数点后 2 位 .

10 方法灵敏度、正确度和精密度

10 .1 灵敏度

本方法 5 种吩噻嗪类药物的检出限为 0 .2 μg/kg,定量限为 0 .5 μg/kg.

10 .2 正确度

本方法在 0 .5 μg/kg~ 5 .0 μg/kg添加浓度的回收率为 70% ~ 120% .

10 .3 精密度

本方法的批内相对标准偏差 ≤15% ,批间相对标准偏差 ≤20% .

4

GB 31659 .14—2026

附录 A

(规范性)

吩噻嗪类化合物信息

吩噻嗪类化合物的中英文通用名称、CAS号、化学分子式和相对分子质量见表 A.1。

表 A.1 吩噻嗪类化合物标准物质的信息

序号

中文通用名称

英文通用名称

CAS号

化学分子式

相对分子质量

1

氯丙嗪

Chlorpromazine

50__53__3

C17 H19 ClN2 S

318 .9

2

异丙嗪

Promethazine

60__87__7

C17 H20 N2 S

284 .4

3

乙酰丙嗪

Acepromazine

61__00__7

C19 H22 N2 OS

326 .5

4

丙酰丙嗪

Propionylpromazine

3568__24__9

C20 H24 N2 OS

340 .5

5

赛拉嗪

Xylazine

7361__61__7

C12 H16 N2 S

220 .3

5

GB 31659 .14—2026

附录 B

(资料性)

标准物质特征离子质量色谱图

吩噻嗪类化合物标准物质特征离子质量色谱图见图 B.1 .

强度20 000

强度20 000

4. 26

4. 26

氯丙嗪

319 . 1/86 . 1 氯丙嗪

319 . 1/58 . 1

14 000

12 000

14 000

12 000

4 000 2 000

4 000 2 000

0 .5 1 . 0 1 . 5 2. 0 2.5 3 . 0 3 .5 4. 0 4. 5 5 . 0 5 . 5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5 9 . 0

0 . 5 1 . 0 1 .5 2 . 0 2 . 5 3 . 0 3 . 5 4. 0 4. 5 5 . 0 5 . 5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5

t, min

t, min t, min

强度

3 500

3 000

2 500

2 000

1 500

500

0

强度

7

6

5

4

3

2

1

0

9

8

7

6

5

4

3

2

1

3 . 92

285 . 1

异丙嗪

0 . 5 1 . 0 1 . 5 2. 0 2. 5 3 . 0 3 . 5 4 . 0 4.5 5 . 0 5 .5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5 t, min

3 . 86

327 . 1/58 . 1 乙酰丙嗪

0 . 5 1 . 0 1 . 5 2. 0 2. 5 3 . 0 3 . 5 4. 0 4.5 5 . 0 5 .5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5 t, min

强度

3 .20

221 .2/90 . 0

5 4 3 2 1

0 .5 1 . 0 1 .5 2. 0 2 . 5 3 . 0 3 . 5 4 . 0 4. 5 5 . 0 5 . 5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0

强度

3 . 91

000

285 . 1/86 . 1 异丙嗪

0 . 5 1 . 0 1 .5 2. 0 2 . 5 3 . 0 3 .5 4. 0 4 . 5 5 . 0 5 . 5 6 . 0 6 .5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 . 5 t, min

强度

3 . 86

乙酰丙嗪

327 . 1/86 . 1

5 4 3 2 1

0 . 5 1 . 0 1 . 5 2. 0 2 . 5 3 . 0 3 . 5 4. 0 4 .5 5 . 0 5 .5 6 . 0 6 . 5 7 . 0 7 . 5 8 . 0 8 .5 t, min

10 9 8 7 6 5 4 3 2 1

赛拉嗪

5 4 3 2 1

5 4 3 2 1

000

4

3

2 1

图 B.1 混合标准溶液特征离子质量色谱图(0 .5 μg/L)