农业农村部公告 第864号-19-2024 转基因植物及其产品环境安全检测 抗虫玉米 抗虫性室内生物测定

国家标准《转基因植物及其产品环境安全检测 抗虫玉米抗虫性室内生物测定》主要内容总结

本文件规定了转基因抗虫玉米在室内环境下对​​棉铃虫、亚洲玉米螟、黏虫、草地贪夜蛾​​四种靶标害虫的抗性检测方法，适用于自交系及衍生品种的抗虫性评估。

• ​​检测方法​​：将初孵幼虫（卵孵化24小时内）人工转接至转基因抗虫玉米组织（花丝、籽粒、心叶等）与非转基因对照材料上饲养，观察存活情况。
• ​​抗性评估​​：通过校正死亡率（以感虫对照的自然死亡率校准）判定抗性水平，结合统计分析差异显著性。

• ​​转基因抗虫玉米​​：通过基因工程导入外源抗虫基因的玉米品种。
• ​​靶标害虫​​：棉铃虫、亚洲玉米螟、黏虫、草地贪夜蛾。
• ​​校正死亡率​​：公式为 y=1−x0​xt​−x0​​×100，其中 xt​ 为受试材料死亡率，x0​ 为感虫对照死亡率。

• ​​材料要求​​：
  • 种子符合《GB 4404.1-2008》二级以上标准。
  • 靶标害虫需实验室饲养≥2代，遗传背景一致，未接触农药或抗虫材料。
• ​​区组设计​​：
  • 随机区组设计，3次重复，小区面积30㎡（5m×6m），行距60cm，株距25cm。
  • 全生育期不施用杀虫剂，按农业部953号公告10.1-2007执行。

​​棉铃虫​​

• ​​取样​​：吐丝期（花丝）、灌浆期（籽粒），每株取20株材料，每皿1头幼虫，共5皿/株。
• ​​饲养​​：26-28℃、湿度70-80%、光照16:8小时，6天后调查存活率。

​​亚洲玉米螟​​

• ​​取样​​：心叶期（V6-V8）、吐丝期（花丝）、灌浆期（籽粒），每株1皿，每皿5头幼虫。
• ​​饲养条件​​同上，6天后调查。

​​黏虫​​

• ​​取样​​：V4-V6期心叶，每皿5头幼虫。
• ​​饲养与调查​​同棉铃虫。

​​草地贪夜蛾​​

• ​​取样​​：V5-V8期心叶、花丝、籽粒，每皿1头幼虫，共5皿/株。
• ​​饲养条件​​同上，6天后调查。

• ​​死亡率计算​​：x=NN−n​×100，N为总虫数，n为存活数。
• ​​有效性验证​​：感虫对照死亡率<20%时试验有效，否则需重做。
• ​​抗性级别标准​​：
  

  抗性级别	亚洲玉米螟（校正死亡率%）	其他三种害虫（校正死亡率%）
  高抗	≥95	≥90
  抗	95>y≥60	90>y≥60
  中抗	60>y≥40	60>y≥40
  感	<40	<40

• ​​结果表述​​：需说明差异显著性（显著/极显著/不显著）及抗性级别。

• ​​环境条件​​：温度、湿度、光照需严格一致。
• ​​饲料更换​​：根据组织新鲜程度及时更换，避免腐烂影响结果。
• ​​靶标虫源​​：确保未接触抗虫材料或农药，保证遗传背景均一性。

• 引用标准：GB 4404.1-2008（种子质量）、农业部953号公告10.1-2007（田间试验设计）。
• 归口单位：全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会。

​​总结​​：该标准系统规范了转基因抗虫玉米室内抗虫性检测的全流程，覆盖试验设计、材料选择、操作步骤、数据分析和结果判定，重点通过靶标害虫的校正死亡率评估抗性等级，确保检测结果的科学性与可比性。