NY/T 4452-2025 水稻根结线虫病抗性鉴定技术规程 ,该文件为pdf格式 ,请用户放心下载!
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水稻根结线虫病抗性鉴定技术规程
1 范围
本文件确立了水稻根结线虫病抗性鉴定程序,规定了鉴定程序、接种方法和抗性评价,描述了相应的
方法.
本 文件适用于全国主要稻区水稻(Oryzasativa L?)品种及其育种资源材料对拟禾本科根结线虫病
的抗性鉴定及评价.
2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件.
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件.
3?1
水稻根结线虫病 ricerootGknotnematodedisease
由拟禾本科根结线虫(Meloidogynegraminicola)等侵染水稻根系而引起的一种水稻病害.病原形
图1 抗性鉴定程序
态特征和危害症状见附录A.
4 鉴定程序
水稻根结线虫病抗性鉴定程序包括接种和抗性评价2个阶
段.抗性鉴定程序如图1所示.
5 接种
5?1 接种材料准备
选用无病健康的种子,用0?5%次氯酸钠溶液消毒15min,
灭菌水冲洗3次,(28±2)℃催芽,当种子露白时播种于无菌育
苗盘上育苗.2叶~3叶时移栽至盆钵(9cm×9cm×12cm),
每钵2株,每钵约125g基质.在温度25 ℃~28 ℃、相对湿度
70%~80%的日光温室进行培养.当水稻幼苗长到4叶~5叶
期用于接种鉴定.选用当地适宜的感病品种作为感病对照.
5?2 线虫准备
采集水稻拟禾本科根结线虫病根组织,机械破碎,依次通过孔径为180μm、75μm 和25μm 标准筛
网,收集孔径为25μm 筛网上的卵,加入35%蔗糖溶液,5000r/min离心5min,取上清液即得纯净卵,
0?5%次氯酸钠消毒虫卵2min~3min,灭菌水洗涤3次.取卵悬浮液轻轻加入培养皿中,于25 ℃~28
℃避光静置2d~5d;收集新孵化的2龄幼虫,并调整线虫悬浮液浓度至200条/mL~300条/mL,用于接
种鉴定.线虫的繁殖和保存见附录B.
5?3 接种方法
在距离水稻茎基部2cm 的相对方向各打直径约0?5cm 小孔,用移液器分别接种0?5mL线虫悬浮液,
共200条~300条线虫,并轻压封闭孔口.每个待鉴定材料接种10株,重复3次.植株在温度25℃~28℃、相
对湿度70%~80%、自然光照条件下进行正常管理.
5?5 鉴定材料处理
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鉴定完毕后将水稻植株、残体及土壤基质集中进行无害化处理.
6 抗性评价
6?1 病情调查
接种后20d调查根结线虫病的发生情况.调查时检查每株水稻根部发病情况,通过统计根结数量,
确定根结线虫病的危害程度,确定病情级别(表1),并计算根结指数(GI).
表1 病情级别的划分
根系病情级别根系症状
0级整个根系上无根结
1级整个根系上有1个~2个根结
2级整个根系上有3个~10个根结
3级整个根系上有11个~20个根结
4级整个根系上有21个~30个根结
5级整个根系上有>30个根结
根结指数(GI)按式(1)计算.
Σ(s ×n)
GI=?(s×n)
N×S ×100???????????????? (1)
式中:
GI ———根结指数;
Σ ———各病情级别数值与各病情级别植株数乘积的总和;
s ———各病情级别数值;
n ———各病情级别病株数,单位为株;
N ———调查总株数,单位为株;
S ———最高病情级别数值.
6?2 有效性判别
当感病对照材料的根结指数大于50(GI>50)时,该批次抗性鉴定判定为有效.
6?3 抗性评价标准
依据鉴定材料3次重复的病情指数平均值确定其抗、感水平,划分标准见表2.
表2 水稻对根结线虫病抗性的评价标准
根结指数(GI) 抗性评价
GI =0 免疫(IM)
0<GI≤5?0 高抗(HR)
5?0<GI≤25?0 抗病(R)
25?0<GI≤50?0 中感(MS)
50?0<GI≤75?0 感病(S)
GI>75?0 高感(HS)
6?4 抗性评价报告
依据水稻鉴定材料根结指数(GI)平均值确定水稻材料的抗性水平,按照附录C填写鉴定表格,编写
正式鉴定报告.
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附 录 A
(资料性)
拟禾本科根结线虫形态特征及危害症状
A?1 分类地位
拟禾本科根结线虫(Meloidogynegraminicola):垫刃目Tylenchida垫刃亚目Tylenchina异皮线虫
科Heteroderidae根结线虫属Meloidogyne.
A?2 形态描述
A?2?1 雌虫
虫体梨形至球形,颈部缢缩明显;口针纤细且短,口针基部球发达,卵圆形,前缘稍向后斜;排泄孔明
显,中食道球大,近圆形,瓣门发达,食道腺发达.会阴花纹卵圆形或近圆形,线纹通常平滑细密,侧区不
明显;弓通常高、近方形,有的低、圆,背纹与腹纹通常相连;背弓部、尾端周围及肛门周围常见有短、断裂、
不规则的线纹;尾尖明显,阴门区一般无线纹;阴门缝较长,侧尾腺侧口小、明显、紧邻,侧尾腺间距约为阴
门裂长度2/3(图A?1).
图A?1 拟禾本科根结线虫形态学特征
A?2?2 雄虫
虫体蠕虫状,体环明显.头架中等发达,头冠低、光滑、圆,与头区分离;头区与体部连续或缢缩不明
显;口针基杆柱状,与口针基部球连接处稍变窄,口针基部球卵圆形,与杆部界线明显,前缘平或略向后斜;
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精巢单条、前伸,少数在前端有回叠,精巢内常见充满精子;交合刺发达,引带杆状,尾短,多钝圆,少数尾部
为窄圆.
A?2?3 2龄幼虫
虫体细长蠕虫状,体环细.头架中等发达.冠低平或稍微凹陷;唇区与体部连续;口针纤细,基部球
小、圆.中食道球椭圆形,瓣门清晰.半月体位于中食道球后,排泄孔紧靠其后,食道腺延伸较长,覆盖肠
腹面;直肠膨大,尾细长,尾端透明区长且窄,尾尖,略呈棍棒状.
A?3 危害症状
苗期受害植株叶黄化、纤弱,发根迟,长势差,死苗多;分蘖期受害植株矮小,叶片黄化,分蘖明显减少;
穗期不抽穗或出穗植株则表现早熟、穗短,结实少,秕谷多.受害水稻根系发育严重受阻,根尖受害严重,
初期稍肿大,根结膨大后可急剧扭曲,大多呈钩状,少数为锤状,老根变褐易腐烂(图A?2).
图A?2 水稻根结线虫病根部症状
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附 录 B
(资料性)
拟禾本科根结线虫的繁殖和保存
B?1 繁殖
将经过鉴定的拟禾本科根结线虫接种在高感寄主植物的根部,在25℃~28℃、土壤相对湿度70%~
80%条件下培养40d~60d.
B?2 保存
采用活体保存方法,将拟禾本科根结线虫接种在高感寄主植物的根部,在25℃~28℃、土壤相对湿度
70%~80%条件下培养,并且每60d重新进行一次线虫分离、收集及接种,保障拟禾本科根结线虫活性和
数量.
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附 录 C
(规范性)
抗性鉴定调查记录表
鉴定调查记录表见表C?1.
表C?1 抗性鉴定调查记录表
接种日期:年 月 日调查日期: 年 月 日
品种/材料
名称
重复
各级株数,株
0 1 2 3 4 5
病情
指数
平均
病情指数
抗性
评价
品种1
ⅠⅡⅢ
品种2
ⅠⅡⅢ
?
ⅠⅡⅢ
品种N
ⅠⅡⅢ
感病
对照
ⅠⅡⅢ
鉴定人:
记录人:
6
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