ICS 71.100.35 CCSY44
团 体 标 准
T/CHCIA 002-2022
日化产品驱螨、抑螨和杀螨性能的 评价方法
Evaluation methods of household chemicals for mites repellent, mites suppression and mites killing
2022-10-30发布 2022-11-30实施
中国日用化工协会 发 布
T/CHCIA 002-2022
前 言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。
本文件由中国日用化工协会提出并归口。
本文件起草单位：山东九鑫生物工程有限公司、皖南医学院、宁波大央科技有限公司、中华全国供 销合作总社南京野生植物综合利用研究所、广州康王健康科技有限公司、上海家化联合股份有限公司、 广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)、中轻日用化学检验认证有限公司。
本文件主要起草人：湛孝东、陈国庆、张锋伦、吕玲玲、张大存、夏冷、康燕、孙廷丽、马世宏、 李朝品、汪海波、徐旭、蒋峰、牛雪彬、单承莺、聂、王杰、殷志邦。
工
日化产品驱螨、抑螨和杀螨性能的评价方法
1 范围
本文件规定了日化产品的驱螨、抑螨和杀螨性能的评价方法。
本文件适用于具有除螨功效的日化产品，本文件不适用于化妆品。
2 规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1 螨虫mites
本文件中螨虫类型专指尘螨，隶属蜱螨亚纲粉螨亚目麦食螨科的一类微型生物，其主要类型是粉尘 螨 (Dermatophagoides farinse) 和屋尘螨 (Dermatophagoides pteronyssinus)。
注：粉尘螨椭圆形体型，雌螨体长0.37～0.44 mm, 背部中央有横行皮纹，末端拱形，足Ⅲ、IV等粗。雄螨体型稍小， 后盾板短宽，足I 粗壮，基节I 内突相接;屋尘螨体长圆形，雌螨体长0.29～0.38 mm, 背部中央有纵行皮纹，足Ⅲ较粗 长，足IV短小。雄螨体型稍小，后盾板长大于宽，足I 、Ⅱ 等粗，基节I 内突不相接。
3.2 驱螨mites repellent
采用化学、物理等方法驱赶作用对象上螨虫，减少其数量的过程。
3.3 抑螨mites suppression
采用化学、物理等方法抑制作用对象上螨虫生长发育的过程。
3.4 杀螨mites killing
采用化学、物理等方法杀死作用对象上螨虫的过程。
3.5 试样sample
加入待测样品的实验组。
3.6 对照样control samples
与试样条件相同但未加任何样品的组别。
4 安全预防措施
螨虫易于在试验条件下扩散并孳生，可能对试验人员或他人造成一定危害，所以应在封闭的饲养室 环境下由经过专业培训的人员进行该项试验，试验后对环境进行消杀。
5 试验方法
5.1 方法概述
将试样和对照样分别放在洁净的培养皿内，在相同的条件下进行试验(不同性状的样品选择适宜的 给样方式)。经过规定的培养时间后，对试样培养皿内和对照样培养皿内存活的螨虫数量进行计数，根 据所采用的试验方法计算螨虫驱避率、抑制率和杀灭率，评价样品的驱螨、抑螨和杀螨效果。
5.2 设备与材料
5.2.1 解剖镜或体式显微镜(×50)。
5.2.2 恒温恒湿培养箱，温度(25±1)℃,相对湿度(75±5)%。
5.2.3 培养皿，塑料或玻璃材质，直径60 mm、高15mm。
T/CHCIA 002-2022
5.2.4 有盖容器，塑料、玻璃、陶瓷或搪瓷材质，300 mm×200 mm×50 mm。
5.2.5 粘板，玻璃或塑料材质，直径约180 mm 的圆形或边长约180 mm 的正方形。
5.2.6 螨虫计数工具：计数器、解剖针、毛笔。
5.2.7 试管、烧瓶等实验室常用器具。
5.2.8 天平，精度为0.0001 g。
5.2.9 白油凡士林混合物，1:1(质量比)。
5.2.10 滤纸。
5.3 试验螨虫
5.3.1 螨虫种类
试验螨虫采用活动状态正常的粉尘螨的成螨或/和若螨。
注：供试验的螨虫，日常可以用啤酒酵母、面粉和鱼粉等成分混合制成、经灭菌处理的粉末状饲料(粒度直径小于 0.1 mm) 培养。
5.3.2 标识
对每次试验螨虫应标注如下信息：
a) 供应螨虫的机构名称;
b) 螨虫的名称和编号;
c) 螨虫的批号;
d) 保存螨虫的贮藏日期;
e) 保存螨虫的实验室编号。
5.4 试样准备
剪取60 mm 直径的滤纸，平铺于60 mm×15mm 规格的培养皿内，对不同状态试样分别按下述方 法进行准备：
a) 液体试样：取200μL 均匀滴加于滤纸上，保证滤纸均匀浸湿;
b) 凝胶状或霜状试样：取200 mg 试样，用小毛刷均匀涂抹于滤纸上;
c) 喷雾试样：取一玻璃试管，将喷嘴置入试管口内按压10次(按压到最大量程),测得试管内 液体的毫升数除以10,得喷雾每次按压量。根据按压量决定喷雾次数，将喷入培养皿内滤纸 的液体量控制在200μL~250μL 之间。
d) 浓缩试样或粉剂：按照说明书要求稀释后，取200 μL 滴加于滤纸上。
5.5 试验步骤
5.5.1 驱避法
5.5.1.1取7个培养皿，将一个培养皿放在粘板中央为中心培养皿，其余6个培养皿围绕中心培养皿成 花瓣状均匀放置，并在每个培养皿之间的边缘处用相同宽度的透明胶带粘住(起到桥梁作用)。然 后将7个培养皿固定在粘板上(图1)。
5.5.1.2在外围的6个培养皿内，分别间隔地放入试样和对照样，试样加入相应量的样品，对照样不加 任何物质。将试样均匀、平整、紧密地铺放于培养皿的底部，并在试样和对照样的中央放入0.05g 螨虫饲料。
5.5.1.3在中心培养皿上放入(2000±200)只存活的螨虫(成螨或/和若螨)。
5.5.1.4将已放入试验螨虫和饲料的粘板组合件，置于恒温恒湿培养箱中，温度为(25±2)℃,相对湿 度(75±5)%。
5.5.1.5培养24h 后，用解剖镜或体式显微镜观察并采用适当的方法计数试样培养皿内和对照样培养皿 内存活的螨数。
培养皿
粘板
对照样
试 样
螨虫 对照样
试样
图1 驱避法装置图
5.5.2 抑制法
5.5.2.1 在6个培养皿内分别放入3个试样和3个对照样，将试样均匀、平整、紧密地铺放于培养皿的底 部，并在试样上均匀地分散放入0.05g 螨虫饲料。
5.5.2.2 向6个培养皿中各放入150只存活的螨虫(成螨或/和若螨)。
5.5.2.3 将6个培养皿分别放在容器盒内，培养皿之间的距离大于10 mm (图 2 ) 。
5.5.2.4 盖上容器盒的上盖，将容器盒置于恒温恒湿培养箱中，温度为(25±2)℃,相对湿度为(75±5)%。
5.5.2.5 根据需要培养7d 、14 d 、28d或42d 后，用解剖镜或体式显微镜观察并记录培养皿内存活的 螨虫数(包括成螨或若螨)。
5.5.2.6 如果任意对照样培养皿内存活的螨虫数量少于150只(幼螨、若螨和成螨总数),重新进行全 部的试验。
试样 对照样 试样
培养皿
对照样 试样 对照样
粘板
图2抑制法装置图
5.5.3 杀灭法
5.5.3.1 取4个培养皿，底部放置滤纸，其中3个按使用方法放入试样。另一个培养皿不放试样作为空 白对照。每个培养皿内壁上缘均匀涂抹白油凡士林混合物。
5.5.3.2 每个培养皿中心放入200只螨虫(成螨或/和若螨),30 min 时在培养皿中心放入螨虫饲料0.05 g, 之后将培养皿置于温度为(25±2)℃,相对湿度为(75±5)%的培养箱内。
5.5.3.324 h 后检查并记录死亡螨虫数。
5.5.3.4 如果对照样螨虫死亡数量少于10只不需要校正;当对照样螨虫死亡数量介于10～40只时，需 用校正公式进行校正;当对照样螨虫死亡数量大于40只，重新进行实验。
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6 结果计算
6.1 螨虫驱避法和抑制法
根据采用的试验，按式(1)或式(2)计算，结果以百分数表示，保留两位小数。
式中：
Q-—驱避率，%;
Y-— 抑制率，%;
B-- 三个对照样存活螨虫数的平均值;
T-— 三个试样存活螨虫数的平均值。
以驱避率或抑制率的计算值作为结果，当计算值为负数时，表示为“0%”;当计算值>99%时， 表示“>99%”。
6.2 螨虫杀灭法
杀螨率按式(3)计算，结果以百分数表示，保留两位小数。
式中：
P-- 杀螨率，%;
R-— 试样组死亡螨虫数;
N——试验螨虫数。
当对照组螨虫死亡率<5%无需校正;当对照组螨虫死亡率位于5%~20%之间按公式(4)计算校 正死亡率，以百分数表示;当对照组螨虫死亡率>20%,实验重新进行。
………
………
… … …(2)
式中：
P+-—校正杀螨率，%;
Py-— 试样组杀螨率，%;
Px-— 对照组杀螨率，%。
7 结果评价
7.1 驱避法驱螨效果评价
驱避法驱螨效果评价见表1。
表1驱避法效果评价
7.2 抑制法抑螨效果评价
抑制法抑螨效果评价见表2。
表2抑制法效果评价
7.3 杀灭法杀螨效果评价
杀灭法杀螨效果评价见表3。
表3杀灭法效果评价
8 试验报告
试验报告应包括下列内容：
a) 试验是按本文件进行的;
b) 试样和对照样的描述;
c) 试样的预处理;
d) 试验螨虫的来源和编号;
e) 试验条件;
f) 试验方法;
g) 试验结果评价;
h) 试验人员和试验日期;
i) 任何偏离本文件的情况。
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