T/CVMA 356—2026
引 言
猪球虫病(swine coccidiosis)是由囊等孢属的猪囊等孢球虫(Cystoisosporasuis)和艾美耳属的蒂氏艾美耳球虫(Eimeria debliecki)、新蒂氏艾美耳球虫(Eimeria neodebliecki)、极细艾美耳球虫(Eimeria perminuta)、光滑艾美耳球虫(Eimeriapolita)、豚艾美耳球虫(Eimeria porci)、粗糙艾美耳球虫(Eimeria scabra)、有刺艾美耳球虫(Eimeria spinosa)和猪艾美耳球虫(Eimeria suis)等寄生于猪肠道所引起的一种肠道原虫病，广泛分布于全球各地。临床上以腹泻为主要症状，主要影响年龄较小的猪只，尤其是在哺乳期和断奶后不久的仔猪容易受到感染。感染后常引起仔猪腹泻、排黄色至灰色稀粪、脱水、消瘦，其中猪囊等孢球虫对哺乳仔猪的危害最为严重，仔猪感染猪囊等孢球虫治疗不及时会导致仔猪死亡或僵猪的出现。随着我国生猪规模化养殖日渐普遍，新生仔猪腹泻问题也日益突出，严重制约养猪生产的效益。本病在预防和治疗用药方面的成本较高，每年可高达 1 亿美元以上，给养猪业造成严重的经济损失。本标准主要介绍猪球虫病的临床诊断、实验室诊断和防治措施，以期为猪球虫病的防控提供参考。
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猪球虫病诊断和防治技术规范
1 范围
本文件规范了猪球虫病的术语和定义、临床症状、病理变化、诊断方法和防治等技术要求。
本文件适用于猪球虫病的诊断、流行病学调查、检疫和防治。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 36195 畜禽粪便无害化处理技术规范
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
猪球虫病 swine coccidios is
由囊等孢属的猪囊等孢球虫(Cystoisosporasuis)和艾美耳属的蒂氏艾美耳球虫(Eimeriadebliecki)、新蒂氏艾美耳球虫(Eimeria neodebliecki)、极细艾美耳球虫(Eimeria perminuta)、光滑艾美耳球虫(Eimeriapolita)、豚艾美耳球虫(Eimeria porci)、粗糙艾美耳球虫(Eimeria scabra)、有刺艾美耳球虫(Eimeria spinosa)和猪艾美耳球虫(Eimeria suis)等寄生于猪肠道所引起的一种肠道原虫病。
3.2
每克粪便卵囊数 oocysts per gram
一种用于评估动物肠道中球虫感染强度的指标。
3.3
休药期 withdrawal time
动物从停止给药到许可屠宰或动物的乳、蛋等产品许可上市的间隔时间。
3.4
抗球虫药 anticoccidial drug
应用药物驱除、杀灭宿主动物体内的球虫。
4 临床诊断
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4.1 流行特点
4.1.1 传染源与传播方式
成年猪呈带虫状态，尤其是母猪，常成为一窝仔猪感染发病的传染源。病原体未孢子化卵囊(unsporulatedoocyst)可随粪便排出体外，在外界环境中发育成为具有感染性的孢子化卵囊(sporulated oocyst)，仔猪食入孢子化卵囊即可感染。
4.1.2 发病季节
一年四季均可发病，夏季、秋季和潮湿的饲养环境多发。
4.1.3 易感动物
各年龄、品种、性别的猪均可感染，临床上5 ~ 10日龄仔猪最为易感。成年猪感染一般无明显临床症状，多呈带虫状态。
4.2 临床症状
4.2.1 急性型
多发于哺乳仔猪，其粪便初始时松软或呈糊状，病情加重后呈液状。病猪因剧烈腹泻迅速脱水，表现为精神沉郁、皮肤弹性丧失、眼窝凹陷，严重者可在数日内因电解质紊乱或衰竭死亡，尤其是未及时治疗的仔猪死亡率较高。
4.2.2 慢性型
多发生于成年猪或度过急性期的存活仔猪，无明显症状，但长期存在消化吸收障碍，生长速度明显减缓，体型瘦弱，被毛粗乱，皮肤灰白，缺乏弹性;轻度发热、精神沉郁、食欲减退、消化不良、生长发育缓慢，严重消瘦，体重几乎不增加;喜卧，弓背站立，可持续2 ~ 3天。部分病例因肠道损伤持续，易继发细菌或病毒感染，导致反复腹泻，饲料利用率低下，免疫机能受损，最终影响群体均匀度和整体生产性能。
4.3 病理变化
患病仔猪病变主要见于空肠和回肠，肠黏膜上常有黄色纤维性、坏死性假膜覆盖在充血的黏膜上，肠上皮细胞坏死并脱落。肠道内乳糜消化不良，恶臭。
4.4 结果判定
凡出现4.2的临床症状和/或符合4.3的病理变化特征，可判定为猪球虫病疑似病例。
5 实验室诊断
5.1 试剂
饱和氯化钠溶液、2.5 %重铬酸钾溶液(除非另有说明，检测中所用试剂均为分析纯，配制方法分别按照附录A，配制用水符合GB/T6682三级水要求)。
5.2 材料
样品保存袋、记号笔、防水标签纸、60目和100目铜丝网或尼龙网、100 mL量筒。
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5.3 试剂
50 mL烧杯、50 mL离心管、10 mL玻璃瓶、吸管、镊子。
5.4 耗材
天平、离心机、麦氏计数板、载玻片和盖玻片、显微镜。
5.5 样品采集、运输和保存
5.5.1 采集
直肠采样法采集猪新鲜粪便100 g以上，放入灭菌样品保存袋中，用记号笔标注样品编号、采集时间、地点。
5.5.2 运输
将样品保存袋放在装有冰袋的泡沫盒中低温运输。
5.5.3 保存
将样品送达实验室后放置于4 ℃保存。
5.6 定性检查
对于有临床症状或疑似球虫感染的动物，采用以下方法进行球虫的定性检查：
a) 将被检样品的新鲜粪便充分搅匀后取10 g ，放入50 mL烧杯中，加入适量蒸馏水。
b) 轻轻搅匀，经60目铜丝网或尼龙网过滤第一次，用少量蒸馏水冲洗3 ~5次滤网;滤液再经100目铜丝网或尼龙网过滤第二次，用少量蒸馏水冲洗3 ~5次滤网。
c) 将滤液移入50 mL离心管，1500 ×g离心10min ，倾去上清液。
d) 沉淀物中加入少量饱和盐水，混匀，将管内的混悬液移入10 mL离心管。
e) 用饱和盐水加满离心管且液面凸起微高于管口，盖上盖玻片静置10min。
f) 取下盖玻片，将有液体的一面盖在载玻片上。
g) 置载玻片于显微镜载物台上，用10×或40×的物镜进行检查，观察整个盖玻片内所有视野。
5.7 结果判定
5.7.1 阳性
发现球虫卵囊，判为猪球虫感染阳性。将球虫阳性粪样置于2.5 %重铬酸钾溶液中，在25 ℃ ~ 28 ℃环境中培养至孢子化卵囊后，参见附录B球虫卵囊形态特征，确定球虫种属。
5.7.2 阴性
未发现球虫卵囊，需按照5.6重复检查5次，仍未见球虫卵囊，该粪样可判为阴性。
5.8 定量检查
对于球虫定性检查中呈阳性的粪样，按以下方法进行球虫卵囊数的定量检查：
a) 每份粪样取3个重复，每个重复取10g放入50 mL烧杯，按照5.6中b) ~ c)的步骤进行操作。
b) 将沉淀物用少量饱和盐水搅匀，移入100 mL量杯，加饱和盐水至60 mL处，充分混匀。
c) 用吸管吸取液面混悬液注满麦氏计数板的2个计数室，静置5min。
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d) 将麦氏计数板置于显微镜下检查，用10×的倍数数出每个计数室(1cm×1 cm×0.15 cm =0.15 cm3 )内的所有卵囊数，将两个计数室的卵囊数之和除以2即得卵囊平均值。对压线的卵囊，按左、上压线计，右、下压线不计处理。根据每个重复的卵囊平均值，计算出三个重复的平均值A。
e) 对于卵囊数较少的粪样，其卵囊数计算，按照公式(1)进行计算：
OPG=(A/0.15)×60/10 =A×40 (1)
式中：
OPG——每克粪便卵囊数;
A——三个重复的卵囊平均值。
f) 对于卵囊数较多的粪样，其卵囊数计算，可在60 mL总体积的基础上，用饱和盐水再稀释B倍计数，按照公式(2)进行计算：
OPG=A×40×B (2)
式中：
OPG——每克粪便卵囊数;
A——三个重复的卵囊平均值;
B——稀释倍数。
5.9 定量检查的判定
5.9.1 严重感染
如OPG>1× 105 ，判为严重感染。
5.9.2 中度感染
如1×104 ≤OPG≤1×105 ，判为中度感染。
5.9.3 轻度感染
如OPG<1× 104 ，判为轻度感染。
6 球虫病综合判定
6.1 疑似
凡符合4.2的临床症状和/或符合4.3的病理变化特征，可判定为球虫病疑似病例。
6.2 阴性
凡未出现4.2的临床症状、未出现4.3的病理变化特征，且粪便定性检查结果满足5.7.2时，可判定为球虫病阴性。
6.3 阳性
凡符合4.2的临床症状和/或符合4.3的病理变化特征，且粪便定性检查结果满足5.7.1和/或粪便定量检查结果满足5.9中5.9.1 、5.9.2或5.9.3时，可判定为球虫病阳性病例。
7 防治措施
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7.1 严格执行卫生制度
7.1.1 粪便、病死牲畜无害化处理
成年猪多为带虫者，故在有球虫病流行的猪场，圈舍内应及时清理粪便，按照GB/T 36195中相关要求进行堆积发酵无害化处理。病死畜按照《病死及病害动物无害化处理技术规范》进行处理。
7.1.2 圈舍消毒
圈舍应每天清扫并及时清理粪便。用3 % ~ 5 %热碱水浸泡栏舍地面和墙面，强效碘、百菌消、强力消毒灵、二氧化氯等消毒液进行两次消毒，最后用火焰消毒。
7.1.3 管理措施
禁止其他圈舍的饲养人员和其他动物进入产房，以防止其携带的卵囊传入产房;灭鼠以防止鼠类机械传播卵囊;每周用杀虫剂喷洒井窖、明沟、灌木丛以杀灭蚊蝇和蜱虫等。
7.2 定期监测
随机抽取每个群体中成年猪总数的15 %、仔猪总数的25 %，采集粪便进行定性检测，抽检频率：春季、秋季45 d/次，夏季每30 d/次，冬季1 ~ 2次即可。若定性检测为球虫感染阳性的样品，则进行定量检测，判定标准参照5.9，若抽检群体平均OPG值<500个/g，无临床球虫病发病史，且生长发育良好，则不需要药物预防，反之需要给药治疗。
7.3 药物防治
按照《中华人民共和国兽药典》《饲料药物添加剂使用规范》规定使用药物。严格执行说明书休药期规定，最短不少于14 d。母猪产前和产后15 d内在饲料中拌加抗球虫药。
7.4 用药后监测感染率
7.4.1 用药
应实行全群给药。
7.4.2 感染率监测
用药一周后采集被投药猪的粪便进行实验室定量检测，若用药后球虫卵囊比用药前明显减少，判定药物有效;若用药后球虫卵囊与用药前比无明显变化或增多，则需要换药再次给药。
7.5 预防性用药
哺乳仔猪3 ~ 5日龄时，口服托曲珠利，用量按20 mg/kg体重，仅口服一次。
7.6 治疗性用药
7.6.1 托曲珠利
口服，按20 mg/kg体重给药或市售5 %托曲珠利悬液按照0.4 mL/kg体重给药，给药一次即可。
7.6.2 配合用药
临床上可结合止泻、强心和补液等对症治疗措施。
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8 记录
做好防治记录，内容包括防治数量、用药种类、使用剂量、无害化处理、管理措施，建立发病及防治档案。
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附 录 A
(资料性)
球虫卵囊检测试剂及其配制方法
A.1 饱和氯化钠溶液配制
称取400 g食盐，放入三角烧瓶中，加入1000 mL水，加热烧瓶至沸腾，充分搅拌后冷却至室温，有少量盐析出，即为饱和盐水，密度约1.18g/cm3。
A.2 2.5 %重铬酸钾溶液配制
称取25 g重铬酸钾固体，放入1L烧瓶中，加入沸水至1000 mL刻度处，充分搅拌使重铬酸钾完全溶解后，冷却至室温，即为2.5%重铬酸钾溶液。
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附 录 B
(资料性)
猪球虫病卵囊形态特征图
猪球虫病中常见卵囊及其基本形态见图 B.1。其中 1 为猪囊等孢球虫(Cytoisosporasuis) ，2 为蒂氏艾美耳球虫(Eimeria debliecki) ，3 为新蒂氏艾美耳球虫(Eimeria neodebliecki) ，4 为极细艾美耳球虫
(Eimeria perminuta) ，5 为光滑艾美耳球虫(Eimeriapolita) ，6 为豚艾美尔球虫(Eimeria porci) ，7 为粗糙艾美耳球虫(Eimeria scabra) ，8 为有刺艾美耳球虫(Eimeria spinosa) ，9 为猪艾美耳球虫(Eimeria suis)。
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图 B.1 猪球虫孢子化卵囊模式图
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