SN/T 5770-2025 犀牛角及其制品鉴定技术规范

　　中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T 5770—2025

犀牛角及其制品鉴定技术规范

Identification protocol for rhino horn

and its derived products

2025-07-25 发布2026-02-01 实施

中华人民共和国海关总署发 布

 

前 言

本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1 部分：标准化文件的结构和起草规则》的规

定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。

本文件起草单位：中华人民共和国深圳海关、中华人民共和国杭州海关、中华人民共和国长沙

海关、中华人民共和国南宁海关。

本文件主要起草人：秦智锋、史秀杰、于力、吴姗、禹思宇、陈立军、徐浩、凌杏园、郑晓聪、

张彩虹、张伟锋、刘新娇、刘荭、盘宝进、唐连飞。

1

犀牛角及其制品鉴定技术规范

1 范围

本文件规定了犀牛角及其制品形态学和分子生物学鉴定方法。

本文件适用于犀牛角及其制品的种属鉴定和真伪鉴定。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文

件，仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适

用于本文件。

GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法

LY/T 2501 野生动物及其产品的物种鉴定规范

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1 犀牛角rhino horn

犀牛角为犀科动物印度犀牛、爪哇犀牛、苏门答腊犀牛、黑犀牛和白犀牛长在头部的角，起源

于真皮，实心角质。

3.2 犀牛角制品 rhino horn derived products

由整根或部分犀角经雕刻、抛光、成型等工艺加工(全部和部分)而成的物件。

3.3 印度犀Indian rhinoceros

独角犀属，学名Rhinoceros unicornis，独角，亚洲犀。

3.4 爪哇犀 Java rhinoceros

独角犀属，学名Rhinoceros sondaicus，独角，亚洲犀。

3.5 苏门答腊犀 Sumatran rhinoceros

双角犀属，学名 Dicerorhinus sumatrensis，双角，亚洲犀。

3.6 非洲黑犀 Black rhinoceros

黑犀属，学名Diceros bicornis，双角，非洲犀。

2

3.7 非洲白犀White rhinoceros

白犀属，学名Ceratotherium simum，双角，非洲犀。

3.8 鱼籽纹 Circular pores with sub pore

犀牛角横断面上密布的“芝麻点”，是犀牛角圆柱形丝状纤维的断面，中间有洼陷的芯孔，也称

为“鱼籽”或“粟米”，“鱼籽”连成的纹路称为“鱼籽纹”，凹凸不平(参见附录A)。

3.9 竹丝纹 Tubular (filamentous) structure

犀牛角纵剖面上的近乎平行的细丝纹，由角蛋白构成的犀牛角圆柱形丝状纤维纵向排列形成，

也称为“竹丝纹”(参见附录A)。

4 缩略语

下列缩略语适用于本文件：

DNA ：Deoxyribonucleic acid，脱氧核糖核酸。

PCR ：Polymerase chain reaction，聚合酶链式反应。

Cyt b ：Cytochrome b，线粒体细胞色素b 基因片段。

5 试剂和材料

以下所用的试剂除特别注明者外均为分析纯，所用的水为双蒸水或去离子水，应符合GB/T 6682

所规定一级水的要求。所有涉及分子生物学操作的水均为无DNA 酶、无RNA 酶水。

5.1 DNA 提取试剂盒。

5.2 PCR 扩增试剂盒。

5.3 TBE 电泳缓冲液(见附录B)。

5.4 琼脂糖(电泳级)。

5.5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA)溶液。

5.6 十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)(见附录B)。

5.7 DNA 分子量标准品(100 bp~2000 bp)。

5.8 溴化乙锭(EB)或其替代核酸染液。

5.9 蛋白酶K。

5.10 次氯酸钠。

5.11 无水乙醇。

5.12 三氯甲烷氯仿。

5.13 PCR 反应管：200 μL。

5.14 Eppendorf 离心管：1.5 mL。

5.15 带滤芯吸头(10 μL、20 μL、200 μL、1 000 μL)。

6 仪器和设备

6.1 PCR 仪。

6.2 电泳仪。

6.3 凝胶成像系统。

3

6.4 遗传分析仪。

6.5 荧光核酸蛋白定量仪。

6.6 水浴锅。

6.7 台式高速冷冻离心机。

6.8 体视显微镜。

6.9 电子天平：精度1 mg。

6.10 涡旋振荡器。

6.11 打磨和粉碎工具(电钻、电锯、钢锉、铁砂轮和粉碎机等)。

7 鉴定一般原则

7.1 鉴定工作应符合标准LY/T 2501 中的野生动物产品鉴定规范。

7.2 犀牛角典型形态特征完整、明确的，直接采用形态学方法进行鉴定。

7.3 形态学方法无法确定的，结合分子生物学方法进行综合鉴定。

8 鉴定方法

8.1 物理学鉴定方法

8.1.1 取适量检材或其粉末，在酒精灯火焰上焙烤或燃烧，或浸泡于沸水中，或置于掌心，双手用

力磨搓，闻其气味。

8.1.2 焙烤或燃烧产生麻油香味，手搓以及沸水浸泡产生淡淡的清香气。

8.2 形态学鉴定方法

8.2.1 观察检材颜色、形状、弯曲方向、有无凹沟、凸起、小孔(沙眼)及刚毛等外形特征。将检

材的横截面仔细磨平，清洗干净，置于放大镜或者体视显微镜下，用反射光观察磨平横截面和纵剖面

的结构特征。

8.2.2 犀牛角角质、实心，角后弯，色乌，横截面内部色浅，但中心色深。角正前面下1/3 ～ 1/2 处

有一纵向凹沟(天沟)，对应天沟一侧具一纵向凸起岗棱(地岗);角体表面上部光滑，下1/3 处有扎

手的刚毛(非洲犀)。犀角底盘基部周边具矩形块状突起(亚洲犀)，底面有凹入，密布“沙眼”(亚

洲犀)。犀牛角横断面上分布密集的“鱼籽纹”，放大观察“鱼籽”中间有洼陷的芯孔;纵剖面可见纵

向紧密排列的“竹丝纹”(参见附录A)。

8.3 分子生物学检测方法

8.3.1 检材处理和核酸提取

8.3.1.1 检材前处理

先10 % 次氯酸钠(5.10)擦拭检材表面，去离子水冲洗干净，再用无水乙醇(5.11)冲洗后室

温干燥，最后紫外灯照射样本表面30 min。

8.3.1.2 核酸提取样品制备

根据检材实际情况，尽量选取带有“鱼籽纹”或“竹丝纹”的部位，用电钻、电锯、钢锉、铁砂

轮或粉碎机等工具磨/ 钻取或粉碎制取检材粉末50 mg ～ 200 mg，作为核酸提取样品。

4

8.3.1.3 样品核酸提取

采用CTAB 法提取样品核酸，设提取对照。加入0.75 mL CTAB(5.6)提取缓冲液、20 μL 蛋白酶

K(5.9)，65ºC 温浴消化2 h ～ 3 h，期间不时将样品取出振荡。12 000 g 离心15 min，上清液转移至一

新的离心管(5.14)。加入等体积的氯仿(5.12)，充分混匀，12 000 g 离心15 min，上清液转移至一新

的离心管。加入0.6 体积的异丙醇、0.1 体积乙酸钾溶液，轻柔颠倒混合，室温放置20 min。12 000 g

离心15 min，弃上清液，加入500 μL 70% 乙醇溶液，颠倒混合数次。12 000 g 离心10 min，弃上清液，

加入50 μL~100 μL TE 缓冲液溶解核酸。提取的核酸样品可直接用于PCR 扩增或-20ºC 保存备用。

也可采用等效的DNA 提取试剂盒(5.1)提取样品DNA，操作按试剂盒说明书执行。

8.3.1.4 DNA 纯度浓度测定

用荧光核酸蛋白定量仪对核酸样品中的DNA 进行准确定量，DNA 浓度应不低于10 pg/μL。

8.3.2 PCR 扩增检测

8.3.2.1 PCR 检测方法

8.3.2.1.1 PCR 扩增引物

用常规PCR 方法对核酸样品中的线粒体Cyt b 基因片段进行扩增，扩增产物直接送测序。

PCR 扩增引物序列见表1。

表1 PCR 扩增引物序列

引物名称引物序列(5’-3’) 靶标扩增片段长度

Rhinocero-F AACATCCGTAAATCYCACCCA

Cyt b 274 bp

Rhinocero-R GGCAGATRAARAATATGGATGCT

8.3.2.1.2 PCR 扩增反应体系

PCR 扩增反应体系见表2。

表2 PCR 扩增反应体系

PCR 扩增反应体系

反应成份

用量

μL

Rhinocero-F(10 μM) 2.5

Rhinocero-R(10 μM) 2.5

2 × Master Mix 25

Enhancer 5

DNA(≥ 200 pg) ～

H2O ～

总体积50

注1 ：反应体系中各试剂的量可根据具体情况或不同的反应总体积进行适当调整。建议采用热启动试剂。

注2 ：每个反应体系应设置两个平行反应。

注3 ：也可采用等效的PCR 扩增反应试剂盒(5.2)，操作按试剂盒说明书执行。

5

8.3.2.1.3 PCR 扩增条件

PCR 扩增执行如下程序：94ºC 预变性5 min ;94ºC 变性30 s，55ºC 退火40 s，72ºC 延伸60 s，

40 个循环;72ºC 延伸5 min，4ºC 保存。

8.3.2.2 PCR 扩增产物凝胶电泳

称取1.5 g 琼脂糖(5.4)，加入100 mL TBE 电泳缓冲液(5.3)，制备1.5% 琼脂糖凝胶(55℃～ 60℃

加入EB 或者替代核酸染液(5.8)至终浓度为0.5 μg/mL)。将5 μL PCR 扩增产物和1 μL 加样缓冲液

混合后点样。加入DNA 分子量标准品(5.7)标记以判断PCR 扩增产物大小。电压大小一般控制在3

V/cm ～ 5 V/cm，电泳时间约30 min，凝胶成像仪观察并分析保存记录。

8.3.2.3 PCR 扩增产物序列分析

扩增片段直接进行序列测定，测序结果与DNA 序列数据库(如GenBank: https://www.ncbi.nlm.

nih. gov 等)中的序列进行比对(参见附录C)。

8.3.2.4 结果判定

8.3.2.4.1 质控标准：PCR 阳性对照出现274 bp 的电泳条带，且阴性对照和空白对照无上述电泳

条带。

8.3.2.4.2 质控正常，样品PCR 未出现预期的274 bp电泳条带;重新取样重复实验，PCR 仍未出现

预期的274 bp 电泳条带，则判定为分子生物学检测阴性。

8.3.2.4.3 质控正常，样品PCR 出现274 bp的电泳条带，且该条带序列与数据库犀牛Cyt b 对应片段

序列一致性大于99%，则判定分子生物学检测结果为阳性;如果序列一致性小于99%，则判定分子

生物学检测结果为阴性。

9 综合判定

9.1 检材角质实心，具犀牛角典型物理学特征和形态学特征的，则可判定检材为犀牛角;制品角质，

具犀牛角物理学特征和特征性的“鱼籽纹”“竹丝纹”的，则可判定检材为犀牛角制品。

9.2 物理学结合形态学可直接判定为犀牛角和犀牛角制品，如果分子生物学检测结果为阳性，可根

据分子生物学检测结果直接判定检材种属(印度犀、爪哇犀、苏门答腊犀、非洲黑犀和非洲白犀);

如分子生物学检测结果为阴性，则不能判定检材到种。

9.3 物理学结合形态学无法直接判定为犀牛角和犀牛角制品，如果分子生物学检测结果为阳性，则

判定检材含犀牛成分，并可根据分子生物学检测结果直接判定检材种属(印度犀、爪哇犀、苏门答腊

犀、非洲黑犀和非洲白犀);如果分子生物学检测结果为阴性，则不能判定检材种属。

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附 录 A

(资料性)

犀牛角形态特征示意图

A.1 犀牛角的“地岗”和“天沟”(见图A.1)

(引自《常见贸易濒危物种识别指南》主编：陈凤学)

图A.1 犀牛角的“地岗”和“天沟”

A.2 犀牛角的“鱼籽纹”(见图A.2)

(引自《常见贸易濒危物种识别指南》主编：陈凤学)

图A.2 犀牛角的“鱼籽纹”

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A.3 犀牛角的“竹丝纹”(见图A.3)

(引自《常见贸易濒危物种识别指南》主编：陈凤学)

图A.3 犀牛角的“竹丝纹”

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附 录 B

(规范性)

试剂的配置

B.1 1 mol/L Tris-HCl(pH 7.5)

Tris(三羟甲基氨基甲烷) 121.1 g

ddH2O 800.0 mL

HCl 调pH 至7.5，加ddH2O 定容至1 L，121ºC 灭菌15 min 后使用。

B.2 CTAB 提取缓冲液(pH 8.0)

NaCl 81.7 g

CTAB(十六烷基三甲基溴化铵) 20.0g

1 mol/L Tris-HCl(pH 7.5) 100.0 mL

0.5 mol/L EDTA 溶液(pH 8.0)(5.5) 40 .0mL

HCl 或NaOH 调pH 至8.0，加ddH2O 定容至1 L，121ºC 灭菌15 min 后使用。

B.3 3 mol/L 乙酸钾溶液(pH 5.2)

乙酸钾 29.4 g

ddH2O 60.0 mL

冰乙酸调pH 至5.2，加ddH2O 定容至100 mL，0.22 μm 微孔滤膜过滤除菌。

B.4 TE 缓冲液(pH 8.0)

1 mol/L Tris-HCl(pH 7.5) 10.0 mL

0.5 mol/L EDTA 溶液(pH 8.0) 2.0 mL

盐酸或氢氧化钠调pH 至8.0，加ddH2O 定容至1 L，121ºC 灭菌15 min 后使用。

B.5 TBE 电泳缓冲液

B.5.1 10×TBE 储存液

Tris 碱 108.0 g

硼酸 55.0 g

0.5 mol/L EDTA 溶液(pH 8.0) 40.0 mL

加ddH2

O 定容至1 L。

B.5.2 1×TBE 电泳缓冲液

10×TBE 电泳缓冲液 100 mL

加ddH2

O 定容至1 L。

9

附 录 C

(资料性)

犀牛角PCR 扩增片段参考序列

C.1 印度犀牛Cyt b 基因片段(Cyt b，JF718877.1，274 bp)参考序列

AACATCCGTAAATCTCACCCACTAGTTAAAATCATCAACCACTCATTCATCGACCTACCTACCCCATCAAA

CATCTCATCTTGATGAAACTTTGGCTCCCTGTTAGGAATCTGCTTAATCTTACAGATCCTAACAGGACTAT

TCCTTGCCATACACTACACCCCAGACACAACAACCGCCTTTTCATCCGTCACCCATATCTGCCGAGACGTA

AATTACGGCTGAATAATTCGCTACCTCCATGCCAACGGAGCATCCATATTCTTCATCTGCC

C.2 爪哇犀牛Cyt b 基因片段(Cyt b，AJ245725.1，274 bp)参考序列

AACATTCGCAAATCTCACCCATTAATCAAAATTATTAACCATTCATTCATCGACCTACCTACCCCATCAAA

CATTTCATCTTGATGAAACTTTAGCTCCCTATTAGGAATCTGCTTAATCTTACAGATCCTGACAGGACTAT

TCCTTGCCATACACTACACCCCAGACACAACAACTGCCTTTTCATCCGTAGCCCATATCTGCCGAGACGTA

AATTACGGCTGAATAATTCGCTACCTCCATGCCAACGGAGCATCCATATTCTTCATCTGCC

C.3 苏门答腊犀牛Cyt b 基因片段(Cyt b，MF066642.1，274 bp)参考序列

AACATCCGCAAATCCCACCCACTAATCAAAATTATCAACCACTCATTTATCGACCTGCCTACCCCATCAA

ACATTTCATCCTGATGAAACTTTGGCTCCCTACTAGGAATCTGCCTAATCTTACAAATCCTAACCGGACTA

TTCCTCGCAATACATTACACACCAGATACAACAACCGCCTTCTCATCCGTAGCCCACATCTGTCGAGACGT

AAACTACGGTTGAATTATCCGCTACACCCATGCCAACGGAGCATCCATATTCTTCATCTGCC

C.4 非洲黑犀牛Cyt b 基因片段(Cyt b，FJ905814.1，274 bp)参考序列

AACATCCGTAAATCCCACCCACTAATCAAAATTATCAATCACTCATTCATCGACCTACCCACCCCATCAA

ACATTTCAGCCTGATGAAATTTTGGCTCCCTACTAGGAATCTGCCTAATCCTACAAATCCTAACCGGACTA

TTTCTTGCCATACATTACACACCAGATACAACAACTGCCTTCTCATCTGTTGCCCACATCTGTCGAGACGT

AAACTACGGCTGAATTATCCGCTACCTACACGCTAACGGAGCATCCATATTCTTTATCTGCC

C.5 非洲白犀牛Cyt b 基因片段(Cyt b，JF718874.1，274 bp)参考序列

AACATCCGTAAATCCCACCCACTAATCAAAATTATCAACCACTCATTCATCGATCTGCCCACCCCATCAA

ACATCTCAGCCTGGTGAAATTTTGGCTCCCTGCTAGGAATCTGCTTAATCTTACAAATTCTAACCGGACTA

TTCCTTGCCATACACTACACACCAGACACAATAACTGCCTTCTCATCTGTCGCCCATATCTGTCGAGACGT

GAATTACGGCTGAATTATCCGCTATCTCCATGCCAACGGAGCATCCATATTCTTTATCTGCC

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参 考 文 献

[1] Kyle M. Ewart, Greta J. Frankham, and Ross McEwing et al. An internationally standardized species

identification test for use on suspected seized rhinoceros horn in the illegal wildlife trade, Forensic Science

International: Genetics, 2018,32:33-39.

[2] Hsing-Mei Hsieh, Li-Hung Huang, Li-Chin Tsai et al. Species identification of rhinoceros horns using

the cytochrome b gene, Forensic Science International, 2003,136:1-11.