NY/T 4510-2025 月季霜霉病抗性鉴定技术规程 ,该文件为pdf格式 ,请用户放心下载!
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资源简介
NY/T 4510-2025《月季霜霉病抗性鉴定技术规程》的核心内容总结：
一、范围与适用性
- 规定了月季（Rosa spp.）种质对霜霉病（病原菌 Peronospora sparsa）的抗性鉴定方法和程序。
- 适用于室内人工接种鉴定，涵盖设施设备、病原体制备、鉴定方法、病情调查、抗性评价及材料处理。
二、关键术语定义
- 月季霜霉病：由蔷薇霜霉菌（Peronospora sparsa）引起的卵菌病害，危害叶片、嫩梢等，病斑呈黄褐色，湿度高时叶背可见灰白色霉层。
- 病情指数（DI）：综合发病率和严重度的量化指标，计算公式：
DI=U×S∑(Fi×Ui)×100- Fi：病情级别（0/1/3/5/7/9）；
- Ui：对应病情级别的植株/叶片数；
- U：调查总数；
- S：最高病情级值（取9）。
- 病原物接种体：用于接种的病原繁殖体（如孢子悬浮液）。
三、设施与材料要求
- 设施：隔离温室、恒温培养箱（温控1–35℃）、灭菌锅、超净工作台、显微镜等。
- 耗材：灭菌培养皿、移液器、血球计数板、保鲜膜等。
- 鉴定材料：
- 组培苗：苗高≥20cm，茎节≥5个，复叶≥4片（炼苗80–90天）。
- 扦插苗：苗高≥25cm，要求同组培苗。
- 离体叶片：中上部健康叶，表面消毒后使用。
四、病原体制备流程
- 采集与鉴定：
- 采集典型病叶，显微镜下形态学鉴定，经科赫氏法则验证。
- 纯化与繁殖：
- 病叶冲洗后黑暗保湿培养（18±2℃），光照诱导孢子囊产生。
- 孢子囊用灭菌毛笔刷取，制成孢子悬浮液（浓度：1–1.5×10⁴个/mL）。
- 感病品种扩繁：针刺叶片后滴接种液，保湿培养5–7天。
- 保存：
- 短期：活体接种感病寄主保存；
- 长期：病叶加10%甘油液氮冻存。
五、鉴定方法
- 环境控制：
- 温度14–20℃，湿度≥80%，离体叶片需黑暗24小时后每日光照14小时。
- 对照设置：
- 抗病对照：安吉拉、卡罗拉；
- 感病对照：心相印、梦露等（附录B）。
- 空白对照：无菌水替代接种液。
- 接种方法：
- 植株喷雾法：喷至叶尖滴水，套袋保湿3–6天。
- 离体叶片液滴法：每叶滴15–20μL孢子液，保鲜膜密封。
六、病情调查与抗性评价
- 调查时间：
- 植株接种后4–6天，离体叶片3–4天（根据感病对照发病调整）。
- 病情分级标准：
类型 病情级别 症状描述 幼苗 0级 无症状 1级 病叶≤10% 9级 病叶＞75%，叶片枯落 叶片 0级 无症状 9级 病斑＞60%或枯死 （详见标准表1、表2） - 抗性评价标准：
病情指数（DI） 抗性级别 0.00 免疫（I） 0.01–5.00 高抗（HR） 5.01–10.00 抗病（R） 10.01–20.00 中抗（MR） 20.01–40.00 中感（MS） ＞40.00 高感（HS） - 有效性要求：感病对照DI＞20.00，抗病对照符合预期。
- 复检规则：
- 初次鉴定为抗病（R/MR）需复检；
- 两次结果不一致时第三次鉴定，以最高DI或多数结果为准。
七、鉴定后处理
- 所有病株、病叶无害化处理；
- 带病菌基质需130℃蒸汽灭菌30分钟。
八、附录关键信息
- 病原特征（附录A）：
- 孢子囊椭圆形（12.9–24.7μm），最适萌发温度18℃，26℃以上死亡。
- 传播依赖高湿环境（湿度≥80%），温室通风不良易爆发。
- 记录表格（附录C）：
包括病情分级统计表、鉴定结果原始记录表（含品种来源、接种日期等）。
总结
本标准系统规范了月季霜霉病抗性鉴定的全流程技术细节，涵盖病原体制备、标准化接种、量化病情评价及生物安全处理，为月季抗病育种和病害防控提供科学依据。核心在于通过精确的环境控制、接种浓度及分级标准，确保鉴定结果的可重复性和可靠性。
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