SN/T 5646-2024 出口植物源食品中敌螨普残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法

ICS67.050
CCS X 04
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T5646—2024
出口植物源食品中敌螨普残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
Determination of dinocap residues in foods of plant origin for export—
LC-MS/MS method
2024-12-31发布2025-07-01实施
中华人民共和国海关总署发布

前 言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1 部分:标准化文件的结构和起草规则》的规
定起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本文件起草单位:中华人民共和国青岛海关。
本文件主要起草人:汤志旭、王建华、罗忻、吕菲、刘靖靖、李馨、姜晶、王颖超
Ⅰ
SN/T5646—2024

出口植物源食品中敌螨普残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
1 范围
本文件规定了植物源食品中敌螨普残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本文件适用于韭菜、白菜、西葫芦、大蒜、苹果、柑橘、蘑菇、核桃、花生、绿豆、红茶、干辣椒的定量测
定和确证。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 6682 分析实验用水规格和试验方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 方法提要
试样用乙腈提取,提取液经分散固相萃取净化,净化液经碱水解、液液萃取、溶剂交换后液相色谱-
质谱/质谱仪检测,外标法定量。
5 试剂和材料
除另有规定外,所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 甲醇:色谱纯。
5.2 乙腈:色谱纯。
5.3 甲酸:色谱纯
5.4 正己烷: 色谱纯
5.5 乙酸铵:色谱纯。
5.6 氢氧化钠。
5.7 盐酸。
5.8 2 mmol/L乙酸胺溶液(含0.05%甲酸):称取1.54 g乙酸铵(5.5),用水溶解并转移至1 000 mL
容量瓶中,加入0.5 mL 甲酸(5.3),用水定容至刻度线。
5.9 1 moL/L氢氧化钠溶液:称量20 g氢氧化钠(5.6), 用水稀释至500 mL。
5.10 1.2 moL/L 盐酸溶液:移取50 mL 盐酸(5.7),用水稀释至500 mL。
1
SN/T5646—2024
5.11 0.5%酸化乙腈:移取2.5 mL 甲酸(5.3),用乙腈稀释至500 mL。
5.12 敌螨普标准物质,C18H24N2O6,CAS号39300-45-3,纯度≥99.0%。
5.13 标准储备液(1 000 mg/L):准确称取10 mg(精确到0.1 mg)敌螨普标准品用0.5%酸化乙腈
(5.11)溶解,配制成浓度约1 000 μg/ml标准储备液,避光-18 ℃保存,有效期12个月。
5.14 标准中间溶液(10 mg/L):吸取一定量的敌螨普标准储备溶液于10 mL容量瓶中,用甲醇(5.1)
定容至刻度线。混合标准溶液避光0 ℃~4 ℃保存,有效期1个月。
5.15 微孔滤膜(有机相):0.22 μm。
5.16 无水硫酸镁:经650 ℃灼烧4 h,置于干燥器中备用。
5.17 乙二胺-N-丙基硅烷化硅胶(PSA):40 μm~60 μm。
5.18 十八烷基硅烷键合硅胶(C18):40 μm~60 μm。
5.19 石墨化炭黑(GCB):40 μm~120 μm。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-质谱/质谱仪:配有电喷雾离子源(ESI)。
6.2 分析天平:感量0.1 mg、感量0.01 g。
6.3 组织捣碎机。
6.4 涡旋混合器。
6.5 氮气吹干仪。
6.6 离心机:转速不低于5 000 r/min。
6.7 具塞离心管:50 mL。
7 试样制备
7.1 蔬菜、水果和食用菌:
取样品500 g,对于个体较小的样品,取样后全部处理;对于个体较大的基本均匀样品,可在对称轴
或对称面上分割或切成小块后处理;对于细长、扁平或组分含量在各部分有差异的样品,可在不同部位
切取小片或截成小段后处理;取后的样品将其切碎,充分混匀,用四分法取样或直接放入组织捣碎机中
捣碎成匀浆。匀浆放入聚乙烯容器中,-18 ℃冰箱保存。
7.2 谷类样品:
取样品500 g,粉碎后使其全部可通过425 μm 的标准网筛,放入聚乙烯瓶或袋中,0 ℃~4 ℃冰箱
保存。
7.3 油料作物、茶叶、坚果和香辛料
取样品500 g,粉碎后充分混匀,放入聚乙烯瓶或袋中,0 ℃~4 ℃冰箱保存。
8 分析步骤
8.1 前处理
8.1.1 蔬菜、水果和食用菌
称取10 g(精确至0.01 g)试样,置于50 mL离心管(6.7)中,加入10 mL乙腈,4 g硫酸镁、1 g 氯
2
SN/T5646—2024
化钠、1 g柠檬酸钠、0.5 g柠檬酸二钠振荡提取1 min后4 200 r/min离心5 min。吸取6 mL 上清液,
颜色较浅的试样加到内含900 mg硫酸镁及150 mg PSA 的15 mL离心管中;对于颜色较深的试样,加
到内含885 mg硫酸镁、150 mg PSA 及15 mg GCB的15 mL离心管中,涡旋混匀1 min,4 200 r/min
离心5 min。吸取2 mL 上清液40 ℃水浴中氮气吹干,用2 mL 甲醇溶解供水解反应。
8.1.2 谷物、油料和坚果
称取5 g试样(精确至0.01 g)于50 mL 离心管(6.7)中,加10 mL水涡旋混匀,静置30 min。加入
15 mL乙腈溶液(5.2)、6 g无水硫酸镁、1.5 g醋酸钠,盖上离心管盖,振荡1 min后4 200 r/min离心
5 min。吸取8 mL上清液加到内含1 200 mg硫酸镁、400 mg PSA 及400 mg C18 的15 mL离心管中,
涡旋混匀1 min。4 200 r/min离心5 min,准确吸取3 mL上清液于10 mL试管中,40 ℃水浴中氮气吹
至近干,加入2 mL甲醇复溶,过微孔滤膜(5.15),用于水解。
8.1.3 茶叶和香辛料
液相色谱参考条件如下:
称取2 g 试样(精确至0.01 g)于50 mL 离心管(6.7)中,加10 mL 水涡旋混匀,静置30 min。加入
15 mL乙腈溶液(5.2)、6 g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠,盖上离心管盖,振荡1 min后4 200 r/min离心
5 min。吸取8 mL 上清液加到内含1 200 mg 硫酸镁、400 mg PSA、400 mg C18 及200 mg GCB 的
15 mL 离心管中,涡旋混匀1 min。4 200 r/min 离心5 min,准确吸取3 mL 上清液于10 mL 试管中,
40 ℃ 水浴中氮气吹至近干,加入2 mL甲醇复溶,过微孔滤膜(5.15),用于水解。
8.2 水解反应
提取液中加入10 mL氢氧化钠溶液(5.9),振荡1 min,室温放置30 min,加入10 mL 盐酸溶液
(5.10)后立即用20 mL 正己烷(5.4)振荡提取30 s,5 000 r/min 离心5 min,取2 mL 正己烷,氮气吹
干,甲醇溶剂转换后,用1 mL甲醇(5.1)定容,过微孔滤膜(5.15),用于测定。
8.3 仪器参考条件
8.3.1 液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下:
a) 色谱柱:Proshellcore C18,100 mm × 2.1 mm,粒径2.7 μm,或相当者;
b) 流动相:A 为2 mmol/L乙酸铵含0.05%甲酸溶液,B为甲醇,梯度洗脱程序见表1;
c) 流速:0.4 mL/min;
d) 柱温:35 ℃;
e) 进样体积:5 μL。
表1 梯度洗脱程序
时间/min A/% B/%
0 90 10
0.5 90 10
5.0 10 90
10.0 10 90
10.5 90 10
15.0 20 80
3
SN/T5646—2024
8.3.2 质谱参考条件
质谱参考条件如下:
a) 离子源:电喷雾离子源;
b) 扫描方式:负离子扫描;
c) 电喷雾电压:4 500 V;
d) 离子源温度:450 ℃;
e) 气帘气:30 psi;
f) 加热辅助气:50 psi;
g) 其他质谱参考参数见表2。
表2 敌螨普水解产物的质谱参数
化合物母离子子离子去簇电压/V 能量/eV
敌螨普水解产物295.1 208.9* -80 -43
295.1 162.9 -80 -46
注: 对于不同质谱仪器,仪器参数可能存在差异,测定前应将质谱参数优化到最佳。
*
离子对为定量离子对。
8.4 标准工作曲线
移取2 mL标准中间溶液(5.14)加入10 mL氢氧化钠溶液(5.9),振荡1 min,室温放置30 min,加
入10 mL盐酸溶液后用20 mL正己烷提取,过微孔滤膜(5.16),取1 mL上清液,氮气吹干,甲醇溶剂
转换后,用甲醇定容至1 mL。根据需要配制成0.000 mg/L、0.002 mg/L、0.005 mg/L、0.01 mg/L、
0.02 mg/L、0.05 mg/L 的水解标准工作溶液,应现用现配。按参考色谱和质谱条件测定。以目标化合
物质量浓度为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数。
8.5 测定
8.5.1 定性测定
按照上述液相色谱-质谱/质谱条件测定样品和标准工作溶液,如果样品中的质量色谱峰保留时间
与标准品保留时间相差不超过±2.5%,定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准工作溶液的相对丰度
一致,相对丰度允许偏差不超过表3规定的范围,则可判断样品中存在对应的被测物。
表3 定性测定时相对离子丰度的最大至允许偏差
相对离子丰度/% >50 >20~50(含) >10~20(含) ≤10
允许相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50
8.5.2 定量测定
根据试样中被测物的含量,选择浓度相近的标准工作溶液,待测物的响应值应在仪器检测的线性范
围内,如果待测物含量超过标准曲线范围,应当稀释到标准曲线范围内进行检测。上述仪器条件下,标
准溶液的多反应监测(MRM)色谱图和保留时间参见附录A 中图A.1~图A.2。
4
SN/T5646—2024
8.5.3 空白试验
除不加试样外,均按上述操作步骤进行。
9 结果计算
试样中敌螨普的含量用色谱数据处理软件或按公式(1)计算获得,计算结果保留两位有效数字,当
结果大于1 mg/kg时保留三位有效数字:
X =A ×c×V
As×m …………………………( 1 )
式中:
X ———试样中被测组分的含量,单位为毫克每千克(mg/kg);
A ———试样溶液中被测组分的峰面积;
As———标准工作溶液中被测组分的峰面积;
c ———标准工作溶液中被测组分的质量浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
m ———最终样液所代表的试样质量,单位为克(g);
V ———样液最终定容体积,单位为毫升(mL);
注: 敌螨普水解产物为4个色谱峰,被测组分的峰面积为色谱峰面积之和。
10 检出限
本方法的检出限为0.005 mg/kg。
11 定量限
本方法的定量限:蔬菜、水果及食用菌为0.01 mg/kg;谷物、坚果为0.02 mg/kg;茶叶及调味料为
0.05 mg/kg。
12 精密度
在重复性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
在再现性条件下,获得的2次独立测试结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。
5
SN/T5646—2024
附 录 A
(资料性)
标准物质多反应监测色谱图
图A.1 敌螨普水解产物多反应监测色谱图(295.1>162.9)
图A.2 敌螨普水解产物多反应监测色谱图(295.1>208.9)
6
SN/T5646—2024