ICS65.020.20CCS B39
T/ZJSYJ
团体标准
T/ZJSYJ0002-2025
香菇液体菌种工厂化制棒技术规程
Technical Specification for IndustrialProduction of Shiitake(Xianggu)Spawn Blocks with Liquid Spawn
2025-12-22发布
2026-01-01实施
浙江省食用菌协会发布 T/ZJSYJ 0002-2025
前
本标准按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则
言
第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。
请注意本标准的某些内容可能涉及专利。本标准的发布机构不承担识别专利的责任。
本标准由浙江省食用菌协会提出并组织实施。
本标准起草单位：浙农科(武义)农业产业发展研究院有限公司、浙江省农业科学院、浙江省农业技术推广中心、武义县经济特产技术推广站、龙泉市菇源自动化设备有限公司。
本标准主要起草人：潘祖华、金群力、周海涌、陈礼威、何思逸、傅军卫、陈青、陆中华、周树东、蔡为明、王晓、施礼、吕秋实、吴杭波、范丽军、杨振华、王青青、乔涛涛、杨文杰。
本标准为首次发布。
工 T/ZJSYJ 0002-2025
香菇液体菌种工厂化制棒技术规程
1范围
本标准规定了香菇液体菌种工厂化制棒的术语和定义、生产条件、培养基质、工艺流程、液体菌种生产、菌棒工厂化生产及生产档案。
本标准适用于香菇液体菌种工厂化制棒。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准;不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本标准。
GB 150压力容器
GB3095环境空气质量标准
GB/T4789.28 食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
GB/T5483天然石膏
GB5749 生活饮用水卫生标准
GB/T12728食用菌术语
GB19170香菇菌种
GB/T 30768食品包装用纸与塑料复合膜、袋
GB50073洁净厂房设计规范
NY/T119 饲料用小麦麸
NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程
NY/T1935 食用菌栽培基质质量安全要求
NY/T2375食用菌生产技术规范
NY/T3415香菇菌棒工厂化生产技术规范
DB33/T1327 香菇工厂化生产技术规程
3术语和定义
3.1
3.2
3.3
3.4
GB/T12728、GB19170、NY/T3415和DB33/T1327界定的以及下列术语和定义适用于本标准。摇瓶菌种(一级种)
原始母种活化后，在三角瓶内培养的第一代液体菌种。
原种罐菌种(二级种)
一级种转接至小型专用罐内扩大培养的第二代液体菌种。
栽培种罐菌种(三级种)
一级或二级种接入栽培种罐工业化培养的生产用液体菌种。
长菌棒液体菌种接种工艺 按无菌接种要求，采用集自动传输、打孔、液体菌种灌注、自动套袋等功能于一体的长菌棒高效接种工艺。
3.5
接种量 T/ZJSYJ0002-2025
接入培养基、料棒内的液体菌种数量或比例。
4生产条件
4.1场地要求
环境洁净，周围无空气、水源、土壤的污染源，给排水及供电方便，场地环境应符合GB 3095与NY/T528的规定。
4.2厂区布局
设室外堆料场、仓库、搅拌区、装袋区、灭菌区、冷却区、接种区(含摇瓶菌种培养室、原种罐与栽培种罐菌种培养室)、菌棒培养区等，各功能区彼此独立又相互衔接，并做到人流与物流分离、有菌区与无菌区隔离。
厂区布局应符合NY/T 528、NY/T 2375与NY/T 3415的要求，其中冷却区、接种区按GB50073的要求建造。
4.3设施设备
配备与菌棒培养区规模相适宜的液体菌种培养基配制室、摇瓶菌种培养室、培养罐菌种培养室，及超净工作台、生化培养箱、抽滤瓶或三角瓶、培养罐、磁力搅拌器或摇床、空气压缩机、压缩空气储气罐及空气过滤系统、水处理设备、自动/半自动装袋机、环保蒸汽锅炉、高压蒸汽灭菌器、液体菌种接种机、培养环境控制系统等设施设备，压力容器应符合GB150的要求。空气过滤系统包括冷冻干燥机、吸附式干燥机、空气过滤器、恒温机等。供电不稳地区，应配备备用电源(发电机)。
5培养基质
5.1液体菌种基质
马铃薯、麸皮、玉米粉、面粉、豆粕粉等原辅料要求新鲜、无虫、无霉、无异味，无有毒有害物质。
麸皮、玉米粉、豆粕粉等物料需经细粉碎，颗粒大小80目～100目，麸皮、玉米粉等原料应符合NY/T1935的规定。生产用水应符合GB5749的规定。
5.2料棒基质
杂木屑、麸皮等原辅料要求新鲜、无虫、无霉、无异味，无有毒有害物质，杂木屑宜选不含芳香类抑菌物质的阔叶硬质树种加工。生产用水应符合GB5749的规定，石膏应符合GB/T5483的规定，麦麸应符合NY/T119的规定，其他原料应符合NY/T1935的规定。
6工艺流程
香菇液体菌种工厂化制棒工艺流程见图1。
图1香菇液体菌种工厂化制棒工艺流程图
7液体菌种生产
7.1品种选择
宜选用优质、高产、抗逆性强、商品性好且种性稳定的香菇品种，应从具备菌种生产经营资质的主体购买。引进菌种需进行适应性出菇试验验证。
7.2母种生产
母种配方及生产操作流程应符合NY/T 528的要求。保存菌种需经活化和验证后使用，母种质量应符合GB 19170的规定。
7.3摇瓶菌种生产
7.3.1培养基配方
推荐培养基配方见附录A.1.1。
7.3.2培养基配制
按液体培养基配方配制，装入摇瓶中，混合均匀，装液量为摇瓶容量的30%~40%。
7.3.3灭菌
将分装好的摇瓶放入灭菌锅内，蒸汽压力升至0.1 MPa～0.12 MPa,恒压维持25 min～30 min。
7.3.4冷却
灭菌结束后，摇瓶冷却至28℃以下待用。
7.3.5接种
在无菌条件下，用接种针挑取20～25块绿豆大小(1～2)mm×(1～3)mm的母种块迅速转接于摇瓶内。
7.3.6培养
接种后，搅拌或振荡培养，培养室温度控制23℃~25℃,搅拌培养转速300 r/min～700r/min,振荡培养转速120 r/min～150 r/min, 培养8d～10d。 7.3.7菌种质量要求
培养液澄清透明、无异味;镜检无杂菌、菌丝形态正常;菌丝体密集，不低于整个培养液80%。
7.4原种罐与栽培种罐菌种生产
7.4.1罐体检查与空消
罐体初次使用、出现杂菌、长期闲置、更换品种等情况出现其一时，应检查罐体阀件等各部位有无泄漏情况，并空消。蒸气压力0.11 MPa～0.12 MPa,121℃~123℃,维持40 min。
7.4.2培养基配方
推荐培养基配方见附录A.1.2。
7.4.3投料
用水将配方原料搅拌均匀加入罐体，装液量为罐体容量的70%～80%,同时加入0.03%～0.05%消泡剂，通入空气搅拌1min～2min, 混合均匀，拧紧上料口盖，气密性检查通过后开始灭菌。
7.4.4灭菌
罐体内培养基灭菌蒸气压力0.11 MPa～0.12 MPa,121℃~123℃,灭菌过程保持排气阀微开，500L以下的中小型罐维持40 min～60 min,500L～1000L罐维持90 min～120min。空气过滤器灭菌要求维持20 min～30 min,期间需进行间隙性排水，管路要求同步灭菌。
7.4.5冷却
灭菌结束后，关闭蒸汽进气阀，同时缓慢打开罐体培养液内层排气阀进行降压，待压力接近零时及时向培养层内通入无菌空气，并始终维持罐压0.03 MPa～0.05 MPa,防止负压倒吸空气导致培养液污染。排管或夹层内通入冷水降温，待培养液温度降至25℃以下时，停止降温。
7.4.6接种
将摇瓶和罐体接种管口表面用酒精消毒，接种口套上火焰圈，调节进排气阀，维持罐压至0.01 MPa~0.02 MPa。在火焰保护下，全开接种阀，将摇瓶菌种注入培养罐，关闭接种阀，撤除火焰圈，调节罐压0.03MPa～0.05MPa。建议接种量：摇瓶菌种接原种罐0.5%～1.5%,原种罐菌种接栽培种罐5%～10%。
7.4.7培养
培养温度控制在23℃~25℃,根据菌丝生长情况，适时调节进气阀和排气阀，维持罐压0.03 MPa~
0.05 MPa, 培养6d～8d。
7.4.8菌种检测
7.4.8.1感官检验
观测菌丝形态、色泽、气味、菌丝量等，通过显微镜观察菌丝体锁状联合等显微形态。
7.4.8.2霉菌检验
按照无菌操作从取样阀取少量培养液，接种于GB/T4789.28中规定的PDA培养基中，置于28℃~30℃恒温培养48h,采用显微镜和感官观察菌丝生长状况及有无杂菌污染。若出现白色以外的杂色者，或有异味者为霉菌污染物，必要时进行水封片镜检。
7.4.8.3细菌检验
按照无菌操作从取样阀取少量疑有细菌污染的培养液，接种于GB/T4789.28中规定的营养肉汤培养液中，置于28℃~30℃恒温培养24h～48h, 观察培养液是否浑浊。培养液浑浊，为有细菌污染;培养液澄清，为无细菌污染。
7.4.8.4酸碱度测定 取样用pH计或pH试纸测定菌液酸碱度。
7.4.8.5菌丝湿重测定
称取10mL的培养液，经3000 r/min～4000 r/min 离心10 min～20min, 倒出上清液，称量菌丝湿重。
7.4.8.6抽样检测
接种前1d～2d对料液进行取样检查，检测形态、色泽、气味、菌液比，必要时进行显微镜检。
7.4.9原种罐和栽培种罐菌种质量要求
液体菌种质量要求见表1。
表1液体菌种质量要求
项 目 要求
感官指标 菌液状态 菌丝片段均匀悬浮于液体中，不分层，菌液体积比达80%以上，菌球大小适宜。 菌液色泽 澄清透明呈浅黄色，菌丝球或菌丝片段呈白色或灰白色。 菌液气味 罐体排气口有香菇培养液特有的香气，无酸、臭等异味。 显微形态 菌丝健壮，无空泡，有明显锁状联合，无杂菌。 理化指标 菌液pH值3.5～4.5;菌丝湿重0.1 g/mL～0.2g/mL。 8菌棒工厂化生产
8.1料棒制作
8.1.1培养料配制
8.1.1.1配方
推荐培养料配方见附录A.2。
8.1.1.2拌料
根据计划生产数量和配方称取各原辅料，按照木屑、麦麸、木屑、麦麸、白糖、石膏的顺序将称重后的各种原辅料倒入搅拌机内，在未加水前充分拌匀10 min～15min。干料搅拌均匀后，加水充分拌匀后使含水量达到52%～57%,pH值6.0～6.5。
8.1.2装袋
8.1.2.1装袋机械
根据企业生产规模，定制集自动拌料、自动分料、自动套袋、装袋扎口、料棒收集等功能于一体的全自动装袋流水线。
8.1.2.2栽培袋
外袋宜选用15cm×55 cm或17 cm×58 cm规格的聚乙烯折角筒袋，应符合GB/T30768的规定;内袋宜选用15cm×50cm或17 cm×53 cm规格的免割保水膜袋，应符合NY/T1935的规定。选用栽培袋需与装袋机套筒、培养架等设施相匹配。
8.1.2.3质量要求
应用液体菌种接种的料棒含水量原则上比常规料棒少0.1kg/棒，即筒袋规格15cm×55cm的料棒重1.9kg～2kg/ 棒;17 cm×58cm 的料棒重2.8kg～2.9kg/棒。采用高压蒸汽灭菌，料棒需打孔贴透气膜。 8.1.3灭菌
建议采用微压、高压灭菌，微压蒸汽灭菌料温宜4h内升至105℃~110℃,保持8h～10h; 高压蒸汽灭菌料温宜4h内升至118℃~121℃,保持3h～4h, 灭菌器内温度降到70℃以下出料。料棒制作完成后应及时灭菌，在灭菌器(柜)排尽冷空气并达到相应温度时开始计时。
8.1.4冷却
料棒在预冷室降温至60℃~65℃后，移入事先已清洁的强冷室，6h～8h后，表面温度降到20℃(料温22℃~26℃)为宜。
8.2菌棒生产
8.2.1接种
8.2.1.1准备工作
接种前对接种室进行彻底清洁、消毒，室内温度调至18℃~22℃,湿度70%以下。接种人员应更换工作服及鞋帽进入接种室，用75%酒精擦拭双手消毒。
8.2.1.2操作方法
采用长菌棒液体菌种接种工艺进行接种，“打孔—接种—套袋”一体化自动化操作，每棒5穴～6穴，接种量15mL/穴～20 mL/穴。
8.2.2发菌培养
8.2.2.1培养室
培养室应干净、干燥、通风、避光，使用前1d～2d进行清洁消毒处理。
8.2.2.2环境调控
培养室温度控制24℃~26℃,菌棒中心温度不超过26℃;空气相对湿度60%～65%、CO₂浓度低于3000 ppm。
8.2.2.3发菌检查
菌棒培养7d后，检查萌发定植及发菌情况，发现污染及时拣出进行无害化处理。
8.2.3增氧管理
菌棒培养10d～15d,菌圈直径达6 cm～8cm时脱去套袋;菌丝满棒时间25d～30 d,满棒后10d左 右，使用刺孔机进行刺孔增氧，每棒刺孔45个～60个。
8.2.4转色后熟
菌棒刺孔后排放至培养架上，间距2cm～3cm, 控制温度22℃~24℃、空气相对湿度70%～80%、CO₂浓度低于1600 ppm。
8.2.5菌棒质量要求
菌棒质量要求见表2。
表2菌棒质量要求
指标 要求 菌龄 不同品种(菌株)应达到其说明书中要求的菌龄。 外观 菌棒瘤状体分布均匀，转色占菌棒85%左右，呈茶褐色虎斑状且带有白点。 表2菌棒质量要求(续)
T/ZJSYJ 0002-2025
指标 要求 手感 有弹性，无生硬感，不断棒。 气味 具有香菇菌丝特有的香味，无异味。
8.2.6菌棒检测方法
菌棒检测方法见表3。
表3菌棒检测方法
方法 要求 镜检 以每一培养罐液体菌种生产的菌棒为1批次。随机抽取每批次生产菌棒5～10棒进行镜检，菌丝粗壮、洁白，锁状联合明显。 催蕾试验 菌棒抽样在适宜的环境条件下进行催蕾处理，5d～7d后正常现蕾。 抽样检查 随机抽取1/1000菌棒，肉眼观察无杂菌及病虫害。 9生产档案
母种、摇瓶菌种、原种罐菌种、栽培种罐菌种及菌棒生产的每个环节都要有详实的记录，记录内容见附录B。生产记录归档保存2年以上。 附录A
(资料性)
培养基配方
A.1液体菌种培养基配方
A.1.1摇瓶菌种
配方1:马铃薯250.0g、玉米粉1.0 g、葡萄糖25.0g、蛋白胨2.0 g、酵母浸膏6.0g、磷酸二氢钾3.0 g、硫酸镁1.5g、消泡剂0.2 mL, 水1000 mL,pH6.0～6.5;
配方2:豆粕粉20.0g、马铃薯淀粉10.0 g、葡萄糖30.0g、磷酸二氢钾3.0 g、硫酸镁1.5g、维生素B15.0mg、消泡剂0.2 mL, 水1000 mL,pH 6.0～6.5。
A.1.2原种罐与栽培种罐菌种
配方1:麸皮5.0 g、面粉5.0g、玉米粉3.0g、酵母浸膏2.0 g、白砂糖18.0 g、羧甲基纤维素钠0.8 g、磷酸二氢钾1.0 g、硫酸镁0.5g, 水1000 mL,pH 6.0～6.5;
配方2:豆粕粉10.0g(磨浆)玉米粉10.0g(磨浆)、麦麸10.0g(磨浆)、葡萄糖20.0 g、酵母膏4.0g、磷酸二氢钾1.0g、硫酸镁0.5g, 水1000 mL,pH 6.0～6.5。
A.2 菌棒培养基配方
杂木屑78%、麦麸20%、白糖1%、石膏(或碳酸钙1%。根据不同品种可适当优化调整。 附录B
(资料性)
生产档案记录事项
表B.1给出了液体菌种生产记录表。
表B.1液体菌种生产记录
母种生产记录 品种名称 接种日期 培养温度(℃) 操作人员 菌种来源 发满日期 使用日期 生产编号 培养基配方 摇瓶菌种生产记录 生产日期 培养基配方 操作人员 料液灭菌 冷却起止时间 摇床振荡转速(r/min)
时间 开始 接种起止时间 磁拌器转速(r/min) 保压 试管母种块数量 培养起止时间 结束 培养温度(℃) 保温压力(MPa) 料液pH值 灭菌前： 灭菌后： 生产编号 菌种质量 培养液是否澄清透明();有无异味();菌丝形态是否正常();菌丝
体密集度(%);pH( )。 原种罐菌种生产记录 生产日期 培养基配方 操作人员 料液灭菌 冷却起止时间 维持罐压(MPa)
时间 开始 接种起止时间 培养起止时间 保压保温 接种量(%) 结束 培养温度(℃) 保温压力(MPa) 料液pH值 灭菌前： 灭菌
后： 生产编号 菌种质量 ①菌液状态(),菌液比(%);②菌液色泽()
③菌液气味 ( );④显微形态( );⑤pH( ) 栽培种罐菌种生产记录 生产日期 培养基配方 操作人员 料液灭菌 冷却起止时间 维持罐压(MPa)
时间 开始 接种起止时间 培养起止时间 保压 接种量(%) 结束 培养温度(℃) 保温压力(MPa) 料液pH值 灭菌前： 灭菌后： 生产编号 菌种质量 ①菌液状态( ),菌液比( %);②菌液色泽()
③菌液气味( );④显微形态();⑤pH( )
表B.2 给出了菌棒工厂化生产记录表。
表B.2菌棒工厂化生产记录表
装袋记录 生产编号
培养基配方 负责人 生产日期 装袋起止时间 单袋湿料重(kg) pH 筒袋规格(cm) 数量(袋) 备注 灭菌记录 送气时间 保温时间 保温压力(MPa) 保温温度(℃) 停气时间 出料时间 冷却起止时间 负责人 接种记录 接种日期 品种名称 液体菌种生产编号 菌料pH 接种室消毒时间 接种起止时间 液体菌种数量(L) 负责人 接种菌棒数(棒) 菌棒批次编号 备注 菌棒培养记录
发菌管理 培养室温度
(℃) 菌丝萌发日期 脱去套袋日期 菌丝满棒日期 瘤状体初现
日期 刺孔增氧
日期 刺孔数量
(个) 杂菌污染菌棒数
(棒)
后熟管理 菌棒转色初始期 培养室温度
(℃) 菌棒成熟
日期 污染菌棒数
(棒) 成熟菌棒
质量 瘤状体分布是否均匀( );转色占菌棒
比例( %);手感有无弹性( )。 菌棒批次编号 菌龄(d) 菌棒成品数
(棒) 负责人 备注 菌棒出库记录 出库日期 经手人 客户名称 联系电话 菌棒批次编号 出库数量
(棒) 客户地址
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