T/CVMA 234-2025 大熊猫输血前交叉配血试验技术规范 ,该文件为pdf格式 ,请用户放心下载!
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资源简介
《大熊猫输血前交叉配血试验技术规范》(T/CVMA 234-2025)主要内容总结
1. 范围
本文件规定了大熊猫输血前交叉配血试验的样本和材料要求、操作方法及结果判定标准,适用于大熊猫输血前的交叉配血操作及结果判定。
2. 规范性引用文件
无直接引用文件,但遵循GB/T 1.1-2020的起草规则。
3. 术语和定义
- 凝集(Agglutination):抗体与红细胞抗原结合形成的肉眼可见凝集团块。
- 滴(Drop):1滴≈50μl,可用50μl替代。
- 红细胞悬液(RBC Suspension):2%~5%浓度的红细胞生理盐水悬液。
- 交叉配血试验(Cross-matching Test):检测供血者与受血者血液相容性,分主侧(供血红细胞+受血血清)和次侧(供血血清+受血红细胞)试验。
- 盐水/抗球蛋白/聚凝胺介质交叉配血:分别用于检测天然抗体、IgG类抗体及非直接凝集抗体。
- 细胞扣(Cell Clot):离心后黏附于试管底的红细胞团。
- 压积红细胞(Hematocrit):离心后去除上清液的红细胞层。
4. 样本、试剂、材料与设备
- 样本要求:EDTA抗凝或非抗凝全血,4℃保存≤72小时。
- 样本制备:
- 压积红细胞:1000g离心1分钟,去除上清。
- 红细胞悬液:洗涤压积红细胞3次后配制成2%~5%浓度。
- 血清:非抗凝全血凝固后离心(1000g, 5分钟),避免溶血或浑浊。
- 试剂与设备:生理盐水、离心机、恒温水浴箱、显微镜、微柱凝胶卡等。
5. 操作方法
5.1 主侧交叉配血(受血血清+供血红细胞)
- 盐水介质:检测天然抗体,阴性时需进一步试验。
- 抗球蛋白介质:检测IgG类抗体,37℃孵育30分钟后洗涤加抗球蛋白试剂。
- 聚凝胺介质:检测非直接凝集抗体,需低离子介质和重悬液步骤。
5.2 次侧交叉配血(供血血清+受血红细胞)
方法与主侧类似,分盐水、抗球蛋白、聚凝胺三种介质。
通用要求:
- 对照设置:需设自身对照和阳性对照。
- 特殊处理:冷/温抗体需4℃或37℃孵育(≤30分钟)。
- 局限性:盐水法可能漏检IgG抗体,聚凝胺法易受药物干扰。
6. 结果判定
- 试管法:
- 判读标准:轻摇后观察凝块脱落情况(表1),分0(阴性)至++++(强阳性)。
- 溶血或显微镜下不规则凝集:判为阳性。
- 微柱凝胶卡法:按厂商标准判读。
7. 特殊情况与注意事项
- 自身对照阳性:需排除干扰(如自身抗体、药物影响)后重试。
- 聚凝胺法失效:可能因肝素等药物或多凝集细胞导致。
- 操作误差:轻柔摇动试管避免假阳性/阴性,建议平行试验。
8. 附录与补充说明
- 表1 凝集强度判读:详细描述从0(无凝集)到++++(单一凝块)的肉眼和显微镜特征。
- 红细胞悬液浓度计算:压积红细胞体积×0.9后稀释,允许一定误差。
文件意义
本规范为大熊猫输血安全提供了标准化操作流程,涵盖样本处理、多种配血方法及结果判读,确保输血相容性检测的准确性和可重复性,同时提示不同方法的局限性及应对措施。
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