YY/T 1961-2025 运动神经元存活基因(SMN)检测试剂盒

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资源简介

  ICS11.100.10

CCS C44

中华人民共和国医药行业标准

YY/T1961—2025

运动神经元存活基因(SMN)检测试剂盒

Survivalmotorneurongene(SMN)detectionkit

2025-06-18发布2026-07-01实施

国家药品监督管理局发布

目 次

前言………………………………………………………………………………………………………… Ⅲ

1 范围……………………………………………………………………………………………………… 1

2 规范性引用文件………………………………………………………………………………………… 1

3 术语和定义……………………………………………………………………………………………… 1

4 要求……………………………………………………………………………………………………… 1

5 试验方法………………………………………………………………………………………………… 3

6 标识、标签和使用说明…………………………………………………………………………………… 3

7 包装、运输、贮存………………………………………………………………………………………… 3

参考文献……………………………………………………………………………………………………… 5

YY/T1961—2025

前 言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

请 注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由国家药品监督管理局提出。

本文件由全国医用临床检验实验室和体外诊断系统标准化技术委员会(SAC/TC136)归口。

本文件起草单位:中国食品药品检定研究院、深圳华大基因股份有限公司、江苏省医疗器械检验所、

菁良科技(深圳)有限公司、广州市达瑞生物技术股份有限公司、亚能生物技术(深圳)有限公司、深圳会

众生物技术有限公司、苏州天隆生物科技有限公司、上海五色石医学科技有限公司、江苏硕世生物科技

股份有限公司、北京阅微基因技术股份有限公司、厦门百欧迅生物科技有限公司。

本文件主要起草人:孙楠、向嘉乐、张小燕、李菁华、杨旭、雷淑英、杨勇贤、王小舟、李明阳、张蓉、

王春芳、陈琼娥、曲守方、于婷。

YY/T1961—2025

运动神经元存活基因(SMN)检测试剂盒

1 范围

本文件规定了运动神经元存活基因(SMN)检测试剂盒的要求、标识、标签和使用说明以及包装、运

输、贮存,描述了相应的试验方法。

本文件适用于荧光定量PCR法、PCR-荧光探针法、荧光PCR-毛细管电泳法、荧光PCR 熔解曲线

法建立的检测试剂盒。

2 规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文

件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于

本文件。

GB/T191 包装储运图示标志

GB/T29791.2 体外诊断医疗器械 制造商提供的信息(标示) 第2部分:专业用体外诊断试剂

3 术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

运动神经元存活基因1 survivalmotorneurongene1;SMN1

脊髓性肌萎缩症(spinalmuscularatrophy,SMA)的致病基因,定位于5q13.2,其编码的全长SMN

蛋白在各组织细胞广泛表达,参与剪接体蛋白复合体的组装,是真核细胞生物生存所必需的管家蛋白。

注:SMN1双等位基因发生致病性变异通常导致SMA发生,95%的SMA患者存在SMN1基因7号外显子的纯合

缺失,且基因型-表型关联明确。

3.2

运动神经元存活基因2 survivalmotorneurongene2;SMN2

脊髓性肌萎缩症的修饰基因,定位于5q13.2,编码与SMN1相同的SMN 蛋白。

注:SMN2与SMN1序列高度同源,仅存在5个碱基差异,其中在第7外显子第6位c.840的C/T,导致90%的

SMN2mRNA外显子7被选择性剪接,仅有10%的SMN2表达全长有功能SMN 蛋白。患者携带SMN2拷贝

数越多,表型越轻。

3.3

SMN1-SMN2基因转换 SMN1-SMN2geneconversion

SMN1和SMN2基因融合产生了含有SMN1外显子7序列和SMN2外显子8序列的融合基因。

4 要求

4.1 外观

制造商应规定试剂盒的外观要求。

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4.2 阳性符合率

检测国家阳性参考品或企业阳性参考品,检测结果应均为相应基因型别。

阳性参考品的设置需遵循以下原则:

a) 包括SMN1基因0拷贝、1拷贝、2拷贝参考品;

b) 包括SMN2基因0拷贝、1拷贝、2拷贝或>2拷贝参考品(适用于SMN2基因检测);

c) 包括7外显子缺失基因型、7和8外显子缺失基因型(适用于7和8外显子检测)。

注1:在正常等位基因中,将携带1个SMN基因拷贝定义为1拷贝,将携带2个SMN基因拷贝定义为2拷贝;在致

病等位基因中,将携带SMN缺失或因转换导致SMN缺失定义为0拷贝。

注2:7外显子为SMN1基因或SMN2基因外显子7;8外显子为SMN1基因或SMN2基因外显子8。

4.3 阴性符合率

检测国家阴性参考品或企业阴性参考品,检测结果应均为相应基因型别或阴性。

阴性参考品的设置需遵循以下原则:

a) SMN1:SMN2拷贝数比例,SMN1至少包括0拷贝、1拷贝,且SMN2基因至少≥3拷贝(仅适

用于SMN1基因检测);

b) 包括非人类基因组样本;

c) 包括SMN1-SMN2基因转换参考品。

4.4 检出限

检测浓度不高于10ng/μL的国家或企业检出限参考品,结果应均为相应基因型别。

检出限参考品的设置需遵循以下原则:

a) 包括SMN1基因0拷贝、1拷贝、2拷贝参考品;

b) 包括SMN2基因0拷贝、1拷贝、2拷贝或>2拷贝参考品(适用于SMN2基因检测);

c) 包括7外显子缺失基因型、7和8外显子缺失基因型(适用于7和8外显子检测)。

4.5 重复性

检测重复性参考品,平行检测10次,结果应一致且要求:

a) 应为相应基因型别且各检测通道阈值循环数(Ct值)[或解链温度(Tm 值)]的变异系数

(CV,%)应不大于5.0%;

b) 对于PCR-毛细管电泳法检测原理的试剂盒,应为相应基因型别。

重复性参考品的设置需遵循以下原则:

———包括SMN1基因1拷贝、2拷贝参考品;

———包括SMN2基因1拷贝、2拷贝或>2拷贝参考品(适用于SMN2基因检测);

———包括7外显子缺失基因型、7和8外显子缺失基因型(适用于7和8外显子检测)。

4.6 稳定性

生产企业应规定产品的有效期。取到效期后一定时间内的产品检测阳性符合率、阴性符合率、检出

限、重复性,判定结果是否符合4.2~4.5的要求。

注:一般地,效期为1年时选择不超过1个月的产品,效期为半年时选择不超过半个月的产品,以此类推。但如果

超过规定时间,产品符合要求时也能接受。

2

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5 试验方法

5.1 外观

在自然光下以正常视力或矫正视力目视检查,判定结果是否符合4.1的要求。

5.2 阳性符合率

检测国家阳性参考品或企业阳性参考品,每份检测1次,判定结果是否符合4.2的要求。

5.3 阴性符合率

检测国家阴性参考品或企业阴性参考品,每份检测1次,判定结果是否符合4.3的要求。

5.4 检出限

检测国家参考品(稀释至企业声称的检出限浓度)或企业检出限参考品,每份检测1次,判定结果是

否符合4.4的要求。

5.5 重复性

检测企业重复性参考品,至少设置高、低2个浓度水平,低浓度推荐使用1.5倍~5倍检测限浓度。

可选用以下方法。

a) 各重复10次,计算检测结果的平均值(x)和标准差(SD),按照式(1)计算变异系数(CV),判定

结果是否符合4.5a)的要求。

CV=SD/x ×100% …………………………(1)

式中:

SD———10次测试结果的标准差;

x ———10次测试结果的平均值。

b) 各重复10次,判定结果是否符合4.5b)的要求。

5.6 稳定性

试剂盒按照4.6规定的条件保存后,按照5.2~5.5的方法进行检测,判定结果是否符合4.6的

要求。

6 标识、标签和使用说明

应符合GB/T29791.2的规定。

7 包装、运输、贮存

7.1 包装

包装储运图示标志应符合GB/T191的规定。包装容器应保证密封性良好,完整,无泄漏,无破损。

7.2 运输

试剂盒应按制造商的要求运输。在运输过程中,应防潮,防止重物堆压,避免阳光直射和雨雪浸

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淋,防止与酸碱物质接触,防止内外包装破损。

7.3 贮存

试剂盒应在制造商规定条件下保存。

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参 考 文 献

[1] 北京医学会医学遗传学分会,北京罕见病诊疗与保障学会.脊髓性肌萎缩症遗传学诊断专家

共识[J].中华医学杂志,2020,100(40):3130-3140.

5

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  • 本文由 发表于 2025年7月23日 11:30:50
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