T/CNHIA 20-2025 马冷冻精液生产技术规程 ,该文件为pdf格式 ,请用户放心下载!
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资源简介
《马冷冻精液生产技术规程》(T/CNHIA 202025)主要内容总结
1. 范围
- 规定了马冷冻精液生产的技术要求,包括实验室准备、采精、精液检查与处理、冷冻、检测、包装、贮存及运输。
- 适用于马冷冻精液的生产。
2. 规范性引用文件
- 引用GB/T 5458(液氮生物容器)和T/CNHIA 19(马人工授精技术规程)。
3. 术语和定义
- 稀释液:保护精子、延长存活时间及增加精液容量的液体。
- 种公马:需符合品种标准、健康无遗传疾病,并持有种公马证书。
4. 实验室准备
- 耗材与器械消毒:
- 一次性耗材需38℃恒温干燥备用。
- 采精筒(假阴道)用75%酒精消毒;玻璃/金属器械需高温烘干(150℃)。
- 仪器设置:恒温水浴锅(38℃)、显微镜载物板(38℃)。
- 稀释液配制:参见附录A(含葡萄糖、果糖、卵黄等成分)。
- 实验室消毒:紫外线消毒45分钟。
5. 采精
- 按T/CNHIA 19标准操作,确保无菌环境。
6. 精液品质检查
- 依据T/CNHIA 19进行活力、密度等检测。
7. 精液处理
- 离心:600g~800g离心10分钟,去除杂质。
- 密度测定:使用精液密度仪计算稀释液总量。
- 稀释:
- 分两阶段(第一稀释液34℃等温稀释,第二稀释液4℃平衡)。
- 避免剧烈震荡,分装至细管后编号(附录B)。
8. 精液冷冻
- 冷冻程序:
- 全自动冷冻仪从4℃降至-35℃(5℃/min),再速降至-196℃(60℃/min)。
- 液氮罐:符合GB/T 5458标准,冷冻后按编号保存。
9. 冻精检测
- 解冻:38℃~40℃水浴快速解冻。
- 质量要求:
- 解冻后活力≥0.4,畸形率≤20%,顶体完整率≥80%。
- 不合格者废弃,每批次检测备案。
10. 包装
- 在-140℃以下环境操作,同批次同马冻精集中包装。
11. 贮存
- 液氮罐专人管理,每日检查液氮量。
- 冻精始终浸入液氮,转移时暴露时间≤3秒。
- 液氮罐每年清洗一次,避免拖行或碰撞。
12. 运输
- 专人专车运输,确保液氮罐稳定,冻精浸没液氮中。
附录A(稀释液配制)
- 第一稀释液:含葡萄糖、果糖、卵黄、M199、抗生素等。
- 第二稀释液:第一稀释液+5%甘油。
- 强调无菌操作(如卵黄取自无疫病鸡蛋,酒精消毒蛋壳)。
附录B(细管编号规则)
- 四部分编码:公司代号(4位)、品种代号(2~4位)、生产日期(6位,YYMMDD)、公马护照号(9位)。
- 示例:
WLZM CKY 220608 09176996D
(万良走马养殖场-岔口驿马-2022年6月8日-公马ID)。
核心要点
- 严格无菌操作:从采精到贮存全程消毒。
- 精准温控:稀释、冷冻、解冻均需特定温度曲线。
- 质量控制:解冻后活力≥0.4,畸形率≤20%。
- 可追溯性:细管编号确保批次与公马信息关联。
- 安全贮存运输:液氮环境管理是关键。
该标准系统规范了马冻精生产全流程,注重细节(如离心转速随马龄调整)、科学性强(分阶段稀释),并强调数据记录与质量把控。
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