NY/T 4457-2025 水稻细菌性穗枯病抗性鉴定技术规程

《NY/T 4457-2025 水稻细菌性穗枯病抗性鉴定技术规程》是中华人民共和国农业农村部发布的农业行业标准，详细规定了水稻对细菌性穗枯病的抗性鉴定技术流程和评价方法。以下是主要内容总结：

​1. 范围与规范性引用文件​

• ​适用范围​：适用于水稻资源、品种和品系等材料对细菌性穗枯病（由颖壳伯克氏菌引起）的抗性鉴定和评价。
• ​引用标准​：包括种子质量（GB 4404.1）、肥料使用（NY/T 496）、农药安全（NY/T 1276）及水稻生产规范（NY/T 4248）等。

​2. 术语定义​

• ​水稻细菌性穗枯病​：由颖壳伯克氏菌（Burkholderia glumae）引起，主要危害幼苗和谷穗，导致烂秧、谷粒变色和穗枯死。

​3. 鉴定程序​

鉴定流程分为6个阶段，如图1所示：

​4. 接种体准备​

• ​菌株选择​：优先选用当地优势菌株（附录A提供参考菌株）。
• ​制备方法​：从冻存菌株转接NA液体培养基（含氨苄青霉素），37℃震荡培养至OD600为0.2～0.3，稀释后加入吐温-20作为接种体。

​5. 鉴定材料种植​

• ​田间要求​：选择病害常发田，土地平整、排灌方便。
• ​种子质量​：符合GB 4404.1一级种标准，无检疫性病虫。
• ​种植设计​：每份材料种植4行×6丛，行距20 cm、丛距16 cm，3次重复，每50份材料设抗/感病对照（附录B）。
• ​保护行​：四周种植2行以上抗病品种。
• ​田间管理​：按常规生产进行，禁用杀菌剂。

​6. 接种方法​

• ​时期​：30%～40%穗抽出时，于16:00～18:00接种。
• ​操作​：喷雾法（菌液OD600=0.2～0.3，含0.01%吐温-20），隔1天喷1次，共3次，每重复接种≥20株。
• ​水层管理​：接种前后保持2～3 cm水层。

​7. 病情调查与评价​

• ​调查时间​：接种后21天。
• ​病情分级​：按病粒比率分为0～9级（表1），计算病情指数（DI）：
  DI=M×Md​∑(Bi​×Bd​)​×100
• ​抗性评价​：根据DI分为高抗（HR）至高感（HS）6级（表2）。
• ​有效性判别​：感病对照DI＞60时鉴定有效。
• ​重复鉴定​：抗/中抗材料需2～3年重复验证。

​8. 附录内容​

• ​附录A​：颖壳伯克氏菌的生物学特性、症状及分离鉴定方法（含PCR引物序列和保存条件）。
• ​附录B​：5个鉴别品种（如特青为抗病，松早香1号为高感）。
• ​附录C​：记录表（表C.1病粒率调查表、表C.2抗性评价表）。

​9. 其他要求​

• ​材料处理​：剩余接种体需灭菌，病株需焚烧或深埋。
• ​记录保存​：全过程档案（病原菌来源、接种方法等）保存≥2年。

​关键点总结​

1. ​标准化流程​：从接种体制备到抗性评价形成完整技术链。
2. ​严格对照​：设置抗/感病对照确保鉴定可靠性。
3. ​分子鉴定支持​：附录A提供菌株分子鉴定方法，增强科学性。
4. ​可追溯性​：详细记录要求保障结果可复核。

该标准为水稻抗病育种和品种推广提供了权威的技术依据。