NY/T 4476-2025 大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程

大豆抗疫霉根腐病鉴定技术规程（NY/T 4476-2025）主要内容总结

一、标准概述

该标准是由吉林省农业科学院起草，农业农村部种植业管理司提出并归口的农业行业标准，规定了大豆抗疫霉根腐病的人工接种鉴定技术规程，适用于大豆品种/种质对疫霉根腐病抗性的鉴定及评价。

二、核心术语定义

1. ​大豆疫霉根腐病​：由大豆疫霉(Phytophthora sojae)侵染引起的病害，导致根或茎基部腐烂、叶片黄化萎蔫甚至植株死亡。
2. ​抗病性鉴定​：通过技术方法评估大豆对疫霉根腐病的抵抗水平。
3. ​接种体​：用于接种的病原物或其部分。

三、鉴定程序流程

鉴定程序分为四个阶段：

1. ​试验条件及材料准备​
2. ​接种​
3. ​调查​
4. ​抗性评价​

四、关键技术要求

1. 试验条件

• ​环境要求​：在可控温室或大棚中进行
• ​参数控制​：
  • 温度：20℃～30℃（出苗前25-30℃，出苗后20-25℃）
  • 相对湿度：75%～90%
  • 光照度：2000lx~2500lx

2. 菌种管理

• ​来源​：选用代表性菌株，非疫区使用需主管部门许可
• ​保存方法​：
  • 短期（1-2个月）：10-17℃冰箱保存于CA培养基
  • 长期：液氮保存

3. 试验材料种植

• ​容器​：无菌土营养钵（直径10-15cm，高10cm）
• ​种植规格​：
  • 每材料15钵（3次重复×5钵）
  • 每钵保苗3株，共45株
• ​对照设置​：以"九农21"作为感病对照

4. 接种技术

• ​接种时期​：真叶完全展开时
• ​接种方法​：下胚轴伤口接种法
  • 在子叶节下方1cm处划1cm长伤口（深度≤茎径1/3）
  • 贴附5mm×5mm菌丝块（CA培养基培养6-7天的菌落前缘）
  • 25℃黑暗保湿48小时

五、调查与评价标准

1. 病情调查

• ​调查时间​：接种后4-6天
• ​计算方法​：

  复制
  复制

  P = (n/N) × 100%

  其中P为死亡率，n为死亡株数，N为接种株数

2. 抗性评价

• ​有效性判定​：感病对照死亡率≥70%时鉴定有效
• ​分级标准​：

• ​重复鉴定​：初筛抗病材料需进行3-5次重复鉴定
• ​最终判定​：以最高死亡率结果为准

六、配套附录内容

附录A：病原与症状（资料性）

• ​病原学​：
  • 学名：Phytophthora sojae
  • 形态特征：菌丝无隔多核，孢子囊卵形/倒梨形，无乳突

• ​病害症状​：
  • 各生育期均可侵染
  • 典型表现：根茎腐烂、叶片黄化萎蔫、近地面茎部黑褐色病斑
  • 严重时导致植株猝倒死亡

附录B：培养基配方（规范性）

• ​CA培养基​：
  • 胡萝卜200g+蒸馏水500mL榨汁过滤
  • 补足至1000mL，加琼脂20g
  • 121℃灭菌20分钟

附录C：鉴定记录表（规范性）

包含品种编号、重复次数、接种株数、死亡株数、死亡率及抗性评价等字段的标准表格。

七、安全处理要求

1. 剩余接种体需实验室灭菌处理
2. 鉴定后植株和营养钵集中焚烧
3. 栽培基质需160℃干热灭菌

该标准通过规范化的操作流程和评价体系，为大豆抗疫霉根腐病抗性鉴定提供了科学可靠的技术依据。