GB 5009.307-2025 食品安全国家标准 食品中甲醛的测定

中华人民共和国国家标准
GB5009.307—2025
食品安全国家标准
食品中甲醛的测定
2025-03-16发布2025-09-16实施
中华人民共和国国家卫生健康委员会
国家市场监督管理总局发布
前 言
本标准代替GB/T5009.49—2008《发酵酒及其配制酒卫生标准的分析方法》中4.4甲醛的测定
方法。
本 标准与GB/T5009.49—2008中甲醛的测定方法相比,主要变化如下:
———标准名称更改为《食品安全国家标准 食品中甲醛的测定》;
———增加了标准的适用范围;
———保留“分光光度法”作为第一法,更改了方法的适用范围,增加了方法的检出限和定量限,对蒸
馏提取过程进行了优化;
———增加了“液相色谱法”为第二法。
Ⅰ
GB5009.307—2025
食品安全国家标准
食品中甲醛的测定
1 范围
本标准规定了食品中甲醛的测定方法。
本标准第一法适用于啤酒中甲醛的测定;第二法适用于食品中甲醛的测定。
第一法 分光光度法
2 原理
样品经水蒸气蒸馏,馏出液中的甲醛与乙酰丙酮反应生成黄色物质,在415nm 处有最大吸收,在
一定范围内,其吸光度值与甲醛含量成正比。
3 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的三级水。
3.1 试剂
3.1.1 冰乙酸(C2H4O2)。
3.1.2 乙酰丙酮(C5H8O2)。
3.1.3 乙酸铵(C2H7O2N)。
3.1.4 磷酸(H3PO4)。
3.1.5 二甲基硅油。
3.2 试剂配制
3.2.1 乙酰丙酮溶液:称取25.0g乙酸铵溶于90mL水中,再加入0.4mL乙酰丙酮和3.0mL冰乙
酸,用水稀释至100mL,混匀,移至棕色试剂瓶中。临用现配。
3.2.2 磷酸溶液(200g/L):称取20g磷酸,用水稀释至100mL,混匀,室温保存。
3.3 标准品
甲醛(CH2O,CAS号:50-00-0)标准溶液:1000mg/L,或其他经国家认证并授予标准物质证书的
标准品。
注:甲醛标准溶液也可通过36%~38%甲醛溶液配制并标定后使用,具体操作见附录A。
3.4 标准溶液配制
3.4.1 甲醛标准中间液(100mg/L):准确吸取1000mg/L甲醛标准溶液1.00mL,用水稀释并定容至
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10mL,配制成质量浓度为100mg/L甲醛标准中间液,2℃~8℃避光保存,有效期3个月。
3.4.2 甲醛标准工作液(1.0mg/L):准确吸取100mg/L甲醛标准中间液1.0mL,用水稀释并定容至
100mL,配制成质量浓度为1.0mg/L甲醛标准工作液。临用现配。
3.4.3 甲醛系列标准工作液:准确吸取1.0mg/L甲醛标准工作液0mL、0.50mL、1.0mL、2.0mL、
4.0mL、8.0mL和10.0mL分别置于25mL具塞比色管中,加水定容至10mL,配制成质量浓度分别
为0mg/L、0.050mg/L、0.10mg/L、0.20mg/L、0.40mg/L、0.80mg/L和1.0mg/L甲醛标准系列工
作液。临用现配。
4 仪器和设备
4.1 分光光度计。
4.2 水蒸气蒸馏装置。
4.3 水浴锅:可控温度100℃±1℃,精度为0.1℃。
5 分析步骤
5.1 试样制备
啤酒试样应密封保存;测试前将试样混合均匀,并用中速滤纸过滤的方式除去试样中的二氧化碳。
5.2 试样分析
5.2.1 蒸馏
准确吸取25.00mL试样,置于500mL蒸馏瓶中,加入20mL磷酸溶液(200g/L)、1mL二甲基硅
油、50mL水,进行水蒸气蒸馏;预先在250mL接收瓶中加入10mL水,接收管插入液面下,并置于冰
浴中;待收集馏出液约195mL时,取出;室温下放置30min,转移至200mL容量瓶中,加水定容至刻
度,摇匀备用。
5.2.2 显色
准确吸取5.2.1制备的馏出液10.0mL,置于25mL具塞比色管中。
向上述具塞比色管中加入1mL乙酰丙酮溶液(3.2.1),盖塞后,混匀。将具塞比色管在沸水浴中放
置5min,取出,冷却至室温。
5.3 空白试验
除不加试样外,其他步骤均按5.2步骤进行。
5.4 标准曲线的制作
按5.2.2的方法,将甲醛系列标准工作液(3.4.3)与试样同时同样处理;冷却至室温后,置于1cm 比
色皿中,以甲醛标准系列工作液的零点为参比调零,于415nm 测定吸光度值;以标准系列工作液的浓
度为横坐标,以其吸光度值为纵坐标,绘制标准曲线。
5.5 试样溶液的测定
将5.2和5.3所得溶液置于1cm 比色皿中,于415nm 测定吸光度值;若样品测得结果超出标准线
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性范围,则用空白试样溶液稀释后再进行测定。
注:所得样液应在1h内进行测定。
6 分析结果的表述
试样中甲醛的含量按式(1)计算。
X = (ρ-ρ0)×V
V1 ×1000 ×1000 ……………………(1)
式中:
X ———试样中甲醛的含量,单位为毫克每升(mg/L);
ρ ———由标准曲线得到的试样馏出液中甲醛的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);
ρ0 ———由标准曲线得到的空白馏出液中甲醛的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);
V ———试样馏出液的定容体积,单位为毫升(mL);
V1 ———试样的取样量,单位为毫升(mL);
1000 ———换算系数。
计算结果保留2位有效数字。
7 精密度
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。
8 其他
当取样量为25.00mL时,本方法的检出限为0.4mg/L,定量限为1.2mg/L。
第二法 液相色谱法
9 原理
在一定温度下,试样中的甲醛与衍生剂2,4-二硝基苯肼(DNPH)反应生成甲醛2,4-二硝基苯腙,净
化提取后,经液相色谱分离,二极管阵列检测器或紫外检测器检测,外标法定量。
10 试剂和材料
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
10.1 试剂
10.1.1 乙腈(C2H3N):色谱纯。
10.1.2 磷酸(H3PO4)。
10.1.3 磷酸氢二钠(Na2HPO4)。
10.1.4 2,4-二硝基苯肼(C6H6N4O4)。
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10.1.5 氯化钠(NaCl)。
10.2 试剂配制
10.2.1 磷酸缓冲溶液(pH=2):量取16.6mL磷酸,用水稀释至1L,得到溶液A;再称取71.63g磷
酸氢二钠,用水溶解并稀释至1L,得到溶液B;分别量取725 mL溶液A 和275 mL溶液B,混匀
备用。
10.2.2 2,4-二硝基苯肼溶液(0.6g/L):称取0.3g2,4-二硝基苯肼,用乙腈溶解并稀释至500mL,室
温避光保存。
10.2.3 衍生液:取等体积的磷酸缓冲溶液(10.2.1)和2,4-二硝基苯肼溶液(0.6g/L),混匀备用。临用
现配。
10.3 标准品
同3.3。
10.4 标准中间液配制
甲醛标准中间液(100mg/L):准确吸取1000mg/L甲醛标准溶液1.00mL,用水稀释并定容至
10mL,配制成质量浓度为100mg/L甲醛标准中间液,2℃~8℃避光保存,有效期3个月。
11 仪器和设备
11.1 高效液相色谱仪:配有二极管阵列检测器或紫外检测器。
11.2 电子天平:感量为1mg。
11.3 恒温水浴振荡器:可控温度25℃±1℃,精度为0.1℃。
11.4 涡旋混合器。
11.5 离心机:转速≥4000r/min。
11.6 0.45μm 有机系滤膜。
12 分析步骤
12.1 试样制备
固体试样,取可食部分,捣碎后制备成均匀试样,装入洁净的容器,密封并做好标识,冷藏保存。
液体试样应密封保存,测试前将试样混合均匀;含二氧化碳的试样,用中速滤纸过滤的方式除去二氧
化碳。
12.2 试样分析
12.2.1 衍生
酒类样品,准确吸取试样5.00mL;其他样品,称取制备好的试样2g(精确至0.01g),置于50mL
塑料离心管中,准确加入20mL衍生液(10.2.3),盖紧管盖,涡旋混匀,置于恒温水浴振荡器中,25℃±
1℃振摇1h,使其充分反应。
12.2.2 提取
向上述试液中立即加入8g氯化钠,涡旋混匀30s,以不低于4000r/min离心5min,取上层溶液
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于20mL容量瓶中;在离心管中再加入10 mL 乙腈,涡旋混匀30s,以不低于4000r/min 离心
5min,合并上层溶液,并用乙腈定容至刻度,混匀。经0.45μm 有机系滤膜过滤,供液相色谱测定。
12.3 空白试验
除不加试样外,其他步骤均按12.2步骤进行。
12.4 仪器参考条件
12.4.1 色谱柱:C18柱(柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm),或性能相当的色谱柱。
12.4.2 流动相:乙腈-水(50:50,体积比)。
12.4.3 柱温:30℃。
12.4.4 检测波长:350nm。
12.4.5 流速:1mL/min。
12.4.6 进样量:20μL。
12.5 标准曲线的制作
分别准确吸取100mg/L甲醛标准中间液0mL、0.050mL、0.10mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL
和0.80mL于50mL 塑料离心管中,按照12.2的衍生和提取步骤,得到质量浓度分别为0 mg/L、
0.25mg/L、0.50mg/L、1.0mg/L、2.0mg/L、3.0mg/L和4.0mg/L甲醛标准系列工作液。
将标准系列工作液按浓度由低到高依次注入高效液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以标准工作液
的浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。标准溶液的液相色谱图参见附录B中图B.1。
12.6 试样溶液的测定
将试样溶液注入液相色谱仪中,得到相应的峰面积,根据标准曲线得到试样溶液中甲醛的浓度。
注:衍生后所得样液应在24h内进行测定。
13 分析结果的表述
试样中甲醛的含量按式(2)计算。
X = (ρ-ρ0)×V
m ×1000 ×1000 ……………………(2)
式中:
X ———试样中甲醛的含量,单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/L);
ρ ———由标准曲线得到的试样溶液中甲醛的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);
ρ0 ———由标准曲线得到的空白试验样液中甲醛的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L);
V ———定容体积,单位为毫升(mL);
m ———试样的取样量,单位为克或毫升(g或mL);
1000 ———换算系数。
计算结果保留2位有效数字。
14 精密度
在重复性条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不应超过算术平均值的10%。
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15 其他
酒类样品,当取样量为5mL时,本方法的检出限为0.3mg/L,定量限为1.0mg/L。
其他样品,当取样量为2g时,本方法的检出限为1.5mg/kg,定量限为5.0mg/kg。
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附 录 A
甲醛标准溶液的配制及标定
A.1 试剂
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
A.1.1 甲醛溶液(CH2O)。
A.1.2 硫酸(H2SO4)。
A.1.3 氢氧化钠(NaOH)。
A.1.4 可溶性淀粉。
A.1.5 碘(I2)。
A.1.6 硫代硫酸钠(Na2S2O3)。
A.2 试剂配制
A.2.1 硫酸溶液(1mol/L):量取54mL硫酸,缓慢注入适量水中,冷却至室温后用水定容至1000mL。
A.2.2 碘溶液(0.1mol/L):按照GB/T601中4.9的方法配制。
A.2.3 氢氧化钠溶液(1mol/L):按照GB/T601中4.1的方法配制。
A.2.4 淀粉指示剂(5g/L):称取0.5g可溶性淀粉,加5mL水使其成糊状,在搅拌下将糊状物缓缓倒
入90mL沸水中,搅匀,煮沸2min,冷却稀释至100mL。临用现配。
A.2.5 硫代硫酸钠标准滴定溶液(0.100mol/L):按照GB/T601中4.6的方法配制和标定。
A.3 甲醛标准溶液的配制
吸取36%~38%甲醛溶液7.0mL,加入1mol/L硫酸溶液0.5mL,用水定容至250mL,混匀;吸
取上述溶液10.0mL于100mL容量瓶中,加水定容至刻度。
A.4 甲醛标准溶液的标定
吸取10.0mL甲醛标准溶液(A.3)于250mL碘量瓶中,加水90mL、0.1mol/L碘溶液20mL和
1mol/L 氢氧化钠溶液15 mL,摇匀,放置15 min。再加入1 mol/L 硫酸溶液20 mL 酸化,用
0.1000mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色,然后加入5g/L淀粉指示剂1mL,继续滴定至蓝色
褪去即为终点。同时做试剂空白试验。
甲醛标准储备液的浓度按公式(A.1)计算。
X = (V0 -V1)×c×15×1000
10 ……………………(A.1)
式中:
X ———甲醛标准储备液的浓度,单位为毫克每升(mg/L);
V0 ———滴定空白溶液消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
V1 ———滴定甲醛溶液消耗硫代硫酸钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);
c ———硫代硫酸钠标准滴定溶液的摩尔浓度,单位为摩尔每升(mol/L);
15 ———0.5mol甲醛的质量,单位为克每摩尔(g/mol);
1000———单位换算系数;
10 ———滴定时吸取甲醛溶液的体积,单位为毫升(mL)。
结果保留4位有效数字。
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附 录 B
甲醛标准物质衍生物的液相色谱图
甲醛标准物质衍生物的液相色谱图见图B.1。
图B.1 甲醛标准溶液衍生物(4.0mg/L)的液相色谱图
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